肠血管活性多肽药物制造技术

本发明专利技术提供了涉及肠血管活性多肽的药物组合物和治疗包括糖尿病、胰岛素抵抗、代谢性酸中毒和肥胖症在内的代谢紊乱的方法。也公开了使用肠血管活性多肽组合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及多肽类似物及其合成和用途。更具体而言，本专利技术涉及与肠血管活性多肽有关的合成多肽类似物，及其药物组合物。
技术介绍
当消化道中存在食物时，肠中的细胞分泌激素信号(“ 肠降血糖素”)，使胰腺对葡萄糖的存在敏感，并且导致增强的葡萄糖依赖性胰岛素分泌反应。对于肠降血糖素信号、胰高血糖素样肽1(GLP1)和葡萄糖依赖性胰岛素释放肽(GIP)，见到这种提供葡萄糖依赖性胰岛素释放的协同反应(Kieffer TJ和Habener，JR(1999)Endocr.Rev.20，876-913)。这些肠降血糖素信号一般在体内表现为短作用时间，GLP1表现大约1-2分钟的t1/2(Knudsen，LB 2004，J.Med.Chem.47，4128-34)。GLP1和GIP被氨肽酶、二肽酰肽酶IV(DPPIV)切割，因此在医药制剂中通常不使用自然存在的天然激素。在毒蜥(GilaMonster)唾液中发现的一种肽(毒蜥外泌肽4(exendin 4)，Exenatide；Amylin Pharmaceuticals，San Diego，California)显示与GLP1受体结合，并且表现出强激动活性，从而引起期望的葡萄糖依赖性胰岛素分泌反应(Nielsen LL，Young，AA，Parkes，DG(2004)Regul.Peptides，117，77-88)。曾经给需要治疗的2型糖尿病患者施用了Exenatide和GLP1的类似物。垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)是一种神经调节肽，它刺激PAC1、VPAC1和VPAC2受体，是从胰腺中的神经末梢上释放的。该普通类别的受体存在于包括胰腺在内的体内多种组织内。在胰腺中，VPAC2受体的刺激显示响应血糖水平升高提供增强的葡萄糖依赖性胰岛素释放，这类似于GLP1或exenatide(Tsutsumi，M.等人(2002)Diabetes 51，1453-60)。因此，这种刺激(来自于PACAP或VPAC激动类似物)可以在刺激葡萄糖依赖性胰岛素释放中与肠降血糖素样信号协同或作为其替代，因为第二类受体的激活导致增强的胰岛素分泌的类似的分布。这种作用将有利于包括2型糖尿病(T2DM)、代谢性酸中毒、胰岛素抵抗和肥胖症在内的代谢紊乱的治疗。然而，自然存在的PACAP及其类似物的天然序列在体内的存在期一般也较短。合成毒蜥外泌肽-4是作用期较短的肽，因此医学上需要能够调节葡萄糖依赖性胰岛素分泌的长效的肽。专利技术概述本专利技术提供PACAP和肠血管活性多肽(VIP)的合成多肽类似物及其盐，其中C末端包含形成两亲性α螺旋的氨基酸残基，所述残基选自亲水性氨基酸(Haa)和亲脂性氨基酸(Laa)，排列顺序为Haa(Laa Laa Haa Haa)nLaa其中n＝1-5。在一个实施方案中，n＝1或2。在本专利技术的PACAP和VIP多肽类似物中引入的修饰有利于延长激活PACAP和VIP家族受体，优选VPAC2受体的治疗剂的作用持续时间。不局限于任何特定理论，认为作用持续时间的延长可能是由于C末端区域中的两亲性螺旋与体内细胞膜的磷脂相互作用的能力，从而具有“贮库(depoting)”作用。因此，本专利技术的肽类似物与细胞膜结合，然后缓慢再释放到细胞质中，在远处发挥其作用。相反，如果细胞质中不含诸如PACAP、VIP或GLP1的肽，则它被蛋白酶快速作用或通过肾小球过滤而被清除。因此，本专利技术的一个方面提供PACAP、VIP的类似物和其生理学活性的截短类似物和同系物，或其盐，其中C末端包含形成两亲性α-螺旋的氨基酸残基，所述残基的序列选自具有稳定所述α-螺旋的能力的天然氨基酸或选择的非天然氨基酸。还提供了用于递送有效葡萄糖依赖性胰岛素释放量的PACAP、VIP的多肽类似物和其生理学活性的截短类似物和同系物或其盐的药物组合物，其中C末端包含形成两亲性α-螺旋的氨基酸残基，所述残基选自排列顺序如下的亲水性氨基酸(Haa)和亲脂性氨基酸(Laa)Haa(Laa Laa Haa Haa)nLaa；其中n＝1-5。本专利技术进一步提供治疗以高血糖为特征的哺乳动物疾病的方法，该方法包括给需要的哺乳动物施用有效葡萄糖依赖性胰岛素释放量的PACAP、VIP的多肽类似物和其生理学活性的截短类似物和同系物，或其盐，其中C末端包含形成两亲性α-螺旋的氨基酸，所述残基选自排列顺序如下的亲水性氨基酸(Haa)和亲脂性氨基酸(Laa)Haa(Laa Laa Haa Haa)nLaa；其中n＝1-5。本专利技术也包括用于固相合成PACAP、VIP的多肽类似物和其生理学活性的截短类似物和同系物或其盐的方法，其中C末端包含形成两亲性α-螺旋的氨基酸残基，所述残基选自排列顺序如下的亲水性氨基酸(Haa)和亲脂性氨基酸(Laa)Haa(Laa Laa Haa Haa)nLaa；其中n＝1-5。此处所述用于制备多肽类似物的方法包括将受到保护的氨基酸连续偶联到适当的树脂支持物上，除去侧链和Nα保护基，并且从树脂上切下多肽。本专利技术还提供用于重组合成PACAP、VIP的多肽类似物和其生理学活性的截短类似物和同系物或其盐的DNA序列、载体和质粒，其中C末端包含形成两亲性α-螺旋的氨基酸残基，所述残基选自排列顺序如下的亲水性氨基酸(Haa)和亲脂性氨基酸(Laa)Haa(Laa Laa Haa Haa)nLaa；其中n＝1-5。另外，本专利技术还提供用于预防和治疗包括糖尿病、胰岛素抵抗、高血糖症、代谢性酸中毒和肥胖症在内的表现为血糖水平升高的多种代谢紊乱的药物组合物和方法，包括有效量的本专利技术的多肽，或其盐，和药学可接受的载体。在本专利技术的其它方面，治疗有效量的代谢紊乱化合物，包括胰岛素、胰岛素类似物、肠降血糖素、肠降血糖素类似物、胰高血糖素样肽、胰高血糖素样肽类似物、毒蜥外泌肽，毒蜥外泌肽类似物、磺酰脲类、双缩胍类、α-葡糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类、过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)激动剂、PPAR拮抗剂和PPAR部分激动剂，可以与本专利技术的多肽联合施用。附图简述附图说明图1A、1B和1C是本专利技术的示例性多肽类似物的列表。使用氨基酸单字母缩写的标准命名。字母“X”是指具有C10-C3000链的聚乙二醇链。术语“酰基”是指C2-C16酰基链。字母“Z”是指在ε位具有长酰基链的赖氨酸。术语“hex”是指己酰基。术语“pen”是指戊酰基。术语“lau”是指月桂酰基。术语“myr”是指肉豆蔻酰基。术语“ste”是指硬脂酰基。术语“pr”是指丙酰基。图2列出了其他多肽和多肽类似物。专利技术详述缩写和定义各种常用核苷酸碱基和氨基酸的单字母和三字母缩写按照PureAppl.Chem.31，639-645(1972)和40，277-290(1974)的建议，并符合37CFR.sctn.1.822(55 FR 18245，May 1，1990)。除非另外指出为D-或DL，缩写表示L-氨基酸。某些天然和非天然的氨基酸是无手性的，例如，甘氨酸。所有肽序列都以左侧为N末端氨基酸，右侧为C末端氨基酸的形式表示。“亲水性氨基酸(Haa)”是指除了肽键形成所需的官能团外还具有至少一个亲水性官能团的氨基酸，如精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸及本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肠血管活性多肽，选自：（ａ）对应于通式（Ⅰ）的多肽：酰基－Ｈｉｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－ａａ↓［１］－ａａ↓［２］－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－ａａ↓［３］－ａａ↓［４］－Ｔｙｒ－ａａ↓［５］－Ａｒｇ－ａａ↓［６］－Ａｒｇ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－ａａ↓［７］－Ａｌａ－ａａ↓［８］－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－ａａ↓［９］－ａａ↓［１０］－ａａ↓［１１］－ａａ↓［１２］－ａａ↓［１３］－ａａ↓［１４］－ａａ↓［１５］－ａａ↓［１６］－Ｈａａ－（Ｌａａ－Ｌａａ－Ｈａａ－Ｈａａ）↓［ｎ］－Ｌａａ－Ｌｙｓ（ε－长酰基）－Ｘ通式（Ⅰ）其中：ｎ＝１－３；Ｈａａ是亲水性氨基酸；Ｌａａ是亲脂性氨基酸；酰基是Ｃ↓［２－１６］酰基链；长酰基是Ｃ↓［１２－２４］酰基链；Ｘ是ＯＨ或ＮＨＲ１，其中Ｒ１是Ｈ或低级烷基、卤代烷基或ＰＥＧ；ａａ↓［１］是Ｇｌｙ或Ａｌａ；ａａ↓［２］是Ｖａｌ、Ｉｌｅ或Ｌｅｕ；ａａ↓［３］是Ａｓｐ或Ａｒｇ；ａａ↓［４］是Ｓｅｒ或Ａｓｎ；ａａ↓［５］是Ｓｅｒ或Ｔｈｒ；ａａ↓［６］是Ｌｅｕ或Ｔｙｒ；ａａ↓［７］是Ｍｅｔ、Ｌｅｕ或Ｖａｌ；ａａ↓［８］是Ａｌａ或Ｖａｌ；ａａ↓［９］是Ａｓｎ、Ｇｌｎ或Ａｌａ；ａａ↓［１０］是Ｔｒｐ、Ａｌａ或Ｓｅｒ；ａａ↓［１１］是Ｉｌｅ或Ｖａｌ；ａａ↓［１２］是Ｌｅｕ或Ｌｙｓ；ａａ↓［１３］是Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｓｎ或Ｇｌｙ；ａａ↓［１４］是Ａｌａ或Ｇｌｙ；ａａ↓［１５］是Ｌｙｓ或Ａｒｇ；且ａａ↓［１６］是Ｌｙｓ或Ａｒｇ；（ｂ）对应于通式（Ⅱ）的多肽：酰基－Ｈｉｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－ａａ↓［１］－ａａ↓［２］－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－ａａ↓［３］－ａａ↓［４］－Ｔｙｒ－ａａ↓［５］－Ａｒｇ－ａａ↓［６］－Ａｒｇ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－ａａ↓［７］－Ａｌａ－ａａ↓［８］－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－ａａ↓［９］－ａａ↓［１０］－ａａ↓［１１］－ａａ↓［１２］－ａａ↓［１３］－ａａ↓［１４］－ａａ↓［１５］－ａａ↓［１６］－Ｈａａ－（Ｌａａ－Ｌａａ－Ｈａａ－Ｈａａ）↓［ｎ］－Ｌａａ－ａａ↓［１７］－Ｐｒｏ－Ｐｒｏ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ（ε－长酰基）－Ｘ通式（Ⅱ）其中：ｎ＝１－３；Ｈａａ是亲水性氨基酸；Ｌａａ是亲脂性氨基酸；酰基是Ｃ↓［２－１６］酰基链；长酰基是Ｃ↓［１２－２４］酰基链；Ｘ是ＯＨ或ＮＨＲ１，其中Ｒ１是Ｈ或低级烷基、卤代烷基或ＰＥＧ；ａａ↓［１］是Ｇｌｙ或Ａｌａ；ａａ↓［２］是Ｖａｌ、Ｉｌｅ或Ｌｅｕ；ａａ↓［３］是Ａ...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J内斯特，
申请(专利权)人：福布斯梅迪泰克研究公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]