一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒制造技术

技术编号:14642451 阅读:130 留言:0更新日期:2017-02-15 22:29
本发明专利技术公开了一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:包括盒体,设在盒体内的化学发光板和设在盒体内的试剂,所述化学发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板,各孔包被有抗S100β抗体,抗体包被浓度为5.0μg/mL,所述试剂包括:S100β系列标准品溶液,S100β系列质控品溶液,样本稀释液,酶标S100β抗体,链酶亲和素‑HRP,化学发光液A液、化学发光液B液,浓缩洗涤液。本发明专利技术的化学发光酶联免疫检测试剂盒具有高灵敏度、简便快速、准确度高的特点,与传统的ELISA法比较,操作时间大幅度减少。可用作检测脑梗死等脑损伤疾病的辅助诊断。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中枢神经特异蛋白(S100β)的化学发光酶联免疫检测试剂盒,用于检测脑梗死等脑损伤疾病病人血清中的S100β蛋白的浓度。可用作检测脑梗死等脑损伤疾的辅助诊断。属于免疫学检测领域。
技术介绍
S100蛋白是在1965年由Moore在牛脑组织提取液中发现的,因该蛋白能溶解于100%的硫酸铵溶液而得名,是广泛分布于不同组织的一类分子量较小的酸性钙结合蛋白,占脑蛋白总量的0.1%~0,。2%。神经系统中S100蛋白主要成员有S100α和S100β。S100α是由一个α链和一个β链构成S100β是由2个β链构成。中枢神经特异蛋白(S100β)是S100β蛋白超家族中最具活性的神经蛋白,作为神经生长指标S100β在中枢神经系统的发育,成熟,衰老,损伤以及病理条件下的研究日益增加。血清中S100β水平维持在较低水平,通常难以检测,当中枢神经损伤后,神经胶质细胞被激活并大量表达,导致S100β蛋白分泌增加。并随着脑组织损伤导致的缺血缺氧,脑内静脉回流受阻颅内压上升引发脑水肿导致血脑屏障被破坏,脑脊液S100β通过血脑屏障进入血液引起血清中水平升高,因此可作为脑损伤检测的重要神经生化指标。
技术实现思路
为了解决现有技术中的问题,本专利技术提供了一种具有高灵敏度、简便快速、准确度高的中枢神经特异蛋白(S100β)的化学发光酶联免疫检测试剂盒。为了解决上述问题,本专利技术所采取的技术方案是:一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:包括盒体,设在盒体内的化学发光板和设在盒体内的试剂,所述化学发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板,各孔包被有抗S100β抗体,抗体包被浓度为5.0μg/mL,所述试剂包括:S100β系列标准品溶液,S100β系列质控品溶液,样本稀释液,酶标S100β抗体,链酶亲和素-HRP,化学发光液A液、化学发光液B液,浓缩洗涤液。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述盒体检测样本为人血清样本。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述S100β系列标准品溶液浓度分别为:0、50ng/mL、100ng/mL、250ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述S100β系列质控品溶液浓度分别为:500±100ng/mL、200±40ng/mL。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述样本稀释液为0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=7.4,磷酸盐缓冲液是每升含有16gNaCl,0.4gKCl,0.4gKH2PO4,5.8gNa2HPO4的水溶液。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述酶标S100β抗体是由S100β抗体与生物素偶合制成的偶联物作为检测抗体前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述浓缩洗涤液是含有体积分数0.05%吐温-20的pH=7.4,0.1mol/L磷酸盐缓冲液。前述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述化学发光液A液为鲁米诺含量为0.01M、对甲苯酚含量为0.001MpH=8.8的三(羟甲基)氨基甲烷溶液;化学发光液B液为每100mL溶液含柠檬酸2.1g,无水Na2HPO42.82g,0.75%的过氧化氢脲0.64mL的水溶液,所述百分比为质量百分比。本专利技术所达到的有益效果:本专利技术主要是利用抗原与抗体的特异性免疫反应的基本原理来实现的。化学发光免疫分析法是化学发光法和免疫分析法结合的产物,因此同时具有化学发光法的高灵敏性和免疫分析法的高特异性。在整个反应过程中,样品中S100β含量越高,反应体系中发光强度越强;反之,样品中S100β含量越少,发光强度越弱。本专利技术的化学发光酶联免疫检测试剂盒具有高灵敏度、简便快速、准确度高的特点,与传统的ELISA法比较,操作时间大幅度减少。可用作检测脑梗死等脑损伤疾病的辅助诊断。附图说明图1是本专利技术化学发光试剂盒标准曲线。具体实施方式下面结合附图对本专利技术作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案,而不能以此来限制本专利技术的保护范围。本专利技术第一方面提供了一种中枢神经特异蛋白(S100β)的化学发光酶联免疫(CLEIA)检测试剂盒,包括盒体,设在盒体内的化学发光板和设在盒体内的试剂:1.包被有抗S100β抗体的白色不透明96孔可拆卸或不可拆卸的聚苯乙烯化学发光板,抗体包被浓度为5.0μg/mL。2.S100β系列标准品溶液。浓度分别为:0、50ng/mL、100ng/mL、250ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL。3.S100β系列质控品溶液浓度分别为:500±100ng/mL、200±40ng/mL4.样本稀释液。为0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=7.4。5.酶标S100β抗体。由S100β抗体与生物素偶联制备得到。6.链亲和素-HRP。7.化学发光液。化学发光液分为A、B液。A液为化学发光底物-鲁米诺和发光增强剂-对甲苯酚溶液,B液为过氧化氢脲溶液。8.浓缩洗涤液。浓缩洗涤液具体为含有吐温-20(Tween-20)缓冲液的20倍浓缩磷酸盐缓冲液,使用前用双蒸水稀释至工作浓度后使用,用于实验过程中洗涤化学发光板本专利技术第二方面该试剂盒适用于脑梗死等脑损伤疾病的辅助诊断。本专利技术第三方面该试剂盒检测样本为人血清样本。本专利技术第四方面相关溶液的配制:本专利技术试剂盒中涉及的S100β标准品溶液、样本稀释液、化学发光液及洗涤溶液及其配方对本专利技术试剂盒检测的灵敏度影响很大;其中各溶液的主要成分及其配制方法是:1.S100β标准品溶液:以常规方法将S100β纯品用标准品稀释液配制成浓度分别为0、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL的S100β标准溶液。2.S100β系列质控品溶液:以常规方法将S100β纯品用标准品稀释液配制成浓度分别为:500±100ng/mL、200±40ng/mL。3.根据权利要求2所述S100β的化学发光酶联免疫(CLEIA)检测试剂盒中所设S100β系列。4.酶标S100β抗体溶液:用S100β抗体与生物素偶联制备,将所得S100β抗原用酶标S100β稀释液稀释成1:4000的工作浓度。5.标准品稀释液:为含有BSA,蔗糖的0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=7.4,是每升含有20gBSA,50g蔗糖,16gNaCl,0.4gKCl,0.4gKH2PO4,5.8gNa2HPO4的水溶液。6.酶标抗原稀释液:为含有BSA的0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=7.4,磷酸盐缓冲液是每升含有20gBSA,16gNaCl,0.4gKCl,0.4gKH2PO4,5.8gNa2HPO4的水溶液。7.样本稀释液:为0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=7.4,是每升含有16gNaCl,0.4gKCl,0.4gKH2PO4,5.8gNa2HPO4的水溶液。8.化学发光液:化学发光液A液为鲁米诺含量为0.01M、本文档来自技高网...
一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒

【技术保护点】
一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:包括盒体,设在盒体内的化学发光板和设在盒体内的试剂,所述化学发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板,各孔包被有抗S100β抗体,抗体包被浓度为5.0μg/mL,所述试剂包括:S100β系列标准品溶液,S100β系列质控品溶液,样本稀释液,酶标S100β抗体,链酶亲和素‑HRP,化学发光液A液、化学发光液B液,浓缩洗涤液。

【技术特征摘要】
1.一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:包括盒体,设在盒体内的化学发光板和设在盒体内的试剂,所述化学发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板,各孔包被有抗S100β抗体,抗体包被浓度为5.0μg/mL,所述试剂包括:S100β系列标准品溶液,S100β系列质控品溶液,样本稀释液,酶标S100β抗体,链酶亲和素-HRP,化学发光液A液、化学发光液B液,浓缩洗涤液。2.根据权利要求1所述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述盒体检测样本为人血清样本。3.根据权利要求2所述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述S100β系列标准品溶液浓度分别为:0、50ng/mL、100ng/mL、250ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL。4.根据权利要求3所述的一种中枢神经特异蛋白的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述S100β系列质控品溶液浓度分别为:500±100ng/mL、200±40ng/mL。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐恒陆上苏吴伟
申请(专利权)人:镇江华测金太医学检验所有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

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