粘膜炎莫拉氏(布拉汉氏)菌多肽及相应DNA片段制造技术

本发明专利技术涉及可用于预防、诊断和／或治疗用途的粘膜炎莫拉氏（布拉汉氏）菌多肽。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及可用于预防、诊断和/或治疗粘膜炎莫拉氏(布拉汉氏)菌(Moraxella(Branhamella)catarrhalis)感染的多肽，特别是粘膜炎莫拉氏(布拉汉氏)菌的SMC-1和SMC-2多肽。
技术介绍
粘膜炎莫拉氏(布拉汉氏)菌为革兰氏阴性双球菌，可引起人体呼吸道感染。目前认为在婴幼儿和儿童中，粘膜炎莫拉氏菌是仅次于肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)和流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)引起中耳炎的第三常见致病因。粘膜炎莫拉氏菌还和其他几种类型的感染有关，其中包括鼻窦炎、持续性咳嗽、急性咽喉炎、化脓性角膜炎和新生儿结膜炎。由于近90％的粘膜炎莫拉氏菌株系对抗生素具有抗性(β-内酰胺酶阳性)，而且复发的中耳炎具有高发病率，因而有必要开发一种能使宿主免受粘膜炎莫拉氏菌感染的疫苗。由粘膜炎莫拉氏菌引起的感染诱导产生针对细菌细胞表面抗原的免疫应答。然而，许多这些表面蛋白质尚未得到鉴定，而且对防护不同株系感染的免疫反应也没有确定。为了开发一种能使宿主免受粘膜炎莫拉氏菌感染的疫苗，人们主要集中对外膜蛋白质进行尝试，此类蛋白质如名为遍在的表面蛋白质A(UspA)的高分子量蛋白质。该蛋白质被认为是有价值的疫苗备选物，因为在鼠类肺部清除模型中其单克隆抗体和多克隆抗体均表现为具有杀菌和防护功效。然而，该蛋白质对不同的粘膜炎莫拉氏菌株系表现出强烈的差异。除该蛋白质以外，其他粘膜炎莫拉氏菌蛋白质作为潜在疫苗备选物也引发了兴趣。铁传递蛋白结合蛋白暴露于细菌表面，具有保守的抗原决定部位。然而，从一个株系到另一株系蛋白质间存在抗体交叉反应性程度上的偏差。其他一些研究者还关注于45kDa的蛋白质CD(OMP CD)。该蛋白质在粘膜炎莫拉氏菌各株系中高度保守，然而患有慢性梗阻性肺病的成年人中表现出对OMP CD的免疫应答的差异性。因此对用于预防、诊断和/或治疗粘膜炎莫拉氏(布拉汉氏)菌感染的粘膜炎莫拉氏菌多肽仍然存在仍未满足的需求。专利技术概述从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少70％同一性。从一方面来看，本专利技术涉及包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多肽。从另一方面来看，提供由本专利技术的多聚核苷酸编码所得的多肽、药物组合物、包含可操作地与表达控制区相连接的本专利技术多聚核苷酸的载体，以及转染上述载体的宿主细胞和包含在适于表达的条件下培养上述宿主细胞以生产多肽的方法。专利技术简述附图说明图1出示来源于粘膜炎莫拉氏菌株ETSU C-2的SMC-1基因的DNA序列；SEQ ID NOS1。序列下划线部分表示编码引导肽的区域。图2出示来源于粘膜炎莫拉氏菌株ETSU C-2的SMC-1多肽的氨基酸序列；SEQ ID NOS2。序列下划线部分表示35个氨基酸残基的引导肽。图3出示来源于粘膜炎莫拉氏菌株ETSU C-2的SMC-2基因的DNA序列；SEQ ID NOS3。序列下划线部分表示编码引导肽的区域。图4出示来源于粘膜炎莫拉氏菌株ETSU C-2的SMC-2多肽的氨基酸序列；SEQ ID NOS4。序列下划线部分表示47个氨基酸残基的引导肽。专利技术详述本专利技术提供分离和纯化的多聚核苷酸，其编码的莫拉氏菌多肽可用于预防、诊断和/或治疗莫拉氏菌感染。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少70％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少80％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少95％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少98％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少70％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少80％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少95％同一性。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其编码的多肽与包含SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少98％同一性。从一方面来看，本专利技术涉及包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的氨基酸序列的多肽。从一方面来看，本专利技术涉及包含选自SEQ ID NOS2和4的氨基酸序列的多肽。从一方面来看，本专利技术涉及的多肽特征为其氨基酸序列包含SEQ IDNOS2，4或其片段或类似物。从一方面来看，本专利技术涉及的多肽特征为其氨基酸序列包含SEQ IDNOS2，或4。从一方面来看，本专利技术提供一种多聚核苷酸，其编码包含选自SEQID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多肽的带有抗原决定部位的一部分。从一方面来看，本专利技术提供一种多聚核苷酸，其编码的抗原决定部位带有包含选自SEQ ID NOS2或4序列的多肽的一部分。从一方面来看，本专利技术涉及包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多肽的带有抗原决定部位的一部分。从一方面来看，本专利技术涉及包含选自SEQ ID NOS2或4序列的多肽的带有抗原决定部位的一部分。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其包含选自下列的多聚核苷酸(a)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少70％同一性的多聚核苷酸；(b)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少80％同一性的多聚核苷酸；(c)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少95％同一性的多聚核苷酸；(d)编码的多肽包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多聚核苷酸；(e)编码的多肽能引发具有与包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多肽的结合特异性的抗体的多聚核苷酸；(f)编码包含选自SEQ ID NOS2，4或其片段或类似物的序列的多肽的带有抗原决定部位的一部分的多聚核苷酸；(g)包含选自SEQ ID NOS1，3或其片段或类似物的序列的多聚核苷酸；(h)与(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)或(g)中的多聚核苷酸互补的多聚核苷酸。从一方面来看，本专利技术提供一种分离的多聚核苷酸，其包含选自以下的多聚核苷酸(a)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少70％同一性的多聚核苷酸；(b)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少80％同一性的多聚核苷酸；(c)编码的多肽与包含选自SEQ ID NOS2或4序列的第二多肽有至少95％同一性的多聚核苷酸；(d)编本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多聚核苷酸，包含选自下列的多聚核苷酸：（ａ）编码的多肽与包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：２，４或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少７０％同一性的多聚核苷酸；（ｂ）编码的多肽与包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：２ ，４或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少８０％同一性的多聚核苷酸；（ｃ）编码的多肽与包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：２，４或其片段或类似物的序列的第二多肽有至少９５％同一性的多聚核苷酸；（ｄ）编码包含选自ＳＥＱＩＤ　 　ＮＯＳ：２，４或其片段或类似物的序列的多肽的多聚核苷酸；（ｅ）编码的多肽能引发对包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：２，４或其片段或类似物的序列的多肽具有结合特异性的抗体的多聚核苷酸；（ｆ）编码多肽的带有抗原决定部位的部分的 多聚核苷酸，该多肽包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：２，４或其片段或类似物的序列；（ｇ）包含选自ＳＥＱＩＤＮＯＳ：１，３或其片段或类似物的序列的多聚核苷酸；（ｈ）与（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）或（ｇ ）中的多聚核苷酸互补的多聚核苷酸。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：D马丁，J哈梅尔，BR布罗德尔，S理欧克斯，J库图尔，
申请(专利权)人：希雷生物化学有限公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]