【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物技术应用领域，具体涉及一种海水养殖复合丁酸菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、近年来，水产养殖的模式逐渐从粗放型养殖体系向半集约型和集约型养殖体系进行转变，与此同时，高密度养殖及养殖方式的改变使得养殖动物疾病频发，严重影响了水产养殖业的进一步发展，所以在水产养殖过程中，饲料中通过添加抗生素或化学合成药物，对防治疾病，促进生长，节省饲料，提髙养殖经济效益等起到了一定的促进作用，但是长期使用抗生素会造成细菌的耐药性，对食品安全及环境都构成严重威胁。益生菌是对人和动物有益的细菌，在水产养殖业中，益生菌可作为饲料添加剂加入到饲料当中，并通过调节宿主系统免疫功能或通过调节肠道内菌群平衡，起到促进营养吸收，保持肠道健康的作用。目前在水产养殖业中常用的益生菌作为饲料添加剂的应用多报道为芽孢杆菌、乳酸菌、光合菌、酵母菌等，然而，迄今为止尚未见到任何有关丁酸菌及与乳酸菌混合制剂添加到水产饲料中的应用。
技术实现思路
1、针对上述不足，本专利技术公开了一种海水养殖复合丁酸菌剂及其制备方法和应用，利用丁酸菌和乳酸菌复合配制益生菌菌剂，并且将其作为添加剂配制对虾饲料，不仅可以促进对虾的生长，还可以提高对虾的免疫力。
2、本专利技术是采用如下技术方案实现的：
3、一种海水养殖复合丁酸菌剂，其含有浓度为107cfu/ml的丁酸菌g18、浓度为107cfu/ml的乳酸菌g11和浓度为107cfu/ml的乳酸菌y17；
4、所述丁酸菌g18保藏于广东省微
5、进一步的，所述的丁酸菌g18、乳酸菌g11和乳酸菌y17均是从甲壳动物拟穴青蟹肠道中分离得到的。
6、上述海水养殖复合丁酸菌剂的制备方法是将所述的丁酸菌g18接种至丁酸菌培养基中并置于温度为28℃的条件下培养至对数期得到丁酸菌菌液，同时将乳酸菌g11和乳酸菌y17分别接种至乳酸菌培养基中并置于温度为37℃的条件下培养至对数期得到乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液，接着将所述的丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液分别稀释至浓度为3×107cfu/ml，再按照丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液的体积比为1:1:1的比例将丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液混合均匀得到所述的海水养殖复合丁酸菌剂；
7、所述的丁酸菌培养基包括以下浓度的组分：酵母浸膏3.0 g/l、牛肉浸膏10.0 g/l、胰蛋白胨10.0 g/l、葡萄糖5.0 g/l、可溶性淀粉1.0 g/l、氯化钠5.0 g/l、三水合乙酸钠3.0 g/l、半胱氨酸盐酸盐0.5 g/l；所述的乳酸菌培养基包括以下浓度的组分：蛋白胨10.0g/l、牛肉粉5.0 g/l、酵母粉4.0 g/l、葡萄糖20.0 g/l、吐温80 1.0 ml/l、磷酸氢二钾2.0g/l、乙酸钠5.0 g/l、柠檬酸三铵2.0 g/l、硫酸镁0.2 g/l、硫酸锰0.05 g/l。
8、所述海水养殖复合丁酸菌剂的应用是将所述的海水养殖复合丁酸菌剂作为添加剂配制养殖对虾的饲料，其包括以下步骤：
9、（1）称取以下重量份数的原料：鱼粉20～25份、豆粕10～20份、花生粕10～15份、复合维生素1～3份、矿物盐0.5～1份、磷酸二氢钙0.2～0.5份、卵磷脂1～3份、胆固醇0.5～1份、赖氨酸0.5～1份、丙氨酸0.5～1份、淀粉微球2～5份；
10、（2）将步骤（1）中各原料混合均匀得到预混料，接着加入所述的海水养殖复合丁酸菌剂搅拌混合20～30min得到用于对虾养殖的饲料；所述的海水养殖复合丁酸菌剂中菌落总数与所述预混料的质量比为107cfu:1kg；
11、（3）将步骤（2）中得到的饲料进行投放，在每亩养殖池中，投放所述饲料的重量为虾体重的2%～4%。
12、进一步的，步骤（1）中所述淀粉微球的制备方法是取可溶性淀粉加入至浓度为2mol/l的氢氧化钠溶液中得到水相，所述可溶性淀粉的质量和氢氧化钠溶液的体积比为（1～2）g:（20～30）ml；取span60加入至植物油中在50～60℃下搅拌混合均匀得到油相，所述span60和所述可溶性淀粉的质量比为（0.1～0.2）:1，所述span60的质量和植物油的体积比为（0.1～0.2）g:（70～80）ml，接着向油相中加入水相，然后再加入环氧氯丙烷，所述环氧氯丙烷和植物油的体积比为（4～5）:100，接着在50～60℃下搅拌反应5～8h，静置并除去油相，接着用乙醇洗涤2～3次，在50℃下干燥得到多孔的淀粉微球。
13、进一步的，所述可溶性淀粉包括玉米淀粉、土豆淀粉和红薯淀粉中的任意一种或多种组合；所述植物油为大豆油和蓖麻油中的任意一种。
14、进一步的，在所述淀粉微球的制备方法中，加入环氧氯丙烷后，接着在50～60℃且搅拌速度50～80r/min的条件下搅拌反应5～8h。
15、本技术方案与现有技术相比较具有以下有益效果：
16、1、本专利技术利用从甲壳动物拟穴青蟹肠道中分离得到的丁酸菌g18、乳酸菌g11和乳酸菌y17混配制得到海水养殖复合丁酸菌剂，并且将其作为添加剂配制饲料用于对虾的养殖，所述的海水养殖复合丁酸菌剂在对虾中的定植能力好并且定植时间短，可以起到调节对虾系统免疫功能的作用，同时还能通过调节肠道内菌群平衡，起到促进营养吸收，保持对虾肠道健康的作用，再配合由鱼粉、豆粕、花生粕、复合维生素、矿物盐、磷酸二氢钙、卵磷脂、胆固醇、赖氨酸、丙氨酸和淀粉微球等组成的饲料进行使用，不仅可以促进对虾的生长，还可以提高对虾的免疫力。
17、2、本专利技术在制备用于对虾养殖的饲料中，添加了淀粉微球，其是以可溶性淀粉为原料，采用反相悬浮乳液法在span60和植物油的条件下，以环氧氯丙烷作为交联剂反应得到多孔结构的淀粉微球，所述淀粉微球可以有效吸附饲料中各组分以及复合菌剂，并且促进了饲料中各组分和复合菌剂的混合，有利于丁酸菌g18和乳酸菌的繁殖并在对虾中的定植。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种海水养殖复合丁酸菌剂，其特征在于：所述的复合丁酸菌剂含有浓度为107 CFU/mL的丁酸菌G18、浓度为107 CFU/mL的乳酸菌G11和浓度为107 CFU/mL的乳酸菌Y17；
2.根据权利要求1所述的海水养殖复合丁酸菌剂，其特征在于：所述的丁酸菌G18、乳酸菌G11和乳酸菌Y17均是从甲壳动物拟穴青蟹肠道中分离得到的。
3. 如权利要求1和2中任意一项所述的海水养殖复合丁酸菌剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法是将所述的丁酸菌G18接种至丁酸菌培养基中并置于温度为28℃的条件下培养至对数期得到丁酸菌菌液，同时将乳酸菌G11和乳酸菌Y17分别接种至乳酸菌培养基中并置于温度为37℃的条件下培养至对数期得到乳酸菌G11菌液和乳酸菌Y17菌液，接着将所述的丁酸菌菌液、乳酸菌G11菌液和乳酸菌Y17菌液分别稀释至浓度为3×107 CFU/mL，再按照丁酸菌菌液、乳酸菌G11菌液和乳酸菌Y17菌液的体积比为1:1:1的比例将丁酸菌菌液、乳酸菌G11菌液和乳酸菌Y17菌液混合均匀得到所述的海水养殖复合丁酸菌剂；
4.如权利要求1和2中任意一
5.根据权利要求4所述的海水养殖复合丁酸菌剂的应用，其特征在于：步骤（1）中所述淀粉微球的制备方法是取可溶性淀粉加入至浓度为2mol/L的氢氧化钠溶液中得到水相，所述可溶性淀粉的质量和氢氧化钠溶液的体积比为（1～2）g:（20～30）mL；取Span60加入至植物油中在50～60℃下搅拌混合均匀得到油相，所述Span60和所述可溶性淀粉的质量比为（0.1～0.2）:1，所述Span60的质量和植物油的体积比为（0.1～0.2）g:（70～80）mL，接着向油相中加入水相，然后再加入环氧氯丙烷，所述环氧氯丙烷和植物油的体积比为（4～5）:100，接着在50～60℃下搅拌反应5～8h，静置并除去油相，接着用乙醇洗涤2～3次，在50℃下干燥得到多孔的淀粉微球。
6.根据权利要求4所述的海水养殖复合丁酸菌剂的应用，其特征在于：所述可溶性淀粉包括玉米淀粉、土豆淀粉和红薯淀粉中的任意一种或多种组合；所述植物油为大豆油和蓖麻油中的任意一种。
7.根据权利要求4所述的海水养殖复合丁酸菌剂的应用，其特征在于：在所述淀粉微球的制备方法中，加入环氧氯丙烷后，接着在50～60℃且搅拌速度50～80r/min的条件下搅拌反应5～8h。
...【技术特征摘要】
1.一种海水养殖复合丁酸菌剂，其特征在于：所述的复合丁酸菌剂含有浓度为107 cfu/ml的丁酸菌g18、浓度为107 cfu/ml的乳酸菌g11和浓度为107 cfu/ml的乳酸菌y17；
2.根据权利要求1所述的海水养殖复合丁酸菌剂，其特征在于：所述的丁酸菌g18、乳酸菌g11和乳酸菌y17均是从甲壳动物拟穴青蟹肠道中分离得到的。
3. 如权利要求1和2中任意一项所述的海水养殖复合丁酸菌剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法是将所述的丁酸菌g18接种至丁酸菌培养基中并置于温度为28℃的条件下培养至对数期得到丁酸菌菌液，同时将乳酸菌g11和乳酸菌y17分别接种至乳酸菌培养基中并置于温度为37℃的条件下培养至对数期得到乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液，接着将所述的丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液分别稀释至浓度为3×107 cfu/ml，再按照丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液的体积比为1:1:1的比例将丁酸菌菌液、乳酸菌g11菌液和乳酸菌y17菌液混合均匀得到所述的海水养殖复合丁酸菌剂；
4.如权利要求1和2中任意一项所述的海水养殖复合丁酸菌剂的应用，其特征在于：所述应用是将所述的海水养殖复合丁酸菌剂作为添加剂配制...
【专利技术属性】
技术研发人员：李升康，陈玉俊，章跃陵，邓桃球，梁惠芬，张明，赵永贞，彭敏，刘青云，陈秀荔，曾地刚，杨春玲，
申请(专利权)人：汕头大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。