一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法技术

技术编号:13143867 阅读:160 留言:0更新日期:2016-04-07 03:47
本发明专利技术公开一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,该方法包括以浓度为0.04M的醋酸钡溶液为缓冲液,配制琼脂糖凝胶,每个点样孔上样,将凝胶置于0.04M醋酸钡溶液缓冲液中,在缓冲液上层加入少许石油醚,封住气液界面;将整个电泳槽体系置于冷室中电泳,电泳完毕,轻压脱水;将0.2%的甲苯胺蓝溶解在乙醇:水:乙酸形成的溶剂中,配制染色液,将凝胶悬浮在染色液中,然后用乙醇:水:乙酸混合成的溶液洗涤。本发明专利技术通过在0.04M醋酸钡缓冲液中进行一次琼脂糖凝胶电泳,通过对电泳液进行降温处理、降低电泳电压、延长电泳时间、石油醚封气液界面等方法,有效地将快速移动肝素与硫酸皮肤素分离。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药行业中肝素类抗凝血药物中粘多糖组分的分离领域,尤其涉及。
技术介绍
粘多糖类化合物是一类重要的生物大分子,此类大分子化合物具有多种重要的生物学功能及药理活性,包括:抗凝、抗肿瘤、降血脂、抗血栓等。粘多糖中具有代表性的种类有肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素、硫酸软骨素等,各有不同的生物药理作用。粘多糖的结构类似,都为不同程度硫酸化、乙酰化的糖胺-糖醛酸二糖单位 重复组成的长链结构,每种粘多糖又是由分子量呈正态尚散分布的大小不同的分子组成,增加了分离分析的难度。目前,主要的分离分析方法有:HPLC法,电泳法、毛细管电泳法等。琼脂糖凝胶电泳作为生物学程领域最常用的技术,兼具“分子筛”与“电泳”双重作用,主要用于核酸的分离、鉴定、提纯。琼脂糖凝胶电泳也能用于分离、鉴定多糖类化合物,有文献显示,通过调整琼脂糖凝胶浓度、缓冲液等参数,可以通过电泳分离鉴定多种多糖类化合物。重复性好,设备要求低,具有较好的应用价值。
技术实现思路
本专利技术针对现有琼脂糖凝胶电泳分离粘多糖中存在的电泳时间长,条带弥散,需要两次电泳问题,提供了。本专利技术是这样实现的,,该快速分离快速本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于,该快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法包括:步骤一,以浓度为0.04M的醋酸钡溶液为缓冲液,配制胶浓度0.4%‑0.8%的琼脂糖凝胶,胶厚度在3‑5mm,梳齿之间距离在5mm;步骤二,每个点样孔上样量在5‑10微克;步骤三,将凝胶置于0.04M醋酸钡溶液缓冲液中,缓冲液顶部没过凝胶1‑2mm,然后在缓冲液上层加入石油醚,封住气液界面;步骤四,将整个电泳槽体系置于冷室中,电泳槽两端连接电泳仪电源,施以120V电压,电泳时间为2小时;步骤五,电泳完毕,将凝胶板取出,在Cetavlon浸透大于3小时,取出后以干燥滤纸铺盖于凝胶上,轻压脱水;步...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张在忠郭林李荣陈少鹏李玮涛
申请(专利权)人:东营天东制药有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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