一种提高龙须菜品质的发酵方法技术

本发明专利技术涉及生物发酵技术领域，具体涉及一种提高龙须菜品质的发酵方法。所述方法包括以下步骤：S1将龙须菜洗净烘干，粉碎至小颗粒；S2制作发酵培养基，龙须菜颗粒加入蒸馏水，用NaCl调节盐度，NaCl用量为1‑4％(w/v)，混合均匀，调节pH值7.2‑7.6；S3高压灭菌，冷却后接种发酵菌液1‑15％(v/v)；S4发酵，设置温度25℃，发酵罐转速150r/min，发酵时间12‑48小时。与现有技术相比，本发明专利技术采用黄杆菌发酵，能够有效快速增加龙须菜中寡糖的含量，提高其作为经济鱼类饲料的营养价值，而且该菌种不需要琼脂，只需要有NaCl，来源非常简单，该发酵方法温度较低，速度快，步骤简单，可操作性较强，容易放大实现工厂化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物发酵
，具体涉及一种提高龙须菜品质的发酵方法。
技术介绍
龙须菜是较为常见的大型海藻，因其具有重要经济价值和生态功能而被广泛研究，并在我国沿海地区实现人工栽培养殖，成为继海带、紫菜、裙带菜后的又一个新兴的海藻产业群。龙须菜主要成分是琼胶多糖和粗纤维，约占藻体的59.4％。龙须菜的蛋白质含量为14.5-22.8％，氨基酸组成均衡，脂肪含量较低，为0.4-0.8％。同时，龙须菜维生素和矿质元素含量丰富，特别是Mg、Fe、Ca、K、Na、Zn等元素。因此，龙须菜是一种高膳食纤维、高蛋白质、低脂肪的富含维生素和矿物质的海藻饲料原料，充分利用这些优势，可以将它进一步开发利用。然而，龙须菜中过高的琼胶多糖和粗纤维会降低其在动物胃肠内的消化吸收，降低其营养价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种提高龙须菜品质的发酵方法，利用黄杆菌的特性，低温发酵，快速降低龙须菜中胶多糖和粗纤维含量，提高龙须菜中动物可消化吸收利用的寡糖含量和蛋白质含量，分解原料部分有害物质，降低其毒性，提高龙须菜作为饲料原料的营养价值和利用价值。为了实现上述的目的，采用如下的技术方案。一种提高龙须菜品质的发酵方法，所述方法包括以下步骤：1龙须菜原料的制备①龙须菜采集：龙须菜采集后，清洗，去除杂质，晒干；②龙须菜粉制备：将晒干的龙须菜放入干燥箱烘干，水分含量控制在10～15％，然后用粉碎机粉碎至40～100目，备用。2发酵菌种的选择本专利技术优选菌种为海洋琼胶酶高产菌——黄杆菌(Flavobacterium sp.)，该菌种由汕头大学理学院生物系所筛选,于2008年1月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌株保藏编号为：CGMCC NO.2342。专利CN101608166A公开了该菌种的分离筛选和鉴定方法。2.1菌种活化培养基种子培养基(2216E培养基)组成：蛋白胨5g，酵母粉1g，磷酸铁0.01g，陈海水1000ml，调节pH为7.2～7.6，121℃灭菌20min；摇瓶培养基：2216E培养基添加0.2％的琼脂粉；固体培养基：2216E培养基添加1.5％的琼脂粉；发酵培养基：龙须菜含量3％，NaCl含量2％，蒸馏水配制，pH7.6，121℃灭菌20min备用。2.2培养方法S1摇瓶发酵培养：将-80℃保存的细菌按2％的接种量接入2216E培养基中，25℃，恒温摇床培养箱中150r/min培养58小时，在600nm波长下，用分光光度计测定OD值，每6小时测定一次并记录，测定结果见表1，从表1可看出菌液在40小时浓度最高；S2菌种活化：将-80℃保存的细菌划线接于固体培养基平板活化，然后再转接于100ml摇瓶培养基中于25℃继续活化培养40h，得到菌液；S3甘油保种：将培养好的菌液和50％的甘油溶液按1:1的比例混匀分装在菌种瓶中，保存于-80℃备用。表1不同培养时间菌液的浓度变化3单因素试验优化发酵条件对龙须菜添加量、菌种接种量、NaCl添加量、龙须菜粉碎颗粒大小、发酵时间等5个因素依次进行单因素试验优化，根据发酵后龙须菜发酵液中的粗蛋白质、寡糖含量及粗纤维素含量，筛选出最佳的发酵条件。每一次发酵结束后，取部分发酵样品65℃烘干，粉碎过40目筛，用于测定粗蛋白质，寡糖和粗纤维素含量。3.1龙须菜添加量的优化将培养活化的菌液,按5％(v/v)的接种量接入含2％(w/v)NaCl的龙须菜培养基中，设置5个不同梯度的龙须菜添加量(w/v)，分别为1％、2％、3％、4％、5％，每个处理3个重复。pH7.6，25℃，恒温摇床培养箱中150r/min转速下培养30小时后，测定结果见表2。表2不同龙须菜添加量发酵产物变化注：同列数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。由表2可知，粗蛋白含量随着龙须菜添加量的增加而逐渐升高，3％时含量最高，为16.43％，随后又降低；寡糖含量随着龙须菜添加量的增加不断升高，3％时含量最高，为2.07％，随后又降低；粗纤维素含量随着龙须菜添加量的增加而逐渐降低，3％时含量最低，为3.75％，随后又升高。因此，选择龙须菜添加量为3％较好。3.2龙须菜粉碎颗粒大小优化将培养活化的菌液,按5％(v/v)的接种量接种于含3％(w/v)龙须菜，2％(w/v)NaCl的发酵培养基中，设置4个不同比例的龙须菜粉碎颗粒，分别为40、60、80、100目，每个处理3个重复。pH7.6，25℃，恒温摇床培养箱中150r/min转速下培养30小时后，测定结果见表3。表3不同龙须菜颗粒大小的发酵产物变化注：同列数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。由表3可知，粗蛋白和寡糖含量在龙须菜粉碎颗粒过40目时最高，为16.38％和1.88％，随着龙须菜粉碎颗粒越细，粗蛋白和寡糖含量均降低；粗纤维素含量在龙须菜粉碎颗粒过40目时最低，为3.88％，随着龙须菜粉碎颗粒越细，粗纤维素含量升高。因此，龙须菜粉碎颗粒过40目较好。3.3发酵培养基NaCl添加量的优化本方法采用在蒸馏水中添加不同含量的NaCl方法来替代陈海水，从而优化培养基。设置4个不同比例的NaCl添加量(w/v)，分别为1％、2％、3％、4％，将培养活化的菌液,按5％(v/v)的接种量转接于含3％(w/v)龙须菜发酵培养基中，每个处理3个重复。pH7.6，25℃，恒温摇床培养箱中150r/min转速下培养30小时后，测定结果见表4。表4添加不同NaCl含量的发酵产物变化注：同列数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。由表4可知，粗蛋白含量随着发酵培养基NaCl添加量的增加而逐渐升高，3％时含量最高，为16.50％，随后又降低；寡糖含量随着发酵培养基NaCl添加量的增加不断升高，3％时含量最高，为1.97％，随后又降低；粗纤维素含量随着发酵培养基NaCl添加量的增加而逐渐降低，3％时含量最低，为3.77％，随后又升高。因此，选择发酵培养基中添加3％的NaCl较好。3.4发酵菌液接种量的优化将培养活化的菌液,设置5个不同比例的菌液接种量(v/v)，分别为1％、2％、5％、10％、15％，分别接种于含3％(w/v)龙须菜，3％(w/v)NaCl的发酵培养基中，每个处理3个重复。pH7.6，25℃，恒温摇床培养箱中150r/min转速下培养30小时后，测定结果见表5。表5接种不同含量菌液的发酵产物变化注：同行数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。由表5可知，粗蛋白含量随着发酵菌液接种量的增加而逐渐升高，10％时含量最高，为16.86％，随后又降低；寡糖含量随着发酵细菌接种量的增加不断升高，10％时含量最高，为2.13％，随后又降低；粗纤维素含量随着发酵细菌接种量的增加而逐渐降低，10％时含量最低，为3.88％，随后又升高。因此，发酵细菌接种量选择在10％较好。3.5发酵时间的优化将培养活化的菌液,按10％(v/v)的接种量接入含3％(w/v)龙须菜，3％(w/v)NaCl的发酵培养基中，设置9个发酵时间点，分别为12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h，每个处理3个重复。pH7.6本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高龙须菜品质的发酵方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1将龙须菜洗净烘干，粉碎至小颗粒；S2制作发酵培养基，龙须菜颗粒加入蒸馏水，用NaCl调节盐度，NaCl用量为1‑4％(w/v)，混合均匀，调节pH值7.2‑7.6；S3高压灭菌，冷却后接种发酵菌液1‑15％(v/v)；S4发酵，设置温度25℃，发酵罐转速150r/min，发酵时间12‑48小时。

【技术特征摘要】
1.一种提高龙须菜品质的发酵方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1将龙须菜洗净烘干，粉碎至小颗粒；S2制作发酵培养基，龙须菜颗粒加入蒸馏水，用NaCl调节盐度，NaCl用量为1-4％(w/v)，混合均匀，调节pH值7.2-7.6；S3高压灭菌，冷却后接种发酵菌液1-15％(v/v)；S4发酵，设置温度25℃，发酵罐转速150r/min，发酵时间12-48小时。2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述发酵菌液的菌种为海洋琼胶酶高产菌——黄杆菌，该菌种于2008年1月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌株保藏编号为：CGMCC NO.2342。3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，步骤S1中，所述龙须菜烘干后，水分含量控制在10～15％，粉碎颗...

【专利技术属性】
技术研发人员：温小波，朱大世，刘燕，
申请(专利权)人：汕头大学，
类型：发明
国别省市：广东;44