免疫增强剂吸附不溶性金属离子制造技术

免疫增强剂能吸附于不溶性金属盐如铝盐，以改变其药代动力学、药效动力学、肌肉内保留时间、和/或免疫刺激效果。修饰免疫增强剂以引入某一部分如能调节吸附的瞵酸盐基团。这些经修饰化合物甚至在以吸附形式递送时能保持或改善其体内免疫学活性。

【技术实现步骤摘要】
本申请要求美国临时申请号61/379,126(2010年9月1日提交)、美国临时申请号61/488,394(2011年3月2日提交)和美国临时申请号61/466,887(2011年3月23日提交)的权益，其完整内容在此通过引用纳入本文以用于所有目的。
本专利技术处于配制免疫增强化合物以用于体内应用的领域。更特定地，本专利技术涉及通过例如吸附与不溶性金属盐相关联来设计用于制剂的免疫增强剂。
技术介绍
特定病原体种类的早期检测通过先天免疫系统在模式识别受体(PRR)辅助下完成。所检测病原体包括病毒、细菌、原生动物和真菌，各自组成型表达一组种类特异、突变耐受性分子，称为病原相关分子模式。Toll样受体(TLR)是一个重要的PRR家族且在先天免疫细胞中广泛表达，包括树突细胞(DC)、巨噬细胞、肥大细胞、嗜中性粒细胞、内皮细胞和成纤维细胞。TLR对细菌、病毒和寄生虫共有的保守分子模式具有特异性。已鉴定了许多不同TLR。这些TLR结合不同配体并由其激活，所述配体依次位于不同生物体或结构上。本领域中对开发能引起特异TLR反应的免疫增强化合物感兴趣。例如，参考文献1描述作为TLR2激动剂的某些脂肽。参考文献2-5各描述TLR7的小分子激动剂种类。参考文献6和7描述用于治疗疾病的TLR7和TLR8激动剂。这些各种化合物包括小分子免疫增强剂(SMIP)。这些化合物通常就其TLR调节活性进行选择，而不关注其药代动力学或药效学(PK/PD)特性或其在能有效产生免疫刺激效果的注射位点处的保留。因此，所述化合物体内引入时具有弱PK/PD或保留概况。此外，可能需要改良所述化合物的系统性暴露，如用于使广泛预防性免疫中的潜在全身副作用最小或在紧急免疫治疗设置中维持系统性暴露。如图1-5所示，在某一位点注射TLR7活性SMIP初始产生高血清浓度，所述浓度迅速下降，注射的化合物能在24小时内从肌肉中完全清除。本专利技术的目的是提供新型免疫增强剂制剂，特定是能改良或提高免疫增强剂药理学特性的SMIP，所述特性如PK/PD概况、细胞摄入、注射位点保留、B细胞总体激活减少等。另一目的是提供能改善免疫刺激活性的制剂。
技术实现思路
专利技术者意外发现免疫增强剂(且特定是TLR激动剂)的PK/PD和其在注射位点的保留能通过将其吸附到不溶性金属盐如铝盐来改良。稳定吸附化合物理想地通过配体交换发生，但已知的SMIP通常缺乏合适官能团。因此，能修饰SMIP以引入吸附部分如膦酸酯基团，其随后可调节吸附。专利技术者发现这些经修饰SMIP(特定是TLR激动剂)甚至在以已吸附形式递送时能保持其体内免疫学活性，因此改善PK/PD特性不损害免疫刺激活性。确实，本文中显示吸附TLR7激动剂会提高其免疫刺激活性。此外，吸附化合物能降低峰值血清浓度并增加肌肉内注射位点的驻留时间，这可有助于改变和控制系统性暴露水平。高系统性暴露能引起血液中生成高水平促炎细胞因子，因此注射位点处更高驻留时间能有助于使血液中促炎细胞因子生成最小，从而改善化合物的安全性和/或耐受性。细胞摄入化合物还可通过吸附来增强。本专利技术能修饰SMIP以包含至少一个吸附部分，从而经修饰SMIP具有吸附到不溶性金属盐佐剂的能力。专利技术者意识到此修饰的广泛应用性和随后作为整体配制免疫增强剂。因此，本文描述了广泛范围的功能化免疫增强化合物和含说明本专利技术的这些功能化化合物的组合物。第一方面中，本专利技术提供含至少一个吸附部分的TLR激动剂，前提是所述TLR激动剂：(a)不是TLR4激动剂；(b)不是TLR9激动剂；(c)不是下面定义的式(I)或(II)所述化合物；(d)不是下面定义的式(III)所述化合物；(e)不是下面定义的式(I-A)所述化合物。吸附部分的存在使TLR激动剂能用不溶性金属盐佐剂配制以改良或提高其药代动力学和药效学概况、增加其在肌肉内注射位点的保留、和/或增加其免疫刺激效果。第二方面中，本专利技术提供含至少一个吸附部分的水溶性TLR激动剂，前提是所述水溶性TLR激动剂：(a)不是TLR4激动剂；(b)不是TLR9激动剂；(c)不是下面定义的式(I)或(II)所述化合物；和(d)不是下面定义的式(III)所述化合物。第三方面中，本专利技术提供含至少一个膦酸酯基团的TLR激动剂，前提是所述TLR激动剂：(a)不是下面定义的式(I)或(II)所述含膦酸酯化合物；(b)不是下面定义的式(III)所述含膦酸酯化合物；(c)不是下面定义的式(I-A)所述含膦酸酯化合物。第四方面中，本专利技术提供含至少一个吸附部分的化合物，其中所述化合物是TLR1、TLR3、TLR5、TLR6、TLR8或TLR11的激动剂。本专利技术还提供吸附于不溶性金属盐的所述化合物。因此，本专利技术提供含激动剂化合物和不溶性金属盐的组合物，其中所述激动剂化合物吸附于不溶性金属盐上。第五方面中，本专利技术提供含至少一个吸附部分的化合物，其中所述化合物是TLR1、TLR2、TLR3、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8或TLR11的激动剂，前提是所述化合物：(a)不是下面定义的式(I)或(II)所述化合物；(b)不是下面定义的式(III)所述化合物；和(c)不是下面定义的式(I-A)所述化合物。第六方面中，本专利技术提供含TLR激动剂和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR激动剂吸附于不溶性金属盐，前提是所述TLR激动剂：(a)不是TLR4激动剂；(b)不是TLR9激动剂；(c)不是下面定义的式(III)所述化合物；和(d)不是下面定义的式(I-A)所述化合物。在此第六方面的一些实施方式中，所述化合物不包括酰基链或胞嘧啶核苷酸。在此第六方面的一些实施方式中，所述激动剂化合物具有低于1500Da的分子量，如低于1300Da或优选低于1000Da。根据第七方面，本专利技术提供含TLR激动剂和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR激动剂吸附于不溶性金属盐，前提是所述TLR激动剂：(a)不是下面定义的式(III)所述化合物；(b)不是下面定义的式(I-A)所述化合物；(c)不包括酰基链；和(d)不包括胞嘧啶核苷酸。此第七方面的激动剂优选具有低于1000Da的分子量。根据第八方面，本专利技术提供含至少一个吸附部分的TLR4激动剂，只要所述TLR4激动剂不包括酰基链。本专利技术还提供吸附于不溶性金属盐的所述TLR4激动剂。因此，本专利技术提供含TLR4激动剂化合物和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR4激动剂化合物吸附于不溶性金属盐。根据第九方面，本专利技术提供含至少一个吸附部分的TLR9激动剂，只要所述TLR9激动剂不包括胞嘧啶核苷。本专利技术还提供吸附于不溶性金属盐的所述TLR9激动剂。因此，本专利技术提供含TLR9激动剂化合物和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR9激动剂化合物吸附于不溶性金属盐。根据第十方面，本专利技术提供含至少一个吸附部分的TLR2激动剂，只要所述TLR2激动剂不是下面定义的式(III)所述化合物。本专利技术还提供吸附于不溶性金属盐的所述TLR2激动剂。因此，本专利技术提供含TLR2激动剂化合物和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR2激动剂化合物吸附于不溶性金属盐。根据第十一方面，本专利技术提供含至少一个吸附部分的TLR7激动剂，只要所述TLR7激动剂不是：(a)下面定义的式(I)所述化合物；(b)下本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含TLR激动剂和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR激动剂包含至少一个吸附部分，前期是所述TLR激动剂：(a)不是TLR4激动剂；(b)不是TLR9激动剂；(c)不是根据式(I)或(II)的化合物：其中：Z是‑NH2或‑OH；X1是亚烷基、经取代的亚烷基、亚烯基、经取代的亚烯基、亚炔基、经取代的亚炔基、亚碳环基、经取代的亚碳环基、杂亚碳环基、或经取代的杂亚碳环基；L1是共价键、亚芳基、经取代的亚芳基、杂亚碳环基、经取代的杂亚碳环基、亚碳环基、经取代的亚碳环基、‑S‑、‑S(O)‑、S(O)2、‑NR5‑或‑O‑X2是共价键、亚烷基或经取代的亚烷基；L2是‑NR5‑、‑N(R5)C(O)‑、‑O‑、‑S‑、‑S(O)‑、S(O)2或共价键；R3是H、烷基、经取代的烷基、杂烷基、经取代的杂烷基、烯基、经取代的烯基、芳基、经取代的芳基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环基、经取代的杂环基、杂环基烷基或经取代的杂环基烷基；Y1和Y2各自独立地是共价键、‑O‑或‑NR5‑；或‑Y1‑R1和‑Y2‑R2各自独立地是‑O‑N＝C(R6R7)；R1和R2各自独立地是H、烷基、经取代的烷基、碳环基、经取代的碳环基、杂环基、经取代的杂环基、烯基、经取代的烯基、炔基、经取代的炔基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环烷基、经取代的杂环烷基、‑亚烷基‑C(O)‑O‑R5、—(经取代的亚烷基)‑C(O)‑O‑R5、‑亚烷基‑O‑C(O)‑R5、‑(经取代的亚烷基)‑O‑C(O)‑R5、‑亚烷基‑O‑C(O)‑O‑R5或‑(经取代的亚烷基)‑O‑C(O)‑O‑R5R4是H、卤素、‑OH、‑O‑烷基、‑O‑亚烷基‑O‑C(O)‑O‑R5、‑O‑C(O)‑O‑R5、‑SH或‑NH(R5)；R5、R6和R7各自独立地是H、烷基、经取代的烷基、碳环基、经取代的碳环基、杂环基、经取代的杂环基、烯基、经取代的烯基、炔基、经取代的炔基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环基烷基或经取代的杂环基烷基；(d)不是根据式(III)的化合物其中：R1是H、‑C(O)‑C10‑C18烷基；R2是C10‑C18烷基；R3是C10‑C18烷基；L1是‑CH2O‑、‑CH2OC(O)‑、‑CH2NR7C(O)‑或–C(O)NR7‑；L2是‑O‑、‑OC(O)‑或‑NR7C(O)‑；R4是‑L3R5或‑L4R5；R5是–N(R7)2、‑OR7、‑P(O)(OR7)2、‑C(O)OR7、‑NR7C(O)L3R8、‑OL3R6、‑C(O)NR7L3R8、C1‑C6烷基、C6芳基、C10芳基、C14芳基、含1‑3个选自O、S和N的杂原子的5‑14元杂芳基、含1‑3个选自O、S和N的杂原子的C3‑C8环烷基或5‑6元杂环烷基，其中R5的芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基各可选取代有独立选自‑OR9、‑OL3R6、‑OL4R6、‑OR7和‑C(O)OR7的1‑3个取代基；L3是C1‑C10亚烷基，其中L3的C1‑C6亚烷基可选取代有1‑4个R6基团，或L3的C1‑C6亚烷基用同一碳原子上的2个C1‑C6烷基取代，所述烷基与其结合的碳原子一起形成C3‑C8环烷基；L4是‑((CR7R7)pO)q(CR10R10)p‑或‑(CR11R11)((CR7R7)pO)q(CR10R10)p‑，其中各R11是C1‑C6烷基，其与结合的碳原子一起形成C3‑C8环烷基；各R6独立选自卤素、C1‑C6烷基、‑OR7、‑N(R7)2、‑C(O)N(R7)2、‑P(O)(OR7)2、C6芳基、C10芳基和C14芳基；R7各自独立地选自H和C1‑C6烷基；R8选自–SR7、‑C(O)OH和5‑6元杂环烷基，所述杂环烷基含1‑3个选自O和N的杂原子；R9是苯基；R10各自独立地选自H和卤素；p各自独立地选自1、2、3、4、5和6，以及q是1、2、3或4；(e)不是根据式(I‑A)的化合物其中：X3是N；X4是N或CR3X5是‑CR4＝CR5‑；R1和R2是H；R3是H；R4和R5各独立选自H、卤素、‑C(O)OR7、‑C(O)R7、‑C(O)N(R11R12)、‑N(R11R12)、‑N(R9)2、‑NHN(R9)2、‑SR7、‑(CH2)nOR7、‑(CH2)nR7、‑LR8、‑LR10、‑OLR8、‑OLR10、C1‑C6烷基、C1‑C6杂烷基、C1‑C6卤代烷基、C2‑C8烯烃、C2‑C8炔烃、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤代烷氧基、芳基、杂芳基、C3‑C8环烷基、和C3‑C8杂环烷基，其中R4和R5的C1‑C6烷基、C1‑C6杂烷基、C1‑C6卤代烷基、C2‑C8烯烃、C2‑C8炔烃、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤代烷氧基、芳基、杂芳基、C3‑C8环烷基、和C3‑C8杂环烷基各可选取代有1‑3个独立选自卤素、‑CN、‑NO...

【技术特征摘要】
2010.09.01 US 61/379,126;2011.03.02 US 61/448,394;1.一种含TLR激动剂和不溶性金属盐的组合物，其中所述TLR激动剂包含至少一个吸附部分，前期是所述TLR激动剂：(a)不是TLR4激动剂；(b)不是TLR9激动剂；(c)不是根据式(I)或(II)的化合物：其中：Z是-NH2或-OH；X1是亚烷基、经取代的亚烷基、亚烯基、经取代的亚烯基、亚炔基、经取代的亚炔基、亚碳环基、经取代的亚碳环基、杂亚碳环基、或经取代的杂亚碳环基；L1是共价键、亚芳基、经取代的亚芳基、杂亚碳环基、经取代的杂亚碳环基、亚碳环基、经取代的亚碳环基、-S-、-S(O)-、S(O)2、-NR5-或-O-X2是共价键、亚烷基或经取代的亚烷基；L2是-NR5-、-N(R5)C(O)-、-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2或共价键；R3是H、烷基、经取代的烷基、杂烷基、经取代的杂烷基、烯基、经取代的烯基、芳基、经取代的芳基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环基、经取代的杂环基、杂环基烷基或经取代的杂环基烷基；Y1和Y2各自独立地是共价键、-O-或-NR5-；或-Y1-R1和-Y2-R2各自独立地是-O-N＝C(R6R7)；R1和R2各自独立地是H、烷基、经取代的烷基、碳环基、经取代的碳环基、杂环基、经取代的杂环基、烯基、经取代的烯基、炔基、经取代的炔基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环烷基、经取代的杂环烷基、-亚烷基-C(O)-O-R5、—(经取代的亚烷基)-C(O)-O-R5、-亚烷基-O-C(O)-R5、-(经取代的亚烷基)-O-C(O)-R5、-亚烷基-O-C(O)-O-R5或-(经取代的亚烷基)-O-C(O)-O-R5R4是H、卤素、-OH、-O-烷基、-O-亚烷基-O-C(O)-O-R5、-O-C(O)-O-R5、-SH或-NH(R5)；R5、R6和R7各自独立地是H、烷基、经取代的烷基、碳环基、经取代的碳环基、杂环基、经取代的杂环基、烯基、经取代的烯基、炔基、经取代的炔基、芳基烷基、经取代的芳基烷基、杂环基烷基或经取代的杂环基烷基；(d)不是根据式(III)的化合物其中：R1是H、-C(O)-C10-C18烷基；R2是C10-C18烷基；R3是C10-C18烷基；L1是-CH2O-、-CH2OC(O)-、-CH2NR7C(O)-或–C(O)NR7-；L2是-O-、-OC(O)-或-NR7C(O)-；R4是-L3R5或-L4R5；R5是–N(R7)2、-OR7、-P(O)(OR7)2、-C(O)OR7、-NR7C(O)L3R8、-OL3R6、-C(O)NR7L3R8、C1-C6烷基、C6芳基、C10芳基、C14芳基、含1-3个选自O、S和N的杂原子的5-14元杂芳基、含1-3个选自O、S和N的杂原子的C3-C8环烷基或5-6元杂环烷基，其中R5的芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基各可选取代有独立选自-OR9、-OL3R6、-OL4R6、-OR7和-C(O)OR7的1-3个取代基；L3是C1-C10亚烷基，其中L3的C1-C6亚烷基可选取代有1-4个R6基团，或L3的C1-C6亚烷基用同一碳原子上的2个C1-C6烷基取代，所述烷基与其结合的碳原子一起形成C3-C8环烷基；L4是-((CR7R7)pO)q(CR10R10)p-或-(CR11R11)((CR7R7)pO)q(CR10R10)p-，其中各R11是C1-C6烷基，其与结合的碳原子一起形成C3-C8环烷基；各R6独立选自卤素、C1-C6烷基、-OR7、-N(R7)2、-C(O)N(R7)2、-P(O)(OR7)2、C6芳基、C10芳基和C14芳基；R7各自独立地选自H和C1-C6烷基；R8选自–SR7、-C(O)OH和5-6元杂环烷基，所述杂环烷基含1-3个选自O和N的杂原子；R9是苯基；R10各自独立地选自H和卤素；p各自独立地选自1、2、3、4、5和6，以及q是1、2、3或4；(e)不是根据式(I-A)的化合物其中：X3是N；X4是N或CR3X5是-CR4＝CR5-；R1和R2是H；R3是H；R4和R5各独立选自H、卤素、-C(O)OR7、-C(O)R7、-C(O)N(R11R12)、-N(R11R12)、-N(R9)2、-NHN(R9)2、-SR7、-(CH2)nOR7、-(CH2)nR7、-LR8、-LR10、-OLR8、-OLR10、C1-C6烷基、C1-C6杂烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C8烯烃、C2-C8炔烃、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基、和C3-C8杂环烷基，其中R4和R5的C1-C6烷基、C1-C6杂烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C8烯烃、C2-C8炔烃、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基、和C3-C8杂环烷基各可选取代有1-3个独立选自卤素、-CN、-NO2、-R7、-OR8、-C(O)R8、-OC(O)R8、-C(O)OR8、-N(R9)2、-P(O)(OR8)2、-OP(O)(OR8)2、-P(O)(0R10)2、-OP(O)(OR10)2、-C(O)N(R9)2、-S(O)2R8、-S(O)R8、-S(O)2N(R9)2、和-NR9S(O)2R8的取代基；或者，R3和R4、或R4和R5、或R5和R6在相邻环原子上存在时，能可选连接在一起形成5-6元环，其中所述5-6元环可选取代有R7；各L独立选自键、-(O(CH2)m)t-、C1-C6烷基、C2-C6亚烯基和C2-C6亚炔基，其中L的C1-C6烷基、C2-C6亚烯基和C2-C6亚炔基各可选取代有1-4个独立选自卤素、-R8、-OR8、-N(R9)2、-P(O)(OR8)2、-OP(O)(OR8)2、-P(O)(OR10)2、和-OP(O)(OR10)2的取代基；R7选自H、C1-C6烷基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C8烯烃、C2-C8炔烃、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、和C3-C8杂环烷基，其中R7的C1-C6烷基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C8烯烃、C2-C8炔烃、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、和C3-C8杂环烷基各可选取代有1-3个R13基团，各R13独立选自卤素、-CN、-LR9、-LOR9、-OLR9、-LR10、-LOR10、-OLR10、-LR8、-LOR8、-OLR8、-LSR8、-LSR10、-LC(O)R8、-OLC(O)R8、-LC(O)OR8、-LC(O)R10、-LOC(O)OR8、-LC(O)NR9R11、-LC(O)NR9R8、-LN(R9)2、-LNR9R8、-LNR9R10、-LC(O)N(R9)2、-LS(O)2R8、-LS(O)R8、-L...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·辛格，D·A·G·斯基宾斯基，T·Y·吴，Y·李，A·考特兹，张晓跃，邹叶芬，T·Z·霍夫曼，潘建烽，K·岳，
申请(专利权)人：诺华有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH