治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，所述治疗糖尿病肾病的中药组合物的有效成分主要由重量份比为0.5～1.5:1.5～2.5:0.5～1.5的黄芪、葛根和桑白皮制备而成，所述质量检测方法包括鉴别，所述鉴别包括采用薄层色谱法对所述桑白皮进行鉴别。本发明专利技术质量检测方法通过建立专属性强的鉴别以及进一步地建立重现性、稳定性及精密度良好的含量测定方法，能够有效控制本发明专利技术治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量，使本发明专利技术治疗糖尿病肾病的中药组合物质量达到稳定、可控、高效及安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种治疗糖病肾病的中药组合物的质量检测方法。
技术介绍
糖尿病肾病(DKD)是糖尿病(DM)最主要的微血管并发症之一，为终末期肾病(ESRD)的首要病因。据统计，目前全球DM患者人数已达4.15亿，预计2040年将增至6.42亿，其中，20％～45％的DM患者将发生DKD。我国DM患者已经达1.1亿，且发病率逐年上升。2012年我国ESRD患者中19％是DKD导致，在日本、韩国、美国、澳大利亚等发达国家，这一比例高达38％～45.2％。DKD已成为威胁人类健康的重大社会问题，给社会和个人造成了巨大经济负担。DKD的治疗，西医以控制血糖、控制血压、减少尿蛋白为主，还包括生活方式干预、纠正脂质代谢紊乱、治疗肾功能不全的并发症、透析治疗等。在一定程度上解决了DKD患者血压高及蛋白尿等临床问题，但均不能有效阻止疾病进展，甚至导致药源性肾病，部分药物的应用尚存在争议。且容易出现高钾血症、高肌酐血症等副作用，使用期间需严格监测血钾、血清肌酐水平，限制其临床使用。因此，开发能有效控制糖尿病肾病病程，毒副作用低的防治药物迫在眉捷。中医药治疗糖尿病肾病历史悠久，有丰富的中药资源，完整的治疗理论体系和丰富的临床经验，其治疗通常在明确分期基础上分型辨证。其中，肾功能代偿期患者中本虚以气虚、阴虚或气阴两虚为主，标实可见血瘀、痰湿、湿浊；失代偿期患者中本虚多见阳虚、阴阳俱虚，标实以痰湿、血瘀为主，部分患者可见血虚。针对不同时期DKD患者证候类型、主证和兼证的不同，给予相应益气、滋阴、温阳、活血化瘀、化湿、泄浊、解毒等治疗，更能反映DKD不同阶段不同体质患者的异常复杂的证候特点，有利于突出中医药治疗DKD的个体化优势。古方黄耆散，北宋《圣济总录》(第五十九卷·消渴门·渴利)和明代《普济方》(消渴门·渴利附论)均有收录。全方由黄芪、葛根、桑白皮三味药组成。方中黄芪补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，为君药；葛根生津止渴，通经活络，为臣药；桑白皮泻肺平喘，利水消肿，为佐药。三药相伍，共奏益气养阴，通络利水之效。以扶正治本为主，治疗糖尿病肾脏疾病(DKD)气虚、气阴两虚之证。目前对该方的研究较少，并未有对上述古方相应制剂进行全面质量控制的质量检测方法。
技术实现思路
基于此，有必要针对上述问题，提供一种治疗糖病肾病的中药组合物的质量检测方法，上述治疗糖病肾病的中药组合物处方来源于古方黄耆散，申请人采用超滤技术及现代制剂技术将古方黄耆散开发成中药制剂，在最大程度保留有效成分基础上，提高生物利用度，便于携带和服用，本专利技术质量检测方法使上述中药组合物在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。具体技术方案如下：一种治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，所述治疗糖尿病肾病的中药组合物的有效成分主要由重量份比为0.5～1.5:1.5～2.5:0.5～1.5的黄芪、葛根和桑白皮制备而成，所述质量检测方法包括鉴别，所述鉴别包括采用薄层色谱法对所述桑白皮进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加入体积浓度为69～71％的乙醇水溶液回流提取，过滤，滤液蒸干，残渣加入体积浓度为0.4～0.6％的硫酸水溶液回流，过滤，滤液用氯仿萃取2～6次，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取桑白皮对照药材适量，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取东莨菪内酯和7-羟基香豆素对照品适量，加入甲醇制成东莨菪内酯和7-羟基香豆素的混合溶液，作为对照品溶液；吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～7:3～4:0.04～0.06的沸点为60℃～90℃的石油醚、乙酸乙酯和乙酸为展开剂，展开，取出晾干，置于紫外光下观察。在其中一些实施例中，所述鉴别还包括采用薄层色谱法对所述黄芪进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加甲醇超声提取，过滤，滤液蒸干，残渣加水饱和正丁醇溶解得正丁醇液，正丁醇液用质量百分比为0.1～3％的氢氧化钠溶液洗涤2～7次，弃去所述氢氧化钠溶液，正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水层，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材适量，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～14：6～8:2～4的三氯甲烷、甲醇和水的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置可见光下以及紫外光灯下检视。在其中一些实施例中，所述鉴别还包括采用薄层色谱法对所述葛根进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加入甲醇超声提取，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取葛根对照药材，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取葛根素对照品适量，加入甲醇制备成溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～8:2～3:0.2～0.4的三氯甲烷、甲醇和水作为展开剂，展开，取出晾干，置于紫外光下观察。在其中一些实施例中，所述鉴别中对黄芪的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物2g，研碎，加甲醇50mL超声提取29～31min，过滤，滤液蒸干，残渣加水饱和正丁醇20mL溶解得正丁醇液，正丁醇液用质量百分比为0.1～3％的氢氧化钠溶液洗涤2～7次(洗至氢氧化钠溶液不变色为止)，每次20mL，弃去所述氢氧化钠溶液，正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水层，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材2g，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg所述黄芪甲苷对照品的溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～14：6～8:2～4的三氯甲烷、甲醇和水的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以体积浓度为10％的硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置可见光及波长为365nm的紫外光灯下检视；所述鉴别中对葛根的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物0.1g，研碎，加入甲醇20mL超声提取29～31min，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液；另取葛根对照药材0.25g，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取葛根素对照品适量，加入甲醇制备成浓度为1.5mg/mL溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～8:2～3:0.2～0.4的三氯甲烷、甲醇和水作为展开剂，展开，取出晾干，置于波长为365nm的紫外光下观察；所述鉴别中的对桑白皮的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物1g，研碎，加入体积浓度为69～71％的乙醇水溶液100mL回流提取4～6h，过滤，滤液蒸干，残渣加入体积浓度为0.4～0.6％的硫酸水溶液50mL回流2.5～3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述治疗糖尿病肾病的中药组合物的有效成分主要由重量份比为0.5～1.5:1.5～2.5:0.5～1.5的黄芪、葛根和桑白皮制备而成，所述质量检测方法包括鉴别，所述鉴别包括采用薄层色谱法对所述桑白皮进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加入体积浓度为69～71％的乙醇水溶液回流提取，过滤，滤液蒸干，残渣加入体积浓度为0.4～0.6％的硫酸水溶液回流，过滤，滤液用氯仿萃取2～6次，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取桑白皮对照药材适量，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取东莨菪内酯和7‑羟基香豆素对照品适量，加入甲醇制成东莨菪内酯和7‑羟基香豆素的混合溶液，作为对照品溶液；吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～7:3～4:0.04～0.06的沸点为60℃～90℃的石油醚、乙酸乙酯和乙酸为展开剂，展开，取出晾干，置于紫外光下观察。

【技术特征摘要】
1.一种治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述治疗糖尿病肾病的中药组合物的有效成分主要由重量份比为0.5～1.5:1.5～2.5:0.5～1.5的黄芪、葛根和桑白皮制备而成，所述质量检测方法包括鉴别，所述鉴别包括采用薄层色谱法对所述桑白皮进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加入体积浓度为69～71％的乙醇水溶液回流提取，过滤，滤液蒸干，残渣加入体积浓度为0.4～0.6％的硫酸水溶液回流，过滤，滤液用氯仿萃取2～6次，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取桑白皮对照药材适量，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取东莨菪内酯和7-羟基香豆素对照品适量，加入甲醇制成东莨菪内酯和7-羟基香豆素的混合溶液，作为对照品溶液；吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～7:3～4:0.04～0.06的沸点为60℃～90℃的石油醚、乙酸乙酯和乙酸为展开剂，展开，取出晾干，置于紫外光下观察。2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述鉴别还包括采用薄层色谱法对所述黄芪进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加甲醇超声提取，过滤，滤液蒸干，残渣加水饱和正丁醇溶解得正丁醇液，正丁醇液用质量百分比为0.1～3％的氢氧化钠溶液洗涤2～7次，弃去所述氢氧化钠溶液，正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水层，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材适量，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～14：6～8:2～4的三氯甲烷、甲醇和水的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置可见光下以及紫外光灯下检视。3.根据权利要求2所述的治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述鉴别还包括采用薄层色谱法对所述葛根进行鉴别，鉴别步骤为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物适量，研碎，加入甲醇超声提取，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取葛根对照药材，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取葛根素对照品适量，加入甲醇制备成溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～8:2～3:0.2～0.4的三氯甲烷、甲醇和水作为展开剂，展开，取出晾干，置于紫外光下观察。4.根据权利要求3所述的治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述鉴别中对黄芪的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物2g，研碎，加甲醇50mL超声提取29～31min，过滤，滤液蒸干，残渣加水饱和正丁醇20mL溶解得正丁醇液，正丁醇液用质量百分比为0.1～3％的氢氧化钠溶液洗涤2～7次，每次20mL，弃去所述氢氧化钠溶液，正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水层，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材2g，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg所述黄芪甲苷对照品的溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～14：6～8:2～4的三氯甲烷、甲醇和水的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以体积浓度为10％的硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置可见光及波长为365nm的紫外光灯下检视；所述鉴别中对葛根的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物0.1g，研碎，加入甲醇20mL超声提取29～31min，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液；另取葛根对照药材0.25g，与所述供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取葛根素对照品适量，加入甲醇制备成浓度为1.5mg/mL溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6～8:2～3:0.2～0.4的三氯甲烷、甲醇和水作为展开剂，展开，取出晾干，置于波长为365nm的紫外光下观察；所述鉴别中的对桑白皮的鉴别方法为：取所述治疗糖尿病肾病的中药组合物1g，研碎，加入体积浓度为69～71％的乙醇水溶液100mL回流提取4～6h，过滤，滤液蒸干，残渣加入体积浓度为0.4～0.6％的硫酸水溶液50mL回流2.5～3.5h，过滤，滤液用氯仿萃取3～5次，每次30mL，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；另取桑白皮对照药材1.5g，与供试品溶液同法制得对照药材溶液；再取东莨菪内酯和7-羟基香豆素对照品适量，加入甲醇制成东莨菪内酯和7-羟基香豆素浓度均为0.1mg/mL的混合溶液，作为对照品溶液；分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液各2μL，分别点于同一...

【专利技术属性】
技术研发人员：王汝上，朱荃，郑兆广，胡琴，黄晓玲，段婷婷，何宝，孙晨，黄艳霞，高俊飞，杨琳琳，顾斐，程慧荃，黄寿义，
申请(专利权)人：广州康臣药物研究有限公司，广州康臣药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44