一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法，包括：将载体材料、脂质混合物及他莫昔芬溶解于有机溶剂中制备出油相；将红景天苷溶于去离子水中制备出水相；将所述水相加入到所述油相中，超声乳化形成W/O型初乳，再加入表面活性剂，超声乳化形成W/O/W型复乳后，除去所述有机溶剂，然后进行离心操作，弃去上清液，收集沉淀物得到所述纳米制剂。本发明专利技术具有使红景天苷对他莫昔芬起到增敏的作用，拮抗其耐药性，进而还具有能够降低给药剂量从而减缓毒副作用的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法
本专利技术涉及中药制剂领域，具体涉及一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法。
技术介绍
癌症是一种不正常和不可控制生长的细胞，经常导致为恶性肿瘤。它可发生于人体的任何器官和组织。迄今为止，它是最具毁灭性的的疾病因为其高死亡率。乳腺癌是发生在乳腺上的癌症。世界范围内调查可知，乳腺癌是继肺癌之后的第二大常见恶性肿瘤，世界上约1/5的癌症病人是乳腺癌患者。他莫昔芬，作为一种临床治疗乳腺癌常用药，用于治疗晚期乳腺癌和卵巢癌；临床治疗乳腺癌，通过可抑制雌激素的产生起到治疗作用，有效率一般在30％，雌激素受体阳性患者疗效较好(49％)，阴性患者疗效差(7％)，绝经前和绝经后患者均可使用，而绝经后和60岁以上的人较绝经前和年轻患者的效果为好；在临床使用中，多以枸橼酸盐的形式进行服用，但随着在临床的广泛使用，越来越多的副作用接踵而来，肿瘤细胞对药物产生耐药性，效果降低是其中最大的问题，也是肿瘤化疗的主要障碍。同时，近代研究发现，中药抗肿瘤具有很多优势，其中改善病人生存质量尤为突出，这集中体现在对西药耐药性及毒副作用的拮抗和缓解；因此，对植物药及植物药来源的成分进行抗肿瘤研究尤为必要。红景天苷，化学名称2-(4-羟基苯基)乙基-β-D-葡萄糖苷，2015年药典规定，其含量的高低是衡量红景天药材品质的重要标准，现代药理研究表明，红景天苷具有抗氧化，保护心脏及抗乳腺和肺癌等药理活性；但是，红景天苷虽具有抗乳腺癌的活性，但其单体不稳定、水溶性大，生物利用度不佳，这也是制约其有效利用的问题所在。纳米制剂作为药物载体，其具有广泛优点，如可降低给药剂量以改善药物的生物利用度；具有缓释及靶向作用；增加药物溶解度，特别是能够使两种药物结合进同一载体以达到协同增敏的作用。PLGA-PEG-PLGA，是一种新的生物材料，在不同的药物传递系统中应用广泛。由两亲性聚合物PEG(聚乙二醇)和PLGA(聚乳酸-羟基乳酸共聚物)聚合而成，可缓释药物，具有较好的生物相容性和安全性。
技术实现思路
本专利技术设计开发了一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法，本专利技术的目的之一是解决单独使用他莫昔芬(Tam)时的药用副作用较大的问题，并且由于他莫昔芬的耐药性使其药效降低的问题，同时，通过本专利技术的制备方法同时还能解决红景天苷(Sal)单体不稳定、水溶性差、生物利用度不佳的问题。本专利技术的目的之二是通过两亲性聚合物PEG(聚乙二醇)和PLGA(聚乳酸-羟基乳酸共聚物)聚合物的纳米制剂作为药物载体，使两种药物能够结合进同一载体达到协同增敏的作用，解决药物溶解度过小，改善药物的生物利用度低及释药速度过快的问题。本专利技术设计以PLGA-PEG-PLGA聚合物为载体采用超声复乳化-溶剂挥发法制备红景天苷及他莫昔芬双载药抗乳腺癌纳米粒(Salidroside,Tamoxifennanoparticles,Sal,Tam-NPs)，其纳米制剂可缓释药物，并且具有较好的生物相容性及安全性，同时，本专利技术还具有通过红景天苷的使用对他莫昔芬起到增敏的作用，拮抗其耐药性，进而还具有能够降低他莫昔芬给药剂量从而减缓毒副作用的特点。本专利技术提供的技术方案为：一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法，包括如下步骤：将载体材料、脂质混合物及他莫昔芬溶解于有机溶剂中构成油相；将红景天苷溶于去离子水中构成水相；将所述水相加入到所述油相中去，超声乳化形成W/O型初乳，再加入表面活性剂，超声乳化形成W/O/W型复乳后，除去所述有机溶剂，然后进行离心操作，弃去上清液，收集沉淀物得到所述纳米制剂。优选的是，载体材料为分子量为7000D～15000D的聚乙二醇聚乳酸乙醇酸共聚物。优选的是，所述表面活性剂为浓度为1％～2％的聚乙烯醇水溶液。优选的是，所述脂质混合物为氢化大豆卵磷脂和胆固醇的混合物。优选的是，所述有机相与所述水相体积比为2:1～8:1。优选的是，所述超声乳化形成W/O型初乳时，超声功率为10％～15％，超声乳化形成W/O/W型复乳时，超声功率为30％～35％。优选的是，所述超声操作使用探头式超声乳化仪搅拌，在冰浴条件下进行，每次持续2分钟，并且采用开启5秒，关闭5秒。优选的是，所述离心操作为12000转/每分钟，持续时间60分钟。优选的是，所述有机溶剂为二氯甲烷和乙酸乙酯的混合溶剂。优选的是，所述聚乙烯醇水溶液中的聚乙烯醇分子量为30～70KD。本专利技术与现有技术相比较所具有的有益效果：1、通过使用本专利技术所提供的制备方法能够提供一种双载药的纳米制剂，其能够有效的降低制药成本、制药工艺，并且在成药后能够提高病人的依从性，减少给药次数；2、通过筛选PLGA-PEG-PLGA聚合物分子量、表面活性剂浓度等优处方制得Sal,Tam-NPs，其纳米粒的平均粒径约为220nm，均为粒度分布均匀的球形实体粒子，使红景天苷(Sal)及他莫昔芬(Tam)具有稳定的包封率，并且通过稳定性实验表明纳米粒Sal,Tam-NPs更适合低温保存或者冷冻干燥成粉针剂进行储存；3、Sal,Tam-NPs在酸性和中性介质中均具有缓释的特征，且具有一定的pH敏感性，纳米粒在pH3酸性释放介质中比在pH7释放介质中释放快，这更加有利于药物在肿瘤部位发挥长效作用，降低毒副作用；4、通过CCK-8法考察制剂和游离药物分别对4T1乳腺癌细胞的毒性，结果提示空载纳米制剂和红景天苷单体的细胞存活率均在95％以上，对4T1细胞没有毒性，聚合物材料具有很好的生物相容性，Sal,Tam-NPs制剂组具有显著的细胞毒性作用，相对于游离药物，Sal,Tam-NPs制剂组对抑制乳腺癌具有更好的效果；5、通过BABL/c小鼠原位乳腺癌模型，经过不同的给药处理后发现，Sal,Tam-NPs制剂组的小鼠体重降低趋势比其他两组缓慢，小鼠的肿瘤体积增长趋势也明显低于模型组(P<0.01)，同时低于他莫昔芬组，通过观察各荷瘤小鼠的生存期发现，Sal,Tam-NPs制剂组大于模型组和他莫昔芬组，通过Sal,Tam-NPs制剂组的实验可明显延长小鼠的生存期，进而表明通过Sal,Tam-NPs制剂相较于单独使用他莫昔芬具有更好的效果。附图说明图1为乳化剂种类对Sal,Tam-NPs的影响的示意图。图2为初乳中有机相/水相体积比对Sal,Tam-NPs的影响的示意图。图3为超声强度对Sal,Tam-NPs的影响的示意图。图4为纳米粒的粒径分布图。图5为纳米粒的Zeta电位分布图。图6a为纳米粒的扫描电镜图。图6b为纳米粒的扫描电镜图。图6c为纳米粒的扫描电镜图。图7为红景天苷、他莫昔芬和Sal,Tam-NPs的DSC图谱。图8为纳米溶液的稳定性实验结果。图9a为pH7条件下红景天苷，他莫昔芬单体和在制剂中的累积释放曲线图。图9b为pH7条件下红景天苷单体和在制剂中的累积释放曲线图。图10为pH3条件下红景天苷，他莫昔芬单体和在制剂中的累积释放曲线图。图11为cck-8实验中Sal,Tam-NPs和Tam单药的IC50计算图。图12为纳米制剂和单药组对4T1细胞的抑制作用的示意图。图13为给药后小鼠体重的变化的示意图。图14为给药后小鼠肿瘤体积生长曲线。图15为给本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将载体材料、脂质混合物及他莫昔芬溶解于有机溶剂中构成油相；将红景天苷溶于去离子水中构成水相；将所述水相加入到所述油相中去，超声乳化形成W/O型初乳，再加入表面活性剂，超声乳化形成W/O/W型复乳后，除去所述有机溶剂，然后进行离心操作，弃去上清液，收集沉淀物得到所述纳米制剂。

【技术特征摘要】
1.一种红景天苷及他莫昔芬的双载药抗乳腺癌纳米制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将载体材料、脂质混合物及他莫昔芬溶解于有机溶剂中构成油相；将红景天苷溶于去离子水中构成水相；将所述水相加入到所述油相中去，超声乳化形成W/O型初乳，再加入表面活性剂，超声乳化形成W/O/W型复乳后，除去所述有机溶剂，然后进行离心操作，弃去上清液，收集沉淀物得到所述纳米制剂；所述载体材料为分子量为7000D～15000D的聚乙二醇聚乳酸乙醇酸共聚物；所述表面活性剂为浓度为1％～2％的聚乙烯醇水溶液；所述脂质混合物为氢化大豆卵磷脂和胆固醇的混合物；所述有机相与所述水相体积比为2:1～8:1；所述超声乳化形成W/O型初乳时，超声功率为10％～15％，超声乳化形成...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧杰，王萌，任晓亮，高秀梅，樊官伟，刘志东，李佳玮，崔英，姜苗苗，张鹏，王彧，谭乐俊，段伟兵，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：天津;12