本发明专利技术涉及用ＤＮＡ重组技术方法获得的修饰抗体，它是用在布达佩斯条约下保藏号ＥＣＡＣＣ９４１１３０２６保藏的杂交瘤细胞系生产的鼠单克隆抗体Ｐ３（ＭＡｂ Ｐ３）和保藏号ＥＣＡＣＣ９７１１２９０１保藏的杂交瘤细胞系生产的其抗独特型鼠单克隆抗体１Ｅ１０（ＭＡｂａｉ １Ｅ１０）来生产的，获得单克隆抗体的目的是，保持原始抗体的与抗原特异性结合的生物功能，然而又具有减少的免疫原性。本发明专利技术的嵌合抗体含有鼠免疫球蛋白的可变区和人免疫球蛋白的恒定区；除含有人免疫球蛋白的恒定区之外，并且将其人源化，其在鼠类构架区（ＦＲｓ），尤其在那些处于Ｔ细胞抗原位点中的区域被修饰，因此，若干ＦＲｓ的位置也是人的。该抗体可以在不同类型的肿瘤的诊断和治疗中应用。本发明专利技术还涉及用于治疗和诊断目的的抗体的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
，尤其是用基因工程获得的新的重组抗体，具体地说是从鼠单克隆抗体P3(MAb P3)和其抗独特型(anti-idiotype)鼠单克隆抗体1E10(MAbai 1E10)获得的嵌合和人源化抗体。更具体地说，本专利技术涉及与含有N-乙醇酰化(N-glycolylated)唾液酸的神经节苷脂结合的抗体，但是，其既不与乙酰化形式的神经节苷脂也不与中性糖脂结合。含有N-乙醇酰化唾液酸的神经节苷脂是在乳腺癌和黑素瘤中广泛表达的抗原。另一方面，MAbai 1E10的抗肿瘤效果亦已经在实验模型中被证明。本专利技术还涉及药物组合物，其含有前面所述的在癌症，尤其在乳腺癌和黑素瘤的诊断和治疗中有用的重组抗体。现有技术神经节苷脂是含有唾液酸的糖鞘脂并且存在于脊椎动物细胞的胞质膜中(Stults等人(1989)糖鞘脂结构、生物学来源和特性(Glycosphingolipidsstructure，biological source andproperties)，Methods Enzymology，179167-214)。在文献中已见某些该种分子作为肿瘤相关或肿瘤标记抗原的报道(Hakomori等人(1991)肿瘤相关碳水化合物类抗原的可能的功能(Possiblefunctions of tumor associated carbohydrate antigens)，Curr.Opin.Immunol.，3646-653)，由于这个原因，抗神经节苷脂抗体的应用已经被认为在癌的诊断和治疗中是有用的(Hougton等人(1985)检测GD3神经节苷脂的鼠单克隆抗体IgG3抗体在恶性黑素瘤患者中的第I阶段试验(Mouse monoclonal antibody IgG3antibody detecting GD3 gangliosideto phase I trial inpatients with malignant melanoma)，PNAS USA，821242-1246；Zhang等人(1997)应用免疫组织化学筛选作为免疫攻击目标的碳水化合物类肿瘤抗原，I.聚焦在神经节苷脂上(Selection ofcarbohydrate tumor antigens as targets for immune attackusing immunohistochemistry.I.Focus on gangliosides)，Int.J.Cancer，7342-49)。在动物中更经常表达的唾液酸是N-乙酰化(NeuAc)和N-乙醇酰化(NeuGc)(Corfield等人(1982)唾液酸的发生(Occurrence ofsialic acids)，Cell.Biol.Monogr.，105-50)。一般来说，NeuGc在正常人和鸡的组织中不表达，但在其它脊椎动物中分布广泛(Leeden和Yu，(1976)唾液酸化学和分析(Chemistry andanalysis of sialic acid).Biological Role of Sialic Acid.Rosemberg A和Shengtrund CL(Eds).Plenum Press，New York，1-48；Kawai等人(1991)用气相色谱质谱联用法对人癌组织和禽淋巴瘤细胞系中表达的作为肿瘤相关的唾液酸的N-羟乙酰神经氨酸进行定量测定(Quantitative determination of N-glycolylneuraminic acid expression in human canceroustissues and avian lymphoma cell lines as a tumor associatedsialic acid by gas chromatography-mass spectrometry)，Cancer Research，511242-1246)。但是，有报道指出，抗-NeuGc抗体，可识别某些人的肿瘤和肿瘤细胞系(Higashi等人(1988)在人视网膜母细胞瘤细胞中作为N-羟乙酰神经氨酸特异的肿瘤相关Hanganutziu-Deicher抗原的神经节苷脂的检测(Detection of gangliosides as N-glycolylneuraminic acidspecific tumor-associated Hanganutziu-Deicher antigen inhuman retinoblastoma cells)，Jpn.J.Cancer Res.，79952-956；Fukui等人(1989)在人的胃癌细胞系NUGC4中作为肿瘤相关Hanganutziu-Deicher抗原的糖蛋白的检测(Detection ofglycoproteins as tumor-associated Hanganutziu-Deicherantigen in human gastric cancer cell line)，Biochem.Biophys.Res.Commun.，1601149-1154)。在人的乳腺癌中已发现GM3(NeuGc)神经节苷脂水平的提高(Marquina等人(1996)在人的乳腺癌中表达的神经节苷脂(Gangliosides expressed inhuman breast cancer)，Cancer Research，1996；565165-5171)，这一结果使该分子作为癌症治疗的靶位的应用受到注意。用保藏号ECACC 94113026的细胞系生产单克隆抗体(Mab)P3(欧洲专利EP 0 657 471 B1)，它是有着IgM同种型的鼠单克隆抗体，它是在融合用含有GM3(NeuGc)和破伤风类毒素的脂质体接种过的BALB/c小鼠的脾细胞和鼠骨髓瘤细胞系P3-X63-Ag8.653时获得。该Mab P3与含有N-乙醇酰化唾液酸的神经节苷脂起强烈反应但既不与乙酰化形式的神经节苷脂也不与中性糖脂起反应。用从良性的和恶性的肿瘤中得到的细胞系和组织进行免疫细胞化学和免疫组织化学研究证明，Mab P3识别乳腺癌(Vázquez等人(1995)，对N-羟乙酰神经氨酸特导的鼠单克隆抗体的产生，其亦识别硫酸糖脂(Generation of a murine monoclonal antibody specific for N-glycolylneuraminic acid-containing gangliosides that alsorecognizes sulfated glycolipids)，Hybridoma，14551-556)和黑素瘤。即使不用佐剂和载体蛋白，Mab P3诱导了BALB/c小鼠(同基因模型)的抗独特型免疫反应(Vázquez等人(1998)抗含有抗NeuGc的神经节苷脂的单克隆抗体的同基因抗独特型单克隆抗体(Syngeneic antiidiotypic monoclonal antibodies to an anti-NeuGc-containing ganglioside monoclonal antibody)；Hybridoma，17527-本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种嵌合单克隆抗体，它从可识别鼠类ＭＡｂＰ３的鼠类抗独特型单克隆抗体１Ｅ１０得到，所述单克隆抗体１Ｅ１０由保藏号为ＥＣＡＣＣ９７１１２９０１的杂交瘤细胞系生产，其中其重链和轻链的高度可变区包括下述序列：重链ＣＤＲ１：ＳＹ ＤＩＮＣＤＲ２：ＷＩＦＰＧＤＧＳＴＫＹＮＥＫＦＫＧＣＤＲ３：ＥＤＹＹＤＮＳＹＹＦＤＹ轻链ＣＤＲ１：ＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＣＤＲ２：ＹＴＳＲＬＨＳＧＣＤＲ３：ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：CM马特德阿考斯塔德尔里奥，J罗姆巴德罗瓦拉达里斯，LT罗克纳瓦罗，A洛佩兹勒奎那，
申请(专利权)人：CM马特德阿考斯塔德尔里奥，J罗姆巴德罗瓦拉达里斯，LT罗克纳瓦罗，A洛佩兹勒奎那，
类型：发明
国别省市：CU[古巴]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。