一种鉴定植物蛋白饮料中植物源性成分的方法技术

本发明专利技术提供一种基于半导体芯片测序技术和数字PCR技术相结合的植物蛋白饮料中植物源性成分分析方法，步骤为：1）提取植物蛋白饮料中生物成分的基因组DNA；2）用融合引物对对ITS2片段进行PCR扩增；3）扩增得到的DNA片段用ion torrent平台进行高通量测序；4）利用该平台中自带植物源ITS2条形码数据库分析插件，或将获得的序列应用BLAST方法进行结果鉴定；5）数字PCR验证测序结果并定量分析；6）综合测序比对结果与定量结果，分析计算检品核酸中各物种DNA拷贝数所占比重，将含量比重≥5%的物种列为该样检出的植物源性成分。其高通量、自动化、周期短，为食品安全监管提供有力技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物源性成分检测方法，尤其涉及一种基于高通量测序技术和数字PCR相结合的植物蛋白饮料中生物成分分析方法。
技术介绍
由于植物蛋白饮料天生具备的“天然、绿色、营养、健康”品类特征，符合饮料市场发展潮流和趋势，越来越受消费者喜爱，已经成为饮料市场上不可或缺的产品。中国食品工业协会发布的《2015年度饮料行业整体运行报告》中指出我国饮料行业2015年全年累计总产量17661.0万吨，且健康型饮料比重在不断上升。《十二五食品工业发展规划》中曾提出，要大力发展植物蛋白饮料，到2015年蛋白饮料产量比例可达到饮料总产量的15％。随着市场需求激增和原料价格的上涨，有些生产企业为了减少生产成本，在植物蛋白饮料中掺入廉价的植物蛋白粉，或者掺入成本低廉的非产品标识的植物原料，以次充好、掺杂使假等问题日益突出，而作为食品安全监管检测机构缺乏对该类产品的植物源性成分鉴别行之有效的检验方法和判定依据。目前，仅杏仁露和核桃露(乳)这两类产品在执行标准中有真伪辨别的指标，但是标准中检验项目设置过于单一，仅利用几种特征脂肪酸在总脂肪酸中的含量来判定杏仁露和核桃露(乳)的真伪的方法也不够严谨，因为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于半导体芯片测序技术和数字PCR技术相结合的植物蛋白饮料中植物源性成分分析方法，其特征在于，包含下列步骤：1) 植物蛋白饮料进行样品前处理；2）核酸提取；3）DNA浓度测定；4）对ITS2片段进行PCR扩增：将测序用的接头和区分样本的条形码序列Barcode加在初始引物对上获得融合引物对，初始引物序列为：F：5′‑ATGCGATACTTGGTGTGAAT‑3′；R：5′‑GACGCTTCTCCAGACTACAAT‑3′；ITS2扩增后得到的扩增子经过纯化、稀释、等体积混合后即可作为上机用的文库；5）将扩增得到的ITS2片段用ion torrent平台进行高通量测序；6）利用ion tor...

【技术特征摘要】
1.一种基于半导体芯片测序技术和数字PCR技术相结合的植物蛋白饮料中植物源性成分分析方法，其特征在于，包含下列步骤：1)植物蛋白饮料进行样品前处理；2）核酸提取；3）DNA浓度测定；4）对ITS2片段进行PCR扩增：将测序用的接头和区分样本的条形码序列Barcode加在初始引物对上获得融合引物对，初始引物序列为：F：5′-ATGCGATACTTGGTGTGAAT-3′；R：5′-GACGCTTCTCCAGACTACAAT-3′；ITS2扩增后得到的扩增子经过纯化、稀释、等体积混合后即可...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨硕，江丰，张莉，李鑫，
申请(专利权)人：湖北省食品质量安全监督检验研究院，
类型：发明
国别省市：湖北;42