一种中缅树鼩脂肪细胞的流式细胞样品制作方法技术

技术编号:13596125 阅读:102 留言:0更新日期:2016-08-26 13:51
本发明专利技术涉及细胞样本制作领域,具体涉及一种中缅树鼩脂肪细胞的流式细胞样品制作方法。本发明专利技术方法利用4%多聚甲醛进行细胞固定,0.05%Tween进行细胞打孔,制作中缅树鼩脂肪细胞流式样本。使用本发明专利技术方法,能有效解决一般情况下细胞通透时造成的大量脂肪细胞破碎,以及离心转速对固定的脂肪细胞造成的破碎的问题,成功制作出符合流式上机要求的脂肪细胞样品,为细胞检测技术提供方法依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞样本制作领域,具体涉及一种中缅树鼩脂肪细胞的流式细胞样品制作方法
技术介绍
流式细胞术自20世纪60年代开始发展起来,主要应用于生命科学的基础研究,尤其是细胞生物学、免疫学和分子生物学,是细胞与分子生物学、单克隆抗体技术、生物技术、荧光化学、激光技术、光电子物理、流体力学、计算机技术等多学科领域共同发展的结晶。它不仅能够快速定量分析细胞群的物理化学特征,还能通过这些特征精确分选细胞,主要分为流式细胞分析和流式细胞分选两部分。80年代后期开始应用于临床,并通过对外周血CD4+T细胞的检测来监测HIV患者疾病的进展,开启了用于临床医学的新纪元。现在,流式细胞术不仅能够辅助多种疾病的判断,同时为生物学发展提供了新技术。细胞因子是由非免疫细胞或免疫细胞合成和分泌的小分子多肽,在调节机体多种细胞的分化、生长和功能,调节正常与病理状态下的免疫应答起着十分重要的作用。检测细胞因子对于阐明机体免疫应答机制的发生、发展和临床治疗具有重要意义。随着研究进展,仅仅对细胞进行活性的检测和定量已不能满足需要。目前,在单细胞水平上研究细胞因子的表达能力越来越受到重视。应用流式细胞仪结合间接本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中缅树鼩脂肪细胞的流式细胞样品制作方法,其特征在于,包含以下步骤:(1)动物断颈处死后,分别取下树鼩肩胛、耳后、腋下褐色脂肪组织,与腹部大网膜、腹股沟白色脂肪组织,随后将其泡在PBS中,并将组织上沾着的毛洗掉;(2)将上述组织置于2mL的离心管中,加1mL 0.25%不含EDTA的胰酶,用平剪将组织剪碎,约1mm3大小,将剪碎的组织块转移至15mL离心管中,加入胰酶补至4mL,放入37℃水浴锅中温浴,每隔10min摇晃一次,显微镜下观察组织块消化成单细胞的程度,共50‑70分钟;若样品较为粘稠,1000rpm离心10min仍不能离下沉淀,则补PBS至10mL离心,1500rpm,10min...

【技术特征摘要】
1.一种中缅树鼩脂肪细胞的流式细胞样品制作方法,其特征在于,包含以下步骤:(1)动物断颈处死后,分别取下树鼩肩胛、耳后、腋下褐色脂肪组织,与腹部大网膜、腹股沟白色脂肪组织,随后将其泡在PBS中,并将组织上沾着的毛洗掉;(2)将上述组织置于2mL的离心管中,加1mL 0.25%不含EDTA的胰酶,用平剪将组织剪碎,约1mm3大小,将剪碎的组织块转移至15mL离心管中,加入胰酶补至4mL,放入37℃水浴锅中温浴,每隔10min摇晃一次,显微镜下观察组织块消化成单细胞的程度,共50-70分钟;若样品较为粘稠,1000rpm离心10min仍不能离下沉淀,则补PBS至10mL离心,1500rpm,10min,弃上清液,保留沉淀;(3)将步骤(2)中留取的沉淀用10mL PBS重悬一下,将大的组织块剔除,离心1000rpm,10min,弃上清液,留少量PBS将松散的沉淀吹散,吸出...

【专利技术属性】
技术研发人员:王政昆朱万龙孙舒然高文荣
申请(专利权)人:云南师范大学
类型:发明
国别省市:云南;53

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