【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物细胞领域,涉及一种猪胚成纤维细胞的制备方法。
技术介绍
成纤维细胞(fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。根据不同功能活动状态,可将细胞划分成成纤维细胞和纤维细胞,成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。猪胚成纤维细胞是成纤维细胞重要的一种,有很高的医用价值,因此,需要对其进行制备以满足现今的需要。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术提供一种解决或部分解决上述问题的猪胚成纤维细胞的制备方法。为达到上述技术方案的效果,本专利技术的技术方案为:一种猪胚成纤维细胞的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:取38℃孵化至1-2年的猪胚,碘酒消毒8分钟,酒精脱碘后,无菌操作分离胚体,用无菌的D-Hank’s液轻轻洗涤8次,加入3~8ml的0.28%胰酶,于37℃的温度下,消化20~30分钟,消化过程中轻轻吹打数次,以使消化后的胚体尽量地分散单个细胞,然后用台盼蓝进行活细胞计数,按照480~500万细胞/瓶的浓度分装于100ml细胞培养瓶中,置于37℃的8%浓度的二氧化碳培养箱中,待细胞长成单层后以备接种,所述猪胚的细胞生长液为含5%犊牛血清、3ul/ml两性霉素、青霉素和链霉素混合而成。本专利技术的有益成果是:本专利技术扩 ...
【技术保护点】
一种猪胚成纤维细胞的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:取38℃孵化至1‑2年的猪胚,碘酒消毒8分钟,酒精脱碘后,无菌操作分离胚体,用无菌的D‑Hank’s液轻轻洗涤8次,加入3~8ml的0.28%胰酶,于37℃的温度下,消化20~30分钟,消化过程中轻轻吹打数次,以使消化后的胚体尽量地分散单个细胞,然后用台盼蓝进行活细胞计数,按照480~500万细胞/瓶的浓度分装于100ml细胞培养瓶中,置于37℃的8%浓度的二氧化碳培养箱中,待细胞长成单层后以备接种,所述猪胚的细胞生长液为含5%犊牛血清、3ul/ml两性霉素、青霉素和链霉素混合而成。
【技术特征摘要】
1.一种猪胚成纤维细胞的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:取38℃孵化至1-2年的猪胚,碘酒消毒8分钟,酒精脱碘后,无菌操作分离胚体,用无菌的D-Hank’s液轻轻洗涤8次,加入3~8ml的0.28%胰酶,于37℃的温度下,消化20~30分钟,消化过程中轻轻吹打数次,以使消...
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