一种桉树染色体的压片方法技术

本发明专利技术属于植物鉴定技术领域，公开了一种桉树染色体的压片方法。该方法包括以下步骤：取材、预处理、固定、解离、染色和压片以及镜检。该方法采用胺磺灵作为预处理剂，在阻断细胞有丝分裂时，对细胞毒害作用明显减轻，细胞可进行正常有丝分裂，从而在固定时，累积的分裂中期相细胞数多，因此，使染色体压片成功的比例增加，稳定性提高。而且胺磺灵价格便宜，毒性远远小于秋水仙素，在压片过程中，可减少对环境的污染，减少对人产生毒害的程度和风险。

【技术实现步骤摘要】
201610087721

【技术保护点】
一种桉树染色体的压片方法，其特征在于包括以下具体步骤：(1)取材：取尾巨桉无性系DH32‑29的二倍体或四倍体组培生根苗生根5～10天的根尖，距最尖端处0.5cm以内部分；(2)预处理：将所取的根尖用蒸馏水清洗干净，放入0.002～0.02g/L的胺磺灵中浸泡处理3h～7h；(3)固定：将预处理后的根尖用蒸馏水清洗干净，放入卡诺氏固定液中于4℃条件下固定24h；(4)解离：从固定液中取出根尖，用蒸馏水漂洗，放入37℃的混合酶液中解离30～40min；(5)压片和染色：将解离后的根尖用蒸馏水漂洗后，置于载玻片上，用刀片把根冠及延长区部分切去，滴1滴卡宝品红染色液，染色10min，然后，盖上盖玻片，并用橡皮擦轻轻敲打盖玻片，用吸水纸把多余的染色液吸干；(6)镜检：将压片置于显微镜下观察，选择染色体分散、充分收缩，呈棒状，清晰且处于有丝分裂中期分裂相的细胞进行计数和拍照。

【技术特征摘要】
1.一种桉树染色体的压片方法，其特征在于包括以下具体步骤：
(1)取材：取尾巨桉无性系DH32-29的二倍体或四倍体组培生根苗生根
5～10天的根尖，距最尖端处0.5cm以内部分；
(2)预处理：将所取的根尖用蒸馏水清洗干净，放入0.002～0.02g/L的胺
磺灵中浸泡处理3h～7h；
(3)固定：将预处理后的根尖用蒸馏水清洗干净，放入卡诺氏固定液中
于4℃条件下固定24h；
(4)解离：从固定液中取出根尖，用蒸馏水漂洗，放入37℃的混合酶液
中解离30～40min；
(5)压片和染色：将解离后的根尖用蒸馏水漂洗后，置于载玻片上，用
刀片把根冠及延长区部分切去，滴1滴卡宝品红染色液，染色10min，然后，
盖上盖玻片，并用橡皮擦轻轻敲打盖玻片，用吸水...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩超，徐建民，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44