靶向肝窦内皮细胞的和厚朴酚纳米颗粒在治疗肝纤维化中的应用制造技术

本发明专利技术公开了靶向肝窦内皮细胞的和厚朴酚纳米颗粒在治疗肝纤维化中的应用。本发明专利技术提供了靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒的如下用途：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品。利用由cRGD标记的PEG纳米颗粒包装Honokiol抑制肝纤维化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种靶向肝窦内皮细胞的和厚朴酚纳米颗粒在治疗肝纤维化中的应用。
技术介绍
和厚朴酚是一类木兰科落叶乔木厚朴提取物。具有明显的、持久的中枢性肌肉松弛，中枢神经抑制作用，抗炎，抗菌，抗病原微生物，抗溃疡，抗氧化，抗衰老,抗肿瘤，降低胆固醇等药理作用。它可抑制Akt磷酸化，并且亦可促进ERK1/2磷酸化，在此前的研究报道中，和厚朴酚可以通过对血管内皮细胞的保护作用抑制动脉血栓的形成，进一步的研究表明和厚朴酚也可以通过促进环前列腺素的生成抑制血管内皮细胞的凋亡，另外，和厚朴酚在人脐静脉内皮细胞内可调控iNOS/eNOS的表达，进而通过调节NO的合成维持血管内皮细胞的稳态。在慢性肝损伤研究方面，和厚朴酚的研究不多，但其与慢性肝病的相关性亦有报道。在体外培养条件下和厚朴酚对活化肝星状细胞HSC可产生影响，其通过线粒体细胞色素C的释放以及Caspase 3的活化促进活化的HSC凋亡，而对实质细胞不造成重大的损伤。另外和厚朴酚还可调控肝损伤修复过程，其可以显著地抑制慢性损伤所造成的组织破坏，显示出对肝组织损伤较强的治疗效应。RGD多肽标记的PEG纳米微粒是内皮细胞特异的药物传递系统，能牢固靶向结合于血管内皮细胞表面的炎症部位，被认为是靶向血管内皮细胞治疗理想的给药系统。PEG包被和厚朴酚的研究亦早有报道。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒的新用途。本专利技术提供的靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在如下1)-10)中至少一种的应用：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品；7)制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品；8)制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品；9)制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品；10)制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备治疗肝纤维化疾病产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝纤维化产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品中的应用也是本专利技术保护的范围。靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品中的应用也是本专利技术保护的范围。促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态的物质在如下1)-10)中至少一种的应用也是本专利技术保护的范：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品；7)制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品；8)制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品；9)制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品；10)制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品。上述促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态的物质为靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒。上述应用中，所述产品为药品。本专利技术另一个目的是提供一种具有如下1)-10)中至少一种功能的产品。本专利技术提供的产品，包括靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒；1)治疗肝纤维化疾病；2)抑制肝纤维化；3)促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态；4)提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用；5)提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和Wnt2蛋白表达；6)抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除；7)降低血清中ALT含量和/或AST含量；8)抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平；9)促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平；10)提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值。上述产品中，所述靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒为用靶向肝窦内皮细胞的蛋白或含有该蛋白的融合蛋白或含有该蛋白的复合物包被和厚朴酚得到的颗粒。上述产品中，所述产品为药品。上述中，所述靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒为用靶向肝窦内皮细胞的蛋白或含有该蛋白的融合蛋白或含有该蛋白的复合物包被和厚朴酚得到的颗粒，在本专利技术的实施例中靶向肝窦内皮细胞的多肽为cRGD，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒为用cRGD-PEG-PLGA包被和厚朴酚(Honokiol)得到的和厚朴酚纳米颗粒，具体按照如下方法制备：1)将PEG-PLGA和cRGD在DMSO溶液中等摩尔比混合，得到PEG-cRGD；2)将PEG-cRGD和PLGA按照摩尔比为10：1在DMSO溶液中混合，反应，得到cRGD-PEG-PLGA；3)将cRGD-PEG-PLGA溶液(50mg/ml)滴加于搅拌的Honokiol溶液(10mg/ml)按照体积比为3：4混合，反应，得到cRGD-PEG-PLGA包被和厚朴酚的纳米颗粒，即为Honokiol纳米颗粒。本专利技术第三个目的是提供一种抑制肝纤维化的方法。本专利技术提供的方法，为以LSEC作为靶细胞，维持LSEC处于分化状态，从而达到抑制肝纤维化的目的。本专利技术的实验证明，利用由cRGD标记的PEG纳米颗粒包装Honokiol，制成内皮细胞特异的药物输送体系，经由腹腔注射进入小鼠体内，能有效地维持LSEC的分化表型以及促再生功能，从而在慢性肝损伤早期有效的抑制肝纤维化的进程，同时诱导LSEC调控肝组织损伤修复。而在肝纤维化逆转期，Honokiol能加快肝内沉积纤维的清除效率，并迅速恢复LSEC的分化表型以及促再生功能，使其能迅速反应以行使肝损伤修复的指导作用。因此，以LSEC作为靶细胞，通过调控其分化表型来抑制肝纤维化的发生发展，对于抗纤维化治疗的研究具有一定的指导意义。附图说明图1为各组LSEC中p-Erk1/2，p-Akt，Erk1/2，Akt，eNOS，Nox2的表达情况。图2为(A)扫描电镜图像显示纤维化本文档来自技高网...

【技术保护点】
靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在如下1)‑10)中至少一种的应用：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品；7)制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品；8)制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品；9)制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品；10)制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品。

【技术特征摘要】
1.靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在如下1)-10)中至少一种的应用：1)制备治疗肝纤维化疾病产品；2)制备抑制肝纤维化产品；3)制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品；4)制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品；5)制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品；6)制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品；7)制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品；8)制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品；9)制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品；10)制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品。2.靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备治疗肝纤维化疾病产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝纤维化产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备促进或维持或恢复肝窦内皮细胞处于分化状态产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞促进肝脏修复作用产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞中HGF蛋白表达和/或Wnt2蛋白表达产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝纤维化结节形成或促进肝纤维化结节消除产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备降低血清中ALT含量和/或AST含量产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备抑制肝窦内皮细胞中Akt磷酸化水平产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备促进肝窦内皮细胞中Erk1/2磷酸化水平产品中的应用；或，靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒在制备提高肝窦内皮细胞中eNOS表达量与Nox2表达量比值产品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述靶向肝窦内皮细胞的Honokiol纳米颗粒...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜颖，贺福初，劳远翔，李严严，魏汉东，
申请(专利权)人：北京蛋白质组研究中心，
类型：发明
国别省市：北京;11