一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法技术

本发明专利技术公布了一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法，属于分析化学检测领域。方法包括以下步骤：（1）提取：称取试样于50ml离心管中，加入乙腈，均质1min，再加入无水硫酸钠、氯化钠，振荡、离心后收集上清液于梨形瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干。（2）净化：分别使用甲醇、水活化石墨烯固相萃取柱，然后将样品溶解过柱，最后用乙腈洗脱，收集洗脱液；（3）检测：将洗脱液用氮气吹干后，加入流动相溶解，过有机相滤膜，进液相色谱‑串联质谱检测。本发明专利技术的有益效果是，利用石墨烯固相萃取技术，建立了简便、快速的涕灭威及其代谢物检测方法，方法操作简单、成本低，能够减少样品基质干扰，适用于蔬菜水果检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法，尤其是一种石墨烯固相萃取结合液相色谱串联质谱检测果蔬中涕灭威及其代谢物残留的方法，属于分析化学检测领域。
技术介绍
涕灭威是一种高效、剧毒的氨基甲酸酯类杀虫剂，被广泛应用于水果蔬菜种植领域，涕灭威在一定条件下容易被氧化成毒性更高的代谢物涕灭威砜、涕灭威亚砜。由于高效、经济而被广泛应用于水果蔬菜种植过程，因此而导致的涕灭威及其代谢物药物残留及中毒事件时有发生。目前检测中常用的净化方法是固相萃取法，常用的吸附材料有C18、GCB、PSA、碳纳米管等。石墨烯比表面积大，理论值达2630m2/g，具有良好的耐酸碱性、耐热性能和化学稳定性、极强的疏水性、易于进行功能化修饰等优点,亦可与有机分子产生强的π-π相互作用。石墨烯是由天然石墨制备的，其具有制备成本低廉、原料易得且容易实现规模化制备等优点，比碳纳米管更具竞争优势。石墨烯固相萃取用于生姜中涕灭威及其代谢物的检测尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法，包括如下步骤。（1）提取：称取2-10g试样，加入10-30ml乙腈，均质1-3min，再加入无水硫酸钠、氯化钠，振荡提取1-3min后，6000-9000r/min条件下离心5-8min，收集上清液于梨形瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干。残渣用乙腈-0.1%甲酸水溶解，待净化。（2）净化：分别使用甲醇、水活化石墨烯固相萃取柱，然后将样品溶解液以1mL/min的速度过柱，最后用3mL乙腈洗脱，收集洗脱液至15mL离心管中。（3）检测：将洗脱液用氮气吹干后，加入1mL流动相溶解，过0.22μm有机相滤膜，样液进液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行检测。方法中涕灭威及其代谢物包括涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜。步骤（2）石墨烯固相萃取柱的制作方法是在3mL空管柱（事先用超纯水、乙腈洗涤，晾干）加入筛板，用玻璃棒压平，装入15mg石墨烯后盖上筛板。步骤（3）仪器检测所使用的液相色谱-串联质谱配有电喷雾离子源（ESI）。检测时的色谱条件为：色谱柱：Poroshell120EC-C18，3.0×100mm，2.7μm；柱温：30℃；进样体积：1μL；流动相：A为甲醇、B为水；洗脱程序：0-4min，5%-70%A；4-5min，70%A；3-7min，20%A；5-7.1min，70%-5%A；10min，5%A；流速：0.3mL/min。检测时的质谱条件为：扫描模式：正离子模式；检测方式：多反应监测；干燥气温度：325℃；干燥气流速：10L/min；雾化气压力：45psi；鞘气温度：350℃；鞘气流速：11L/min；毛细管电压：4000V；碰撞气：高纯氮；各离子对驻留时间均为70ms。表1涕灭威及其代谢物的质谱参数。本专利技术的有益效果是，利用石墨烯固相萃取技术，建立了简便、快速的涕灭威及其代谢物残留检测方法，方法具有良好的线性关系和精密度，回收率高，检出限和定量限均能满足检测需要，适用于水果蔬菜中涕灭威及其代谢物残留的检测。具体实施方式以生姜检测为例来说明本专利技术。仪器设备：美国Agilent公司1290-6460液相色谱-串联质谱仪，配有喷射流离子聚焦电喷雾离子源（AJS-ESI）；德国IKA公司GM200型高速均质机；日本东京理化MMV-1000W型振荡器；日本Hitachi公司CR22GⅢ型高速冷冻离心机；瑞士Buchi公司R215型旋转蒸发仪；德国IKA公司MS3型涡旋混匀器。材料与试剂：石墨烯由济宁利特纳米技术有限责任公司提供；3mL空柱管、筛板（孔径≤20μm）购于天津博纳艾杰尔公司；甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯甲酸均为色谱纯；无水硫酸钠（650℃灼烧4h，冷却后贮存于干燥器中，备用）、氯化钠、氨水为分析纯；实验用水为超纯水。标准品：涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜标准品均为100mg/L，1mL，购自农业部环境保护科研监测所。固相萃取柱制作取准备好的3mL的空管柱（事先用超纯水、乙腈洗涤，晾干）加入筛板，用玻璃棒压平，装入15mg石墨烯后盖上筛板，备用。样品前处理提取：称取5g试样（精确至0.01g）于50ml离心管中，加入20ml乙腈，均质1min，再加入4g无水硫酸钠、1g氯化钠，振荡提取1min后，在4℃，9000r/min条件下离心5min，收集上清液于梨形瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干。残渣用5ml乙腈-0.1%甲酸水溶液（10+90，体积比）溶解，待净化。净化：分别使用3mL甲醇、3mL水活化事先准备好的石墨烯固相萃取柱，然后将样品溶解液以1mL/min的速度过柱，最后用3mL乙腈洗脱，收集洗脱液至15mL离心管中，氮气吹干后用1mL流动相溶解，过0.22μm有机相滤膜，上机检测。液相色谱条件。色谱柱：Poroshell120EC-C18，3.0×100mm，2.7μm。柱温：30℃。进样体积：1μL。流动相：A为甲醇、B为水。流动相梯度洗脱程序：0-4min，5%-70%A；4-5min，70%A；3-7min，20%A；5-7.1min，70%-5%A；10min，5%A。流速：0.3mL/min。质谱条件。离子源：喷射流离子聚焦电喷雾离子源。扫描模式：正离子模式。检测方式：多反应监测。干燥气温度：325℃。干燥气流速：10L/min。雾化气压力：45psi。鞘气温度：350℃。鞘气流速：11L/min。毛细管电压：4000V。碰撞气：高纯氮。各离子对驻留时间均为70ms。表2涕灭威及其代谢物的质谱参数。方法评价。分别配制浓度为5、10、20、50、100、150、200μg/L的涕灭威及其代谢物农药混合标准溶液，按优化后的实验条件进行前处理，然后利用液相色谱-串联质谱仪进行分析，得到涕灭威及其代谢物标准工作曲线，相关系数良好，均大于0.995；通过在阴性样品中添加不同浓度梯度的涕灭威及其代谢物混合标准溶液进行回收率和精密度试验，验证方法的可靠性，回收率在80%-110%之间，精密度均小于15%。所述实施例仅仅是本专利技术的一个优选的实施例，并不是对本专利技术的范围进行限定。基于本专利技术实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下，对本专利技术的技术方案进行的各种改进、优化，进而获得的所有其他实施例，均属于本专利技术权利要求书所声明的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）提取：称取2‑10g试样，加入10‑30ml乙腈，均质1‑3min，再加入无水硫酸钠、氯化钠，振荡提取1‑3min后，6000‑9000r/min条件下离心5‑8min，收集上清液于梨形瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干；残渣用乙腈‑0.1%甲酸水溶解，待净化；（2）净化：分别使用甲醇、水活化石墨烯固相萃取柱，然后将样品溶解液以1mL/min的速度过柱，最后用乙腈洗脱，收集洗脱液至15mL离心管中；（3）检测：将洗脱液用氮气吹干后，加入1mL流动相溶解，过0.22μm有机相滤膜，样液进液相色谱‑串联质谱进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种石墨烯固相萃取检测涕灭威及其代谢物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）提取：称取2-10g试样，加入10-30ml乙腈，均质1-3min，再加入无水硫酸钠、氯化钠，振荡提取1-3min后，6000-9000r/min条件下离心5-8min，收集上清液于梨形瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发浓缩至干；残渣用乙腈-0.1%甲酸水溶解，待净化；
（2）净化：分别使用甲醇、水活化石墨烯固相萃取柱，然后将样品溶解液以1mL/min的速度过柱，最后用乙腈洗脱，收集洗脱液至15mL离...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪永付，
申请(专利权)人：中华人民共和国济宁出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：山东;37