多肽、包含该多肽的检测器件和包含该器件的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及多肽、包含多肽的检测器件、以及包含检测器件的诊断试剂盒。将本发明专利技术应用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断，能够取得令人满意的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测领域，特别是可用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断的多肽、包含该多肽的检测器件的检测试剂盒。
技术介绍
肠道病毒71型IgM属于肠道病毒属A型，肠道病毒一般是以数字命名的，排列顺序代表着其发现的先后次序。按顺序，这种病毒被命名为肠道病毒71型（Humanenterovirus71），简称EV71，是引起婴幼儿手足口病（hand-footandmouthdisease；HFMD）主要病原体之一。人类肠病毒71型于1969年首次从加利福尼亚患有中枢神经系统疾病的婴儿粪便标本中分离出来的。EV71主要引起手足口病，还可引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹等多种神经系统疾病。手足口病和中枢神经系统感染是EV71感染而引起的两大常见临床症状。病毒从咽部或肠道侵入，在局部黏膜或淋巴组织中繁殖，并由局部排出，此时可引起局部症状。继而病毒又侵入局部淋巴结，并由此进入血液循环导致第一次病毒血症。病毒经血循环侵入网状内皮组织、深层淋巴结、肝、脾、骨髓等处大量繁殖并由此进入血液循环，引起第二次病毒血症。病毒可随血流进入全身各器官，如中枢神经系统、皮肤黏膜、心脏等处，进一步繁殖并引起病变。易感者感染EV71后，出现血管变态反应和组织炎症病变。当病毒累及中枢神经系统时，组织炎症较神经毒性作用更加强烈，中枢神经系统小血管内皮最易受到损害。细胞融合、血管炎性变、血栓形成可导致缺血和梗死。在脊髓索、脑干、间脑、大脑和小脑的局部组织中，除嗜神经性作用外，还存在广泛的血管周围和实质细胞炎症道病毒71型IgM危害极大，目前急需简便快捷准确的仪器是实现对其的快速检测。市场上检测肠道病毒71型（IgM）多采用酶联免疫检测试剂盒，但试剂盒检测虽然检出限较低（0.15mg/L），但是检测时间长，不适合现场测定，中国专利申请号为201010171862.2的专利技术专利申请，提出一种肠道病毒71型抗体（IgM）诊断试剂盒（酶联免疫法），该试剂盒检测肠道病毒71型抗体（IgM）前、后都需要做必要的仪器清洗及保养工作，检测时间长，并且要求本领域专业技术人员来操作。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种多肽、包含该多肽的检测器件、以及包含该检测器件的检测试剂盒，它们对肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断有用的。本专利技术目的在于提供该多肽在制备可用于肠道病毒71型诊断的检测试剂盒中的用途。即，本专利技术包含下述技术方案：1.一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：NKEPAVLHSRDPRLEVDFEQ。2.一种检测器件，其包括：固体载体，以及连接于该固体载体上的权利要求1所述的多肽。3.根据权利要求2所述的检测器件，其中，所述固体载体是SJ改性硅胶。4.根据权利要求2所述的检测器件，其用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断。5.一种检测试剂盒，其包括权利要求2~4中任一项所述的检测器件。6.根据权利要求5所述的检测试剂盒，其用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断。7.权利要求1所述的多肽在制备检测试剂盒中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述检测试剂盒用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断。9.根据权利要求7所述的用途，其中，所述检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的检测器件。将本专利技术应用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断，能够取得令人满意的效果。附图说明图1对SJ改性硅胶（iPDMS薄膜）的制作过程进行说明的示意图。图2说明多肽微阵列点样模式的示意图。图3是显示对健康正常人或非肠道病毒71型感染病人血清进行检测的结果的照片。图4是显示对肠道病毒71型感染病人血清进行检测的结果的照片。专利技术的具体实施方式本专利技术的多肽在另一个方面中，本专利技术提供对对肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断有用的多肽，由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列构成，即：NKEPAVLHSRDPRLEVDFEQ。如实施例所示，本专利技术的多肽对肠道病毒71型感染病人的血清呈阳性反应，而对健康正常人或非肠道病毒71型感染病人血清呈阴性反应。因此，本专利技术的多肽作为肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断工具是有用的。本专利技术的多肽可以用于制造可用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断的检测器件（例如下述的本专利技术的检测器件）或检测试剂盒（例如下述的本专利技术的检测试剂盒）。本专利技术的多肽可以适宜采用(1)化学合成方法、或(2)酶反应合成方法等公知方法来获得，但不限于此，其中化学合成更为简便。在化学合成本专利技术的多肽情况下，通过使用肽合成仪合成或者半合成该多肽来进行。作为化学合成方法，可以列举出例如肽固相合成法等。这样合成的肽可以采用常规手段例如离子交换色谱、反相高效液体色谱、亲和色谱等进行纯化。这样的肽固相合成方法以及其后的肽纯化都是本
公知的。此外，在通过酶反应生产本专利技术的多肽的情况下，可以采用例如国际公开小册子WO2004/011653号所述的方法。即，可以这样来生产：将一方的氨基酸或二肽的羧基末端被酯化或酰胺化而得到的氨基酸或二肽、与氨基酸处于游离状态的氨基酸(例如羧基保护的氨基酸)在肽合成酶的存在下进行反应，生成的二肽或三肽。作为肽合成酶，可以列举出：具有生成肽的能力的微生物的培养物、由该培养物分离的微生物菌体、或该微生物的菌体处理物、或该微生物来源的肽合成酶。而且，除了上述的酶方法、化学合成方法以外，还可以采用例如基因工程方法来生产本专利技术的多肽。本专利技术的多肽的氨基酸序列可以采用常规的方法进行分析和确认，例如可以利用质谱、色谱等方法来进行分析和确认。本专利技术的检测器件在另一方面中，本专利技术还提供一种检测器件(本专利技术的检测器件)，其包括固体载体、以及连接于该固体载体上的本专利技术的蛋白质或本专利技术的多肽。所述检测器件对于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断是有用的。在本专利技术中，对固体载体没有特殊限制，只要是作为固体或不溶性材料(例如是可以通过过滤、沉淀、磁性分离等从反应混合物中分离的材料)的载体即可。构成固体载体的材料包括但不限于：硅胶(聚二甲基硅氧烷，PDMS)、纤维素、特氟隆TM、硝基纤维素、琼脂糖、葡聚糖、壳聚糖、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚丙烯、尼龙、聚偏二氟乙烯、胶乳、二氧化硅、玻璃、玻璃纤维、金、铂、银、铜、铁、不锈钢、铁氧体、硅晶片、聚乙烯、聚乙烯亚胺、聚乳酸、树脂、多糖类、蛋白(白蛋白等)、碳或它们的组合等。固体载体的形状包括但不要限于：珠子、磁珠、薄膜、微细管、滤膜、板、微量板、碳纳米管、传感器芯片等。正如本
公知的那样，薄膜或板等平坦的固体载体上可以设置凹坑、沟槽、滤膜底部等。在本专利技术中，磁珠可以具有约25nm~约1mm范围的球体直径。在优选的实施方式中，磁珠具有约50nm~约10μm范围的直径。磁珠的尺寸可以根据特定的用途来进行选择。在本专利技术中，由Sepharose等高交本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，即：NKEPAVLHSRDPRLEVDFEQ。

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：NKEPAVLHSRDPRLEVDFEQ。
2.一种检测器件，其包括：
固体载体，以及
连接于该固体载体上的权利要求1所述的多肽。
3.根据权利要求2所述的检测器件，其中，所述固体载体是SJ改性硅胶。
4.根据权利要求2所述的检测器件，其用于肠道病毒71型的早期筛查和临床辅助诊断。
5.一种检测试剂盒，其包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：章为江，
申请(专利权)人：苏州艾比拓生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32