【技术实现步骤摘要】
一种石斛多糖含量的测定方法及其应用
本专利技术属于中药及其提取物的化学分析
，特别涉及一种石斛多糖含量的测定方法及其应用。
技术介绍
多糖(polysaccharide)由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质，其相对分子质量从几万到几千万不等。多糖在自然界分布极广，亦很重要，有的是构成动植物骨架结构的组成成分，如纤维素；有的是作为动植物储藏的养分，如糖原和淀粉；有的具有特殊的生物活性，像人体中的肝素有抗凝血作用，肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。近年来多糖研究越来越深入，逐渐成为生命科学研究的前沿。多糖的测定方法有很多种，如斐林法、蒽酮_硫酸法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、酶法和苯酚_硫酸法等，各测定方法有各自的优点和缺点，如毛细管电泳法和高效液相色谱法精密度较高但需要多糖纯品，对测定样品的要求高，成本较高；蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法等测定多糖时蛋白的干扰比较明显。由于苯酚-硫酸法操作简便，精确度较好， 是目前多糖测定中较常使用的一种方法。石斛是我国名贵的中药材，最早记载于《神农本草经》，被列为上品，具有滋阴清热、生津益胃、 强身...
【技术保护点】
一种石斛多糖含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤：标准曲线的制备：分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、2.0ml的0.05mg·mL？1的葡萄糖标准液，各加蒸馏水补至2.0ml，然后各加6wt%重蒸苯酚1.0ml，摇匀后加入98wt%浓硫酸5.0ml，摇匀，静置5min后置沸水浴中加热20min，冷却至室温，于490nm处测定吸光度；以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程；换算因子的测定：取50μg·ml？1石斛精多糖溶液0.05～1ml，加蒸馏水补足至2.0ml，各加6wt%重蒸苯酚溶液1.0ml，摇匀后...
【技术特征摘要】
1.一种石斛多糖含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤 标准曲线的制备分别吸取 0,0. 2,0. 4,0. 6,0. 8、I. O、I. 2、I. 4、I. 6,2. Oml 的O. 05mg · ml/1的葡萄糖标准液,各加蒸懼水补至2. Oml,然后各加6wt%重蒸苯酹I. Oml,摇匀后加入98wt%浓硫酸5. 0ml，摇匀，静置5min后置沸水浴中加热20min，冷却至室温，于490nm处测定吸光度；以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程； 换算因子的测定取50μ g -mr1石斛精多糖溶液O. 05 1ml，加蒸馏水补足至2. Oml,各加6wt%重蒸苯酹溶液I. Oml,摇勻后加入98wt%浓硫酸5. Oml,摇勻,静置5min后置沸水浴中加热20min，冷却至室温，于490nm处测定吸光度，根据回归方程计算石斛精多糖溶液的浓度；计算换算因子f :f = Cs/C，其中，Cs为石斛精多糖溶液的实际浓度，C为回归方程计算石斛精多糖溶液的浓度； 石斛样品溶液中石斛多糖含量的测定吸取石斛样品溶液O. 05 1ml，各加蒸馏水补至2. Oml，然后各加6wt%重蒸苯酌· I. Oml,摇勻后加入98wt%浓硫酸5. Oml,摇勻，静置5min后置沸水浴中加热20min,冷却至室温，于490nm处测定吸光度，由回归方程计算石斛样品溶液中石斛多糖的浓度，由下述公式计算石斛样品溶液中石斛多糖含量X :X=fXC，XDX100%/ff ; 式中f-换算因子，C’ -由回归方程得到的石斛样品溶液中的葡萄糖含量，D-石斛干燥粉末测定中的稀释倍数，W-石斛干燥粉末的质量。2.根据权利要求I所述的石斛多糖含量的测定方法，其特征在于所述的石斛样品溶液采用以下方法进行制备将石斛粉末按质量体积比lg/100 150ml加入80wt%乙醇中，80 90°C回流提取2 3次，每次O. 5 lh，抽滤后取滤渣；往滤渣中按质量体积比lg/100 150ml加入蒸懼水,80 90°C回流提取2 3次，每次O. 5 Ih,抽滤后取滤液，合并滤液，用蒸馏水定容至50mL，摇匀，得到石斛样品溶液。3.根据权利要求I所述的石斛多糖含量的测定方法，其特征在于所述的石斛精多糖采用以下方法进行制备 取石斛粉末，按质量体积比lg/ΙΟ 15ml加入石油醚，80 90°C回流提取2 3次，每次O. 5 lh，抽滤后取滤渣A ;按质量体积比lg/ΙΟ 1...
【专利技术属性】
技术研发人员：王再花，朱根发，叶庆生，章金辉，操君喜，孙延东，
申请(专利权)人：广东省农业科学院花卉研究所，华南师范大学，
类型：发明
国别省市：
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