本发明专利技术提供了特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体的可变区序列、其制备的抗体或抗体片段，以及使用该抗体制备的疫苗和试剂盒。本发明专利技术的药物组合物能有效预防和治疗猪流行性腹泻病毒感染。本发明专利技术的试剂盒能有效检测猪流行性腹泻病毒，灵敏度高，检测快速。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体，以及使用该单克隆抗体制备的药物 组合物、试剂盒等应用，属于生物医药领域。
技术介绍
猪流行性腹泻（porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒 (porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV)引起的一种肠道传染病，主要引起哺乳仔猪呕 吐、水样腹泻、脱水等症状，严重时可造成仔猪的死亡，死亡率能达到50 %-100 %。近年，自 2010年冬季，在我国的大部分地区爆发流行，之后相继在韩国、日本、台湾等地区也大范围 爆发此病。2013年上半年在北美地区也爆发此病，并迅速传播，给全球的养殖业造成了严重 的损失。 目前，检测猪流行性腹泻病毒的方法包括病毒分离鉴定和血清检查，但耗时过长； PCR方法虽然灵敏，但需昂贵的仪器和专业的操作人员。因而，现有技术中亟需研制一种简 单、快速、准确检测猪流行性腹泻病毒的产品。
技术实现思路
为了解决现有技术的不足，本专利技术提供了两个抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体， 以及含单克隆抗体的试剂盒、药物组合物及其应用。 本专利技术涉及一种特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体PEDV-McABl的可 变区序列，其中，1)重链可变区氨基酸序列为SEQIDNo.2所示的氨基酸序列或该序列经过 一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体;2)轻链可变区 氨基酸序列为SEQIDNo.4所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、 替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。 本专利技术还涉及具有上述可变区序列的抗体或其片段，所述抗体或其片段仍保持特 异性结合猪流行性腹泻病毒的能力。本专利技术还涉及一种特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体PEDV-MCAB2的 可变区序列，其中，1)重链可变区氨基酸序列为SEQIDNo.6所示的氨基酸序列或该序列经 过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体;2)轻链可变 区氨基酸序列为SEQIDNo.8所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删 除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。 本专利技术还涉及具有上述可变区序列的抗体或其片段，所述抗体或其片段仍保持特 异性结合猪流行性腹泻病毒的能力。 本专利技术还涉及一种药物组合物，其中，所述药物组合物包含免疫量的含有所述的 鼠单克隆抗体PEDV-McAB2的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，以及药学上可接受的载 体。 本专利技术还涉及所述药物组合物在制备预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒感染相关 疾病的药物中的应用。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的具有鼠单克隆抗体 PEDV-McAB1的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，和/或有效量的具有鼠单克隆抗体 PEDV-McAB2的可变区序列的所述的抗体或所述抗体的片段，以及用于对猪流行性腹泻病毒 进行抗原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的具有鼠单克隆抗体 PEDV-McAB1的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，和/或有效量的具有鼠单克隆抗体 PEDV-McAB2的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，以及用于对猪流行性腹泻病毒进行抗 原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照，其中，所述用于对猪流行性腹泻病 毒进行抗原抗体反应进行检测的检测试剂为与所述抗体或所述抗体的片段结合的酶标二 抗以及与所述标记的酶产生颜色反应的底物，所述酶标二抗包括酶标羊抗鼠多抗、酶标羊 抗鼠二抗。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的所述单克隆抗体PEDV-McABl、有效量的所述单克隆抗体PEDV-McAB2，以及用于对猪流行性腹泻病毒进行抗原抗体 反应进行检测的检测试剂;其中，所述试剂盒包括胶体金检测试纸条，所述胶体金检测试纸 条包括底板，所述底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有 滤纸、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜与金标垫接触或与样品 垫、金标垫接触使得抗原与所述单克隆抗体PEDV-McAB2的结合体能在其上向底板第二端迀 移;所述金标垫上含有胶体金标记的所述单克隆抗体PEDV-McAB2,所述硝酸纤维素膜上近 所述底板第二端的位置包括一条检测线和一条质控线，所述检测线上固定化有所述单克隆 抗体PEDV-McABl，所述质控线上固定化有羊抗鼠二抗或羊抗鼠多抗。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的所述单克隆抗体PEDV-McABl、有效量的所述单克隆抗体PEDV-McAB2，以及用于对猪流行性腹泻病毒进行抗原抗体 反应进行检测的检测试剂;其中，所述试剂盒包括缓冲液供应单元和酶免疫层析检测试纸 条;所述缓冲液供应单元用于将缓冲液供给所述酶免疫层析检测试纸条;所述酶免疫层析 检测试纸条包括硝酸纤维素膜（1)，所述酶免疫层析检测试纸条在纵向上依次包括底物供 应区、样品供应区、检测区；所述底物供应区包括底物垫(3)，其上吸附有干燥的酶底物，所 述底物垫(3)与硝酸纤维素膜（1)接触，所述酶底物溶于缓冲液中并在硝酸纤维素膜（1)上 向距所述缓冲液供应单元的远端迀移;所述样品供应区包括酶标垫(2)，其上吸附有酶标记 的所述单克隆抗体PEDV-McAB2,所述酶底物能与所述单克隆抗体PEDV-McAB2上标记的酶产 生显色反应，所述酶标垫（2)与硝酸纤维素膜（1)接触，所述单克隆抗体PEDV-McAB2溶于缓 冲液中并在硝酸纤维素膜（1)上向距所述缓冲液供应单元的远端迀移；以及所述检测区固 定化有所述单克隆抗体PEDV-McABl;其中，所述缓冲液供应单元包括展开液垫(5)、底物缓 冲液槽(8)、底物缓冲液(9)和缓冲液按钮，所述底物缓冲液(9)放置于底物缓冲液槽(8)中， 所述缓冲液按钮位于底物缓冲液槽(8)的上方，按下可将所述展开液垫(5)浸入缓冲液(9) 中；所述检测区包括检测线(6)、质控线(7)，其中，所述质控线(7)较检测线(6)更远离所述 样品供应区，在所述检测线(6)上固定化有所述单克隆抗体PEDV-McABl，在所述质控线(7) 上固定化有羊抗鼠二抗或羊抗鼠多抗，且吸附在酶标垫(2)上的酶标记的所述单克隆抗体 PEDV-McAB2对于固定在检测线(6)上的所述单克隆抗体PEDV-McAB1而言是过量的；所述硝 酸纤维素膜(1)全段粘附在所述支撑物（10)上，支撑物（10)连接所述缓冲液供应单元，底物 供应区，样品供应区，检测区以及吸水垫(4)，所述吸水垫(4)在距所述缓冲液供应单元的最 远端；以及检测样品（11)加入的位置为所述酶标垫(2)的位置。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括包被所述单克隆抗体PEDV-McABl的ELISA板、含酶标记所述单克隆抗体PEDV-McAB2的反应液、对猪流行性腹泻病毒进 行抗原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照。 本专利技术还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括包被猪流行性腹泻病毒抗原的 ELISA板、含所述单克隆抗体的反应液、洗涤液、稀释液、底物显色液、终止液、阴性对照、阳 性对照;其中，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体PEDV‑McAB1的可变区序列，其中，1)重链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.2所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体；2)轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.4所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：田克恭，张云静，
申请(专利权)人：洛阳普莱柯万泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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