【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
,具体地指一种基于rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒。
技术介绍
丙肝,是一种由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎,主要经输血、针刺、吸毒等传播。现有研究中表明人类IL-28B基因的rs12979860位点多态性与HCV的自发清除、抗病毒治疗的疗效具有相关性。目前,rs12979860位点基因多态性的鉴别方法有多种,主要采用基因测序、基因芯片、高分辨率溶解曲线(HRM)和酶切等方法,但多数操作繁杂、耗时较长、所需仪器设备昂贵、特异性较差,难以在普通医院开展。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种IL28B基因rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,该试剂盒具有高灵敏度、高特异性、操作简便、耗时短等特点,可高效地监测rs12979860的C和T等位基因。为实现上述目的,本专利技术所设计的rs12979860基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,包括DNA提取液和双色荧光PCR反应液;所述双色荧光PCR反应液包含以下组分:(1)基于rs12979860位点的引物探针组正向引物F,其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;反向引物R,其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;C荧光探针S1,其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;T荧光探针S2,其核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;(2)PCR扩增体系PCR10×buffer、25mM的MgCl2、dNTPs含dUTP、双组分热启动DNA聚合酶、50×ROXReferenceDye、RNase-FreeddH2O;所 ...
【技术保护点】
一种rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括DNA提取液和双色荧光PCR反应液;所述双色荧光PCR反应液包含以下组分:(1)基于rs12979860位点的引物探针组正向引物F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;反向引物R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;C荧光探针S1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;T荧光探针S2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;(2)PCR反应体系PCR 10×buffer、25mM的MgCl2、dNTPs含dUTP、双组分热启动DNA聚合酶、50×ROX Reference Dye、RNase‑Free ddH2O;所述PCR 10×buffer内含100mM pH8.8的Tris‑HCl、500mM的KCl、0.8%v/v的Nonidet;所述PCR 10×buffer不含有Mg2+;所述双组分热启动DNA聚合酶为化学修饰的HotStar Taq DNA聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶。
【技术特征摘要】
1.一种rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括DNA提取液和双色荧光PCR反应液;所述双色荧光PCR反应液包含以下组分:(1)基于rs12979860位点的引物探针组正向引物F,其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;反向引物R,其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;C荧光探针S1,其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;T荧光探针S2,其核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;(2)PCR反应体系PCR10×buffer、25mM的MgCl2、dNTPs含dUTP、双组分热启动DNA聚合酶、50×ROXReferenceDye、RNase-FreeddH2O;所述PCR10×buffer内含100mMpH8.8的Tris-HCl、500mM的KCl、0.8%v/v的Noni...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵友云,孙莉军,郑毅,王业富,
申请(专利权)人:武汉大学,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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