一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂，其由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L‑精氨酸以及辅酶Q10，并且上述各组分的质量比为11～23:6～15:9～13:2～4:2～4；还涉及该免疫增强剂的制备方法和在贻贝暂养过程中的应用。与现有技术相比，本发明专利技术中的免疫增强剂中以类胡萝卜提取物为主要配料，该类胡萝卜提取物以虾类副产物为主要原料提取，充分利用水产品加工副产物进行高值化开发，同时组配肽聚糖和甘露寡糖，加入适量L‑精氨酸以及辅酶Q10，各组分能协调增效，显著提高贻贝类机体的免疫功能，促进贻贝生长与代谢，降低死亡率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及水产养殖领域，尤其涉及一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂及其制备方法和应用。
技术介绍
贻贝为典型滤食性贝类，如翡翠贻贝、紫贻贝、厚壳贻贝、隔贻贝等，其利用鳃上的纤毛过滤水中的悬浮颗粒为食，因此需要过滤大量的海水。此外，由于贻贝的生存环境一般是近岸，所以贻贝富集重金属和有机化合物的几率也高于其他海洋生物。近年来，贻贝养殖及暂养过程中，存在着生长异常、死亡率增高的现象，有些学者将其与目前日益增长的海水污染联系起来，并证实了环境污染与贻贝的非病原性疾病有着一定的关系。贻贝对外界胁迫的免疫机制主要为细胞免疫和体液免疫，其中细胞免疫依赖于贝体血细胞吞噬、包囊、形成细胞结等细胞免疫反应，清除病原物颗粒和自体损伤或死亡细胞，并参与损伤修复等功能。贝类吞噬作用伴随着水解酶类释放以及抗氧化酶类参与来共同杀灭入侵异物。此外，贝类缺乏特异性免疫球蛋白，因此，除了以上的细胞免疫外，还需依靠机体的体液免疫作用，乳凝集素凝集和调理作用、溶血素及溶酶体酶等非特异性免疫因子来实现对外界胁迫因子的抵御。目前，对于贻贝等双壳贝类的免疫调节及增强研究还存在较大不足，不过越来越多的研究表明贝类免疫作用在贝类机体防御反应中起着十分重要的作用。免疫增强剂指单独或同时与抗原使用均能增强机体免疫应答的物质，且通过提高贝类的非特异性免疫功能以及特异性免疫功能，来增强水产贝类的抗疾病感染能力。免疫增强剂与抗生素和疫苗相比，具有安全、无残留、作用范围广和使用方便等优点。可见，对贝类的免疫调节及增强剂进行研究与应用，有望为贝类病害防御、保障贝类产品安全提供一条新的途径。
技术实现思路
本专利技术所要解决的第一个技术问题是针对现有技术而提供一种能显著增强贻贝的免疫能力进而提高其抗病力的贻贝暂养过程中的免疫增强剂。本专利技术所要解决的第二个技术问题是针对现有技术而提供一种上述免疫增强剂的制备方法。本专利技术所要解决的第三个技术问题是针对现有技术而提供一种上述免疫增强剂在贻贝暂养过程中的应用。本专利技术解决上述第一个技术问题所采用的技术方案为：一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂，其特征在于，其由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，并且上述各组分的质量比为11～23:6～15:9～13:2～4:2～4。作为优选，所述甘露寡糖的聚合度为3～6。本专利技术解决上述第二个技术问题所采用的技术方案为：上述免疫增强剂的制备方法包括以下步骤：(1)类胡萝卜提取物的制备：取虾类加工副产物，加入体积比为2～4:6～8的异丙醇和正己烷混合提取溶剂，虾类加工副产物与上述混合提取溶剂的质量体积比为1～3:5～8；提取8～10h后，高速均质、离心，收集离心上清液，并将离心获得的沉淀物，再次采用上述提取溶剂提取1～2次后，合并上清液得提取混合液；除去提取混合液中的正己烷后，加入等体积的0.05～0.15％NaCl溶液进行漂洗，分液去除水层；然后加入少量硫酸钠以去除残留水分，经过滤后采用氮气吹打5～8min，获得提取物；将获得的提取物38～43℃下进行真空减压浓缩，即得所需的类胡萝卜素提取物；(2)将获得的类胡萝卜提取物与肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10按上述质量比混合均匀，即得所需的免疫增强剂。作为优选，所述虾类为南美白对虾或斑节对虾中的至少一种。作为优选，所述步骤(2)中使用的甘露寡糖的聚合度为3～6。本专利技术解决上述第三个技术问题所采用的技术方案为：将上述免疫增强剂以饲料添加剂的形式加入到贝类暂养饲料中，其中每千克贝类暂养饲料中加入2～4.5克上述免疫增强剂。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术的免疫增强剂中以类胡萝卜提取物为主要配料，该类胡萝卜提取物以虾类副产物为主要原料提取，充分利用水产品加工副产物进行高值化开发，同时组配肽聚糖和甘露寡糖，加入适量L-精氨酸和辅酶Q10等组分，各组分能协调增效，显著提高贻贝类机体的免疫功能，促进贻贝生长与代谢，降低死亡率。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例1：免疫增强剂制备本实施例中的免疫增强剂由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖(聚合度为3～6，下同)、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，上述各组分的质量比为11:6:9:2:2。本实施例中的免疫增强剂通过以下步骤制备：取虾类(南美白对虾)加工副产物，加入体积比为2:6的异丙醇和正己烷混合提取溶剂，虾类加工副产物与上述混合提取溶剂的质量体积比为1:5；提取8h后，高速均质、离心，收集离心上清液，并将离心获得的沉淀物，再次采用上述提取溶剂提取1～2次后，合并上清液得提取混合液。除去提取混合液中的正己烷后，加入等体积的0.05％NaCl溶液进行漂洗，分液去除水层；然后加入少量硫酸钠以去除残留水分，经过滤后采用氮气吹打5min，获得提取物；将获得的提取物38℃下进行真空减压浓缩，即得类胡萝卜素提取物。将获得的类胡萝卜提取物与肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10按上述质量比混合均匀，即得所需的免疫增强剂。实施例2：免疫增强剂制备本实施例中的免疫增强剂由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，上述各组分的质量比为23:15:13:4:4。本实施例中的免疫增强剂通过以下步骤制备：取虾类(斑节对虾)加工副产物，加入体积比为4:8的异丙醇和正己烷混合提取溶剂，虾类加工副产物与上述混合提取溶剂的质量体积比为3:8；提取10h后，高速均质、离心，收集离心上清液，并将离心获得的沉淀物，再次采用上述提取溶剂提取1～2次后，合并上清液得提取混合液。除去提取混合液中的正己烷后，加入等体积的0.15％NaCl溶液进行漂洗，分液去除水层；然后加入少量硫酸钠以去除残留水分，经过滤后采用氮气吹打8min，获得提取物；将获得的提取物43℃下进行真空减压浓缩，即得所需的类胡萝卜素提取物。将获得的类胡萝卜提取物与肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10按上述质量比混合均匀，即得所需的免疫增强剂。实施例3：免疫增强剂制备本实施例中的免疫增强剂由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，上述各组分的质量比为17:10:11:3:3。本实施例中的免疫增强剂通过以下步骤制备：取虾类加工副产物(南美白对虾加工副产物和斑节对虾加工副产物混合物，混合比例1:1)，加入体积比为3:7的异丙醇和正己烷混合提取溶剂，虾类加工副产物与上述混合提取溶剂的质量体积比为2:7；提取9h后，高速均质、离心，收集离心上清液，并将离心获得的沉淀物，再次采用上述提取溶剂提取1～2次后，合并上清液得提取混合液。除去提取混合液中的正己烷后，加入等体积的0.10％NaCl溶液进行漂洗，分液去除水层；然后加入少量硫酸钠以去除残留水分，经过滤后采用氮气吹打7min，获得提取物；将获得的提取物40℃下进行真空减压浓缩，即得所需的类胡萝卜素提取物。将获得的类胡萝卜提取物与肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10按上述质量比混合均匀，即得所需的免疫增强剂。实施例4：免疫增强剂制备本实施例中的免疫增强剂由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，上述各组分的质量比为18:10:10:2:4。本实施例中的免疫增强剂通本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂，其特征在于，其由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L‑精氨酸以及辅酶Q10，并且上述各组分的质量比为11～23:6～15:9～13:2～4:2～4。

【技术特征摘要】
1.一种贻贝暂养过程中的免疫增强剂，其特征在于，其由以下组分组成：类胡萝卜提取物、肽聚糖、甘露寡糖、L-精氨酸以及辅酶Q10，并且上述各组分的质量比为11～23:6～15:9～13:2～4:2～4。2.如权利要求1所述的免疫增强剂，其特征在于，所述甘露寡糖的聚合度为3～6。3.一种如权利要求1所述的免疫增强剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)类胡萝卜提取物的制备：取虾类加工副产物，加入体积比为2～4:6～8的异丙醇和正己烷混合提取溶剂，虾类加工副产物与上述混合提取溶剂的质量体积比为1～3:5～8；提取8～10h后，高速均质、离心，收集离心上清液，并将离心获得的沉淀物，再次采用上述提取溶剂提取1～2次后，合并上清液得提取混合液；除去提取混合液中的正己烷后，加入等体积的0.05...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宾，房传栋，邓尚贵，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33