1-(氯甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[e]吲哚二聚体抗体-药物缀合物化合物及使用和治疗方法技术

本发明专利技术提供包含经由接头与1‑(氯甲基)‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[e]吲哚(CBI)二聚体药物部分缀合的抗体的抗体‑药物缀合物及使用所述抗体‑药物缀合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用所提交的本申请要求2013年12月16日提交的美国临时申请61/916,388和2014年3月24日提交的美国临时申请61/969,499及2014年6月16日提交的国际申请PCT/US2014/042560的优先权的权益，通过引用的方式将其全部内容并入本文。
本专利技术大体涉及与1-(氯甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[e]吲哚(CBI)二聚体药物部分缀合以形成具有治疗性或诊断性应用的抗体-药物缀合物的抗体。所述抗体可用游离半胱氨酸氨基酸工程化，所述游离半胱氨酸氨基酸的反应性用于与CBI二聚体药物-接头中间体缀合。本专利技术还涉及使用所述CBI二聚体抗体-药物缀合物化合物在体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞或相关病理学病症的方法。
技术介绍
抗体药物缀合物(ADC)是靶向化学治疗分子，组合抗体和细胞毒性药物二者的特性，即通过将有效的细胞毒性药物靶向表达抗原的肿瘤细胞，内在化，并释放药物，由此增强它们的抗肿瘤活性(Carter,P.andSenter,P.(2008)TheCancerJour.14(3):154-169)。针对给定靶抗原的成功ADC开发取决于抗体选择、接头设计和稳定性、细胞毒性药物效力及药物和接头缀合至抗体的方式的优化(Polakis,P.(2005)CurrentOpinioninPharmacology5:382-387)。5-氨基-1-(氯甲基)-1,2-二氢-3H-苯并[e]吲哚(氨基CBI)类DNA小沟烷基化剂是有效的细胞毒素(Atwell等(1999)J.Med.Chem.,42:3400)，并且已在许多涉及为癌症疗法的前药中被用作效应子单元。它们已包括抗体缀合物(Jeffrey等(2005)J.Med.Chem.,48:1344)、基于氨基甲酸硝基苄基酯的用于基因疗法的前药(Hay等(2003)J.Med.Chem.46:2456)和作为缺氧活化前药的相应的硝基-CBI衍生物(Tercel等(2011)Angew.Chem.,Int.Ed.,50:2606-2609)。CBI与吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(PBD)药效团已通过烷基链连接在一起(Tercel等(2003)J.Med.Chem46:2132-2151)。PBD二聚体(其中两个吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂单元被亚烷基或亚烷基-亚芳基束缚)是与DNA小沟中胍反应的非常有效的股间交联剂(Rahman等(2009)Jour.Amer.Chem.Soc.131(38):13756-13766；Thurston等(1994)Chem.Rev.,94:433-465；Bose等(1992)J.Am.Chem.Soc.114:4939-4941；Gregson等(2004)Jour.Med.Chem.47(5):1161-1174；US7511032；US7528126；US7557099；US7049311；US7067511；US7265105)且具有对抗革兰氏阳性菌(Doyle等(2009)Jour.Antimicrob.Chemo.65(5):949-959；Hadjivassileva等(2005)Jour.Antimicrob.Chemo.56(3):513-518)、人类B细胞慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞(Pepper等(2004)CancerRes.64(18):6750-6755)和实体肿瘤(Hochhauser等(2009)Clin.CancerRes.15(6):2140-2147；Alley等(2004)64(18):6700-6706；Hartley等(2004)CancerRes.64(18):6693-6699)的活性。二聚体形式的PBD已与抗体连接形成ADC(US2009/304710；US2010/047257；US2009/036431；WO2011/130598,WO2011/130616；US2013/0028919)。
技术实现思路
本专利技术包括通过接头共价连接以形成具有治疗性或诊断性应用的抗体-药物缀合物(ADC)化合物的1-(氯甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[e]吲哚(CBI)二聚体药物部分。本专利技术的一个方面是具有下式的抗体-药物缀合物化合物：Ab-(L-D)p其中：Ab是抗体；L是具有下式的接头：-Str-(Pep)m-(Sp)n-其中Str是与抗体共价连接的延伸单元(stretcherunit)；Pep是具有2至12个氨基酸残基的任选肽单元，Sp是与二聚体药物部分共价连接的任选间隔基单元，且m和n独立地选自0和1；p是1至8的整数；D是具有下式的二聚体药物部分：其中R1选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；R2选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；Ra和Rb独立地选自H和任选取代有一个或多个F的C1-C6烷基，或Ra和Rb形成五元或六元杂环基；T是选自以下的束缚基团(tethergroup)：C3-C12亚烷基、Y、(C1-C6亚烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)、(C1-C6亚烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)、(C2-C6亚烯基)-Y-(C2-C6亚烯基)和(C2-C6亚炔基)-Y-(C2-C6亚炔基)；其中Y独立地选自O、S、NR1、芳基和杂芳基；其中亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有F、OH、O(C1-C6烷基)、NH2、NHCH3、N(CH3)2、OP(O)3H2和C1-C6烷基，其中烷基任选地取代有一个或多个F；或亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有与L的键；D’是选自以下的药物部分：其中波浪线表示与T连接的位点；X1和X2独立地选自O和NR3，其中R3选自H和任选地取代有一个或多个F的C1-C6烷基；R4为H、CO2R或与L的键，其中R为C1-C6烷基或苄基；且R5为H或C1-C6烷基。本专利技术的一个方面是所述抗体-药物缀合物化合物与药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂的药物组合物。本专利技术的一个方面是治疗癌症的方法，其包括向患者给药治疗有效量的所述抗体-药物缀合物化合物。本专利技术的一个方面是治疗癌症的试剂盒，其包含：a)药物组合物；和b)使用说明。本专利技术的一个方面是接头-药物中间体，其选自：X-L-D其中：X为反应性官能团，其选自马来酰亚胺、巯基、氨基、溴化物、溴乙酰氨基、碘乙酰氨基、对甲苯磺酸酯、碘化物本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下式的抗体‑药物缀合物化合物：Ab‑(L‑D)p其中：Ab是抗体；L是具有下式的接头：‑Str‑(Pep)m‑(Sp)n‑其中Str是与抗体共价连接的延伸单元；Pep是具有2至12个氨基酸残基的任选肽单元，Sp是与二聚体药物部分共价连接的任选间隔基单元，且m和n独立地选自0和1；p是1至8的整数；D是具有下式的二聚体药物部分：其中R1选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；R2选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；Ra和Rb独立地选自H和任选取代有一个或多个F的C1‑C6烷基，或Ra和Rb形成五元或六元杂环基；T是选自以下的束缚基团：C3‑C12亚烷基、Y、(C1‑C6亚烷基)‑Y‑(C1‑C6亚烷基)、(C1‑C6亚烷基)‑Y‑(C1‑C6亚烷基)‑Y‑(C1‑C6亚烷基)、(C2‑C6亚烯基)‑Y‑(C2‑C6亚烯基)和(C2‑C6亚炔基)‑Y‑(C2‑C6亚炔基)；其中Y独立地选自O、S、NR1、芳基和杂芳基；其中亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有F、OH、O(C1‑C6烷基)、NH2、NHCH3、N(CH3)2、OP(O)3H2和C1‑C6烷基，其中烷基任选地取代有一个或多个F；或亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有与L的键；D’是选自以下的药物部分：其中波浪线表示与T连接的位点；X1和X2独立地选自O和NR3，其中R3选自H和任选地取代有一个或多个F的C1‑C6烷基；R4为H、CO2R或与L的键，其中R为C1‑C6烷基或苄基；且R5为H或C1‑C6烷基；其中所述抗体与Napi2b结合。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.16 US 61/916,388;2014.03.24 US 61/969,499;1.具有下式的抗体-药物缀合物化合物：
Ab-(L-D)p其中：
Ab是抗体；
L是具有下式的接头：
-Str-(Pep)m-(Sp)n-
其中Str是与抗体共价连接的延伸单元；Pep是具有2至12个氨基酸残基的任选肽单元，
Sp是与二聚体药物部分共价连接的任选间隔基单元，且m和n独立地选自0和1；
p是1至8的整数；
D是具有下式的二聚体药物部分：
其中
R1选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；
R2选自H、P(O)3H2、C(O)NRaRb或与L的键；
Ra和Rb独立地选自H和任选取代有一个或多个F的C1-C6烷基，
或Ra和Rb形成五元或六元杂环基；
T是选自以下的束缚基团：C3-C12亚烷基、Y、(C1-C6亚烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)、(C1-C6亚
烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)-Y-(C1-C6亚烷基)、(C2-C6亚烯基)-Y-(C2-C6亚烯基)和(C2-C6亚炔
基)-Y-(C2-C6亚炔基)；
其中Y独立地选自O、S、NR1、芳基和杂芳基；
其中亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有F、OH、O(C1-C6烷基)、NH2、
NHCH3、N(CH3)2、OP(O)3H2和C1-C6烷基，其中烷基任选地取代有一个或多个F；
或亚烷基、亚烯基、芳基和杂芳基独立地且任选地取代有与L的键；
D’是选自以下的药物部分：
其中波浪线表示与T连接的位点；
X1和X2独立地选自O和NR3，其中R3选自H和任选地取代有一个或多个F的C1-C6烷基；
R4为H、CO2R或与L的键，其中R为C1-C6烷基或苄基；且
R5为H或C1-C6烷基；其中所述抗体与Napi2b结合。
2.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中Str具有下式：
其中R6选自C1-C10亚烷基、C3-C8碳环基、O-(C1-C8烷基)、亚芳基、C1-C10亚烷基-亚芳基、
亚芳基-C1-C10亚烷基、C1-C10亚烷基-(C3-C8碳环基)、(C3-C8碳环基)-C1-C10亚烷基、C3-C8杂
环基、C1-C10亚烷基-(C3-C8杂环基)、(C3-C8杂环基)-C1-C10亚烷基、C1-C10亚烷基-C(O)N(R8)-
C2-C6亚烷基-N(R8)、N(R8)-(C2-C6亚烷基)和(CH2CH2O)r-CH2；其中R8为H或C1-C6烷基，且r为1
至10的整数。
3.权利要求2的抗体-药物缀合物化合物，其中R6为(CH2)5。
4.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中m为0，且n为0。
5.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中m为0，且n为1。
6.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中Str具有下式：
其中R7选自C1-C10亚烷基、C1-C10亚烷基-O、N(R8)-(C2-C6亚烷基)-N(R8)、N(R8)-(C2-C6亚
烷基)和(CH2CH2O)r-CH2；其中R8为H或C1-C6烷基，且r为1至10的整数。
7.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中Str具有下式：
其中R9选自C1-C10亚烷基、C1-C10亚烷基-O、(C2-C6亚烷基)-N(R8)和(CH2CH2O)r-CH2；其中
R8为H或C1-C6烷基，且r为1至10的整数。
8.权利要求7的抗体-药物缀合物化合物，其中L与所述抗体的半胱氨酸氨基酸形成二
硫键，且R9为C2-C6亚烷基-O，其中亚烷基任选地取代有F、OH、O(C1-C6烷基)、NH2、NHCH3、N
(CH3)2、OP(O)3H2和C1-C6烷基，其中烷基任选地取代有一个或多个F。
9.权利要求1的抗体-药物缀合物化合物，其中m为...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·A·弗吕加勒，T·H·皮洛，B·萨菲纳，V·韦尔马，魏斌清，W·丹尼，A·吉登斯，H·李，GL·鲁，C·米勒，G·鲁卡斯尔，M·特瑟尔，M·邦尼特，
申请(专利权)人：基因泰克公司，
类型：发明
国别省市：美国;US