一种高含量银耳多糖的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高含量银耳多糖的制备方法，首先采用加热回流提取后经过两次大孔树脂的纯化步骤，然后依次经过减压浓缩、95％的乙醇醇沉、静置、过滤、减压干燥、最后粉碎的工艺流程得到银耳多糖的提取物，两种不同的大孔吸附树脂联用方法有效的去除了银耳多糖中的色素、蛋白质及其他杂质，从而得到高含量的银耳多糖；且大孔吸附树脂柱可以反复使用，既合理利用了资源又节约了成本，因此本方法易于推广，具有很强的实用性，适用于生产放大，且所用原料以及副产物均环保无毒，值得推广。

【技术实现步骤摘要】
一种高含量银耳多糖的制备方法
本专利技术涉及植物的提取制备领域，具体的涉及一种高含量银耳多糖的制备方法。
技术介绍
银耳，是有隔担子菌亚纲银耳科银耳的子实体，又称白木耳，雪耳等。属于真菌类银耳科银耳属，有“菌中之冠”的美称，在我国的种植较为普遍。银耳多糖是从银耳子实体或孢子中提取出来的一种活性多糖。国内外大量研究证明，银耳多糖具有优异的提高人体免疫机能、抗病毒、抗肿瘤、抗溃疡、降血脂、降血糖、降胆固醇等生理作用，而且银耳多糖具有极强的保湿性能和增稠稳定性，其作为天然保湿剂应用在日化领域受到广泛的重视。因此合理利用银耳资源和研究银耳多糖的提取纯化工艺具有重要意义。中国专利(申请号为201410796766.5)一种银耳胞内多糖分离、纯化的方法，通过酶解、超声提取、浓缩、醇沉得到银耳多糖的粗提物；银耳多糖的粗提物再经过超声溶解、D101树脂柱层析、DEAE纤维素树脂进行分离、浓缩、干燥得到银耳多糖。该方法由于酶法提取银耳多糖对反应过程要求严格，操作技术要求较高，且此方法工艺步骤较多对设备的要求高，造成生产成本高，因此不适应大量生产。中国专利(申请号为201510336334.0)银耳多糖的制备方法，该专利技术通过超微粉碎、超声提取、醇沉、Sevage试剂去蛋白、双氧水法脱色、得到银耳多糖。该方法使用了大量的各种有机溶剂，不但生产成本高且氯仿毒性较大，也不适应大量生产。一种工艺简单，环保低成本适用于大量生产的银耳多糖的制备方法的研究值得探讨。
技术实现思路
专利技术目的：为了克服现有技术中存在的银耳多糖的制备方法成本高、工艺复杂，使用原料不环保不适用于大批量的工业生产的问题，本专利技术提出了一种工艺简单，环保，成本低，可适用于生产放大，易于推广具有很强的实用性的高含量银耳多糖的制备方法。技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：一种高含量银耳多糖的制备方法，包括如下步骤：(1)取待提取的银耳放入提取釜中，加入水加热回流进行2-4次的提取，每次加热回流提取的时间为1-3h,提取液过滤，合并多次提取液，备用；其中银耳的质量与水的体积比为1:50-1:200；(2)取步骤(1)得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤(1)中银耳质量的2-6倍；(3)取步骤(2)得到的洗脱液上2号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤(1)中银耳质量的2-6倍；(4)取步骤(3)的洗脱液在60-78℃减压浓缩后加入步骤(1)中银耳质量6-18体积的95％的乙醇，浓缩体积为步骤(1)中银耳质量的2-6倍；静置6-24h，过滤，在60-78℃下的温度下减压干燥，粉碎后得到所需的银耳多糖。更为优选的，所述步骤(1)中提取次数为3次，每次加热回流提取的时间为2h，银耳的质量与水的体积比为1:100。更为优选的，所述步骤(2)中1号大孔树脂型号为HPD-500、HPD-600、LX-11、LX-60中的一种。更进一步的，所述1号大孔树脂型号为LX-60。更为优选的，所述步骤(3)中2号大孔树脂型号为HPD-100、LX-10、LX-8中的一种。更进一步的，所述2号大孔树脂型号为LX-10。更为优选的，所述步骤(2)、(3)中洗脱用纯化水的体积用量为步骤(1)中银耳的质量的4倍。更为优选的，所述步骤(2)、(3)中多糖的检测采用α-萘酚反应。更为优选的，所述步骤(4)中减压浓缩和减压干燥的温度为70℃，95％的乙醇的体积用量为步骤(1)中银耳的质量的12倍。更为优选的，所述步骤(4)中粉碎的目数为60-100目。有益效果：本专利技术提供的一种高含量银耳多糖的制备方法，首先采用加热回流提取后经过两次大孔树脂的纯化步骤，然后依次经过减压浓缩、95％的乙醇醇沉、静置、过滤、减压干燥、最后粉碎的工艺流程得到银耳多糖的提取物，两种不同的大孔吸附树脂联用方法有效的去除了银耳多糖中的色素、蛋白质及其他杂质，从而得到高含量的银耳多糖；且大孔吸附树脂柱可以反复使用，既合理利用了资源又节约了成本，因此本方法易于推广，具有很强的实用性，适用于生产放大，且所用原料以及副产物均环保无毒，值得推广。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细说明：试剂与药品：以下实施例中所用银耳购于湖北，含量测定用对照葡萄糖标准品，购自阿拉丁，所用95％的乙醇为分析纯，水为纯化水，其他溶剂为分析纯，所用辅料为药用级。实施例1：一种高含量银耳多糖的制备方法，包括如下步骤：(1)取市售银耳1kg放入提取釜中，加入100L的纯化水，加热回流进行2次的提取，每次加热回流提取的时间为2h,两次的提取液过滤后混合均匀合并，备用；(2)取步骤(1)得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱LX-60，上柱完成后，用4L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多糖的检测采用α-萘酚反应；(3)取步骤(2)得到的洗脱液上2号大孔树脂柱LX-10，上柱完成后，用4L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多糖的检测采用α-萘酚反应；(4)取步骤(3)的洗脱液在70℃下减压浓缩至4L，慢慢搅拌加入12L的95％的乙醇，静置12h，过滤，在70℃下的温度下减压干燥，粉碎至80目后得到UV含量为97.8％的银耳多糖203.5g，其中多糖含量的测定采用硫酸-苯酚法。其中，步骤(2)和(3)的顺序可以颠倒进行。实施例2：一种高含量银耳多糖的制备方法，包括如下步骤：(1)取市售银耳1kg放入提取釜中，加入100L的纯化水，加热回流进行2次的提取，每次加热回流提取的时间为2h,两次的提取液过滤后混合均匀合并，备用；(2)取步骤(1)得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱LX-60，上柱完成后，用4L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多糖的检测采用α-萘酚反应；(3)取步骤(2)得到的洗脱液上2号大孔树脂柱LX-10，上柱完成后，用4L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多糖的检测采用α-萘酚反应；(4)取步骤(3)的洗脱液在70℃下减压浓缩至8L，慢慢搅拌加入24L的95％的乙醇，静置24h，过滤，在70℃下的温度下减压干燥，粉碎至60目后得到UV含量为92.1％的银耳多糖387.5g；其中多糖含量的测定采用硫酸-苯酚法。其中，步骤(2)和(3)的顺序可以颠倒进行。实施例3：一种高含量银耳多糖的制备方法，包括如下步骤：(1)取市售银耳0.5kg放入提取釜中，加入100L的纯化水，加热回流进行4次的提取，每次加热回流提取的时间为3h,两次的提取液过滤后混合均匀合并，备用；(2)取步骤(1)得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱HPD-500，上柱完成后，用3L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多糖的检测采用α-萘酚反应；(3)取步骤(2)得到的洗脱液上2号大孔树脂柱HPD-100，上柱完成后，用3L的纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高含量银耳多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）取待提取的银耳放入提取釜中，加入水加热回流进行2‑4次的提取，每次加热回流提取的时间为1‑3h,提取液过滤，合并多次提取液，备用；其中银耳的质量与水的体积比为1:50‑1:200；（2）取步骤（1）得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤（1）中银耳质量的2‑6倍；（3）取步骤（2）得到的洗脱液上2号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤（1）中银耳质量的2‑6倍；（4）取步骤（3）的洗脱液在60‑78℃减压浓缩后加入步骤（1）中银耳质量6‑18体积的95%的乙醇，浓缩体积为步骤（1）中银耳质量的2‑6倍；静置6‑24h，过滤，在60‑78℃下的温度下减压干燥，粉碎后得到所需的银耳多糖。

【技术特征摘要】
1.一种高含量银耳多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）取待提取的银耳放入提取釜中，加入水加热回流进行2-4次的提取，每次加热回流提取的时间为1-3h,提取液过滤，合并多次提取液，备用；其中银耳的质量与水的体积比为1:50-1:200；（2）取步骤（1）得到的提取液的混合物上1号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤（1）中银耳质量的2-6倍；所述1号大孔树脂型号为HPD-500、HPD-600、LX-11、LX-60中的一种；（3）取步骤（2）得到的洗脱液上2号大孔树脂柱，上柱完成后，用纯化水进行洗脱至流出液检测不到多糖，停止洗脱，收集洗脱液，备用；其中洗脱用纯化水的体积用量为步骤（1）中银耳质量的2-6倍；所述2号大孔树脂型号为HPD-100、LX-10、LX-8中的一种。（4）取步骤（3）的洗脱液在60-78℃减压浓缩后加入步骤（1）中银耳质量6-18体积的95%的乙醇，浓缩体积为步骤（1）中银耳质量的2-6倍；静置6-24h，过...

【专利技术属性】
技术研发人员：金显友，易铭，钟慧，魏元刚，杨永安，
申请(专利权)人：江苏耐雀生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32