一种具有抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物及其制备方法，涉及一种天然产物齐墩果酸的结构改造方法，该方法通过天然产物齐墩果酸的化学结构改造及修饰，得到一系列具有生物活性的结构类似物。经过药理实验证明，该齐墩果酸化学修饰物对人体宫颈癌Hela细胞，人肝癌HepG2细胞和胃癌BGC-823细胞具有较好的抑制作用，且优于母体化合物齐墩果酸。所述齐墩果酸化学修饰物包括以下三类。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种天然产物齐墩果酸的结构改造方法，特别是涉及一种具有抗肿瘤 活性的齐墩果酸化学修饰物及其制备方法。
技术介绍
齐墩果酸（OleanolicAcid，0A)，又名庆四素，为五环三萜类化合物，以游离或结 合成苷的形式广泛存在于白花蛇舌草、山楂、丁香、大枣、女贞子、枇杷叶、木及夏枯草等植 物中。化学名为（30)-3-Hydroxyolean-12-en-28_oicacid，纯品为白色结晶性粉末，无 臭、无味。分子式为：C3QH4S03,分子量：456. 71。熔点：308°C~310°C，20D+68° ~+78° (C=0. 15,氯仿)。不溶于水，可溶于乙醇、氯仿、丙酮。近年来研究发现，齐墩果酸具有广泛 的生物活性，包括降糖降脂作用，抗肿瘤，抗病毒及微生物，抗衰老，抗溃疡，消炎，对免疫系 统的影响，保肝护肝等。 齐墩果酸的化学结构式：近年来，齐墩果酸对肿瘤的抑制和杀伤效应日益受到重视。齐墩果酸能够抑制肿瘤的 形成，阻碍肿瘤诱发和诱导肿瘤细胞分化，且能有效地抑制血管发生肿瘤细胞的侵害和转 移。对肿瘤细胞表现出较强的细胞毒性，如人肺纤维原细胞WI-38、人肝癌细胞株Η印G2、结 肠癌HCT15细胞株、卵巢癌Η0-8910细胞株、乳腺癌MCF-7细胞株等。对恶性血液病细胞株 Κ562、ΗΙ，60、Jurkat等的增殖活性也同样具有抑制作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物及其制备方 法，该方法以齐墩果酸为先导化合物，设计出一系列齐墩果酸化学修饰物，该类化合物对人 体宫颈癌Hela细胞，人肝癌Η印G2细胞和胃癌BGC-823细胞具有较好的抑制活性。 本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的： 一种具有抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物，主要对齐墩果酸Α环，C环的结构改造， 以及对C-3位和C-28位的化学修饰，得到齐墩果酸酯类或酰胺类化合物。所述齐墩果酸化 学修饰物包括以下三类： (1)在齐墩果酸结构的基础上进行修饰，在C-3位引入氢，烷氧基，C-12, 13位引入双羟 基或烷氧基，C-28位用烷氧基，羟基，胺基取代，得到一系列化合物。化合物结构如下表所 示： 在齐墩果酸结构的基础上进行修饰，将A环C-3位修饰为3-肟基或3-肉桂酰氧亚氨基，同 时在C-28位引入酯基或酰胺基，得到一系列化合物，化合物结构如下表所示：在齐墩果酸结构的基础上进行修饰，将A环扩环为七元内酰胺环，C-28位羧基引入不同的 烷氧基。得到一系列化合物，化合物结构如下表所示：一种具有抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物制备方法，所述方法包括以下步骤： (1)齐墩果酸C-12位双键被间氯过氧苯甲酸氧化，生成环氧化合物，在酸性条件下开 环得到二羟基化合物。最终制得3β，12α，13β-二羟基-齐域果烧型_28_駿酸（0A_1)。 (2)0Α_1再与相应的卤代烷和碳酸钾溶解于DMF中，反应生成3β，12α，13β-三 羟基-齐墩果烷型-28-羧酸酯类化合物Ii~I2。 (3)0A_1与乙酸酐在吡啶催化下，3, 12位羟基被乙酰化，生成3β，12α-二乙酰氧 基-13β-羟基-齐域果烧型_28_駿酸（0Α-2)。 (4) 0Α-2与草酰氯反应后，与相应胺反应生成3β，12α-二乙酰氧基-13β-羟 基-齐墩果烷型-28-酰胺类目标化合物13~14。 (5 )齐墩果酸和琼斯试剂反应得3-氧代齐墩果酸（0Α-3 )。 (6) 0Α-3溶于适量吡啶中，与盐酸羟按反应得到3-肟基-齐墩果烷 型-12-烯-28-羧酸（0Α-4)。 (7)0Α_4与相应的卤代烧按照步骤（2)，得到3_Η亏基-齐域果烧型_12-稀-28_駿 酸酯类目标化合物ΙΙΗΙρ (8)肉桂酸与草酰氯反应得肉桂酰氯。 (9) 0Α-4与肉桂酰氯溶解于苯中，加入少量DMAP，反应得到3-肉桂酰氧亚氨 基-齐墩果烷型-12-烯-28-羧酸（0Α-5 )。再按照（2 )步骤与1，2-二溴乙烷反应得到3-肉 桂醜氧亚氛基_齐域果烧型_12-稀 -28_ (2_漠_1_)乙脂113。 (10) 0Α-5与相应的胺按照（4)步骤反应得到3-肉桂酰氧亚氨基-齐墩果烷 型-12-稀-28-酰胺类目标化合物11 4~117。 (11) 0Α-4在二氧六环中与二氯亚砜反应，经贝克曼重排成七元内酰胺衍生物 Α-同环-4-氮杂-3-氧代齐墩果烷型-12-烯-28-羧酸IIL。 (12)1?与相应的卤代烷按照步骤（2)，得到A-同环-4-氮杂-3-氧代齐墩果烷 型-12-烯-28-羧酸酯类目标化合物ΙΙΙ2~ΙΙΙ3。 本专利技术的优点与效果是： 本专利技术对天然产物齐墩果酸进行化学修饰，得到一系列齐墩果酸的结构类似物，经过 药理实验证明，它们对人体宫颈癌Hela细胞，人肝癌Η印G2细胞和胃癌BGC-823细胞具有 较好的抑制作用，且优于母体化合物齐墩果酸。【具体实施方式】 下面结合实例，对本专利技术做进一步详述。 1.女贞子的乙醇提取浸膏以石油醚、1%氢氧化钠和水洗至洗出液无色，无水乙醇 加热溶解，活性炭脱色，经凝析分离、纯化精制得白色晶体齐墩果酸（0Α)。 2.齐墩果酸的C-12位双键被间氯过氧苯甲酸氧化，生成环氧化合物，在酸性条 件下开环，最后得到3β，12α，13β-三羟基-齐墩果烷型-28-羧酸（0Α-1)，在0Α-1合 成线路的基础上，C-28羧酸与相应的卤代烷在碳酸钾碱性条件下，溶解于DMF中，得到 3β，12α，13β-三羟基-齐墩果烷型-28-羧酸酯类化合物Ii~I2。 其中：r2为 _0〇1(〇13)2和-och2ch(ch3)2。 0A-1与乙酸酐在吡啶催化下，3, 12位羟基被乙酰化，得到3β，12α-二乙酰氧 基-13β-羟基-齐域果烧型_28_駿酸（0Α_2)，在0Α_2合成线路的基础上与草醜氣反应得 到酰氯后，再与相应胺反应得到目标化合物13~1 4。 肉桂酸与草酰氯反应，制得肉桂酰氯。0Α-4与肉桂酰氯溶解于苯中，加入少量 DMAP，反应得到3-肉桂酰氧亚氨基-齐墩果烷型-12-烯-28-羧酸（0Α-5)。再与1，2-二 溴乙烷在碳酸钾碱性条件下，溶解于DMF中，反应得到目标化合物113。 0Α-5与草酰氯反应得到酰氯后，再与相应胺反应得到目标化合物114~117。 0Α-4在二氧六环中与二氯亚砜反应，经贝克曼重排成七元内酰胺衍生物Α-同 环-4-氮杂-3-氧代齐墩果烷型-12-烯-28-羧酸IIIpIIL与相应的卤代烷在碳酸钾碱 性条件下，溶解于DMF中，反应得到目标化合物III2~II13。 以吉非替尼和VP-16为阳性对照物，采取MTT法对齐墩果酸及其所合成的化合物 进行初步的体外抗肿瘤活性测试。研究表明部分化合物对人体宫颈癌Hela细胞，人肝癌 HepG2细胞和胃癌BGC-823细胞具有较好的抑制活性，且强于齐墩果酸。化合物结构以及体 外测试结果如下表所示。注；a.化合物浓度在10 5mol/L时测得的抑制率，b.IC5。表示半数有效抑制浓度。 下面结合实施例对本专利技术做进一步说明： 实施例1 3β，12α，13β-三羟基-齐墩果烷型-28-羧酸异丙酯（1〇的制备： 将起始原料〇A(l. 9mmol，0. 87g)与本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物，其特征在于，所述修饰物为对A环，C环的结构改造，以及对C‑3位和C‑28位的修饰，得到齐墩果酸酯类或酰胺类化合物；所述齐墩果酸化学修饰物包括以下三类：（1）在齐墩果酸结构的基础上进行修饰，C‑3位为氢，烷氧基，C‑12,13位引入双羟基或烷氧基，C‑28位用烷氧基，羟基，胺基取代，得到一系列化合物；化合物结构如下表所示：（2）在齐墩果酸结构的基础上，将A环C‑3位修饰为3‑肟基或3‑肉桂酰氧亚氨基，同时在C‑28位引入酯基或胺基，得到一系列化合物，结构如下表所示：（3）在齐墩果酸结构的基础上，将A环扩环为七元内酰胺环，C‑28位羧基引入不同的烷氧基；一种抗肿瘤活性的齐墩果酸化学修饰物制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）齐墩果酸C‑12位双键被间氯过氧苯甲酸氧化，生成环氧化合物，在酸性条件下开环得到二羟基化合物；最终制得3β,12α,13β‑三羟基‑齐墩果烷型‑28‑羧酸（OA‑1）；（2）OA‑1再与相应的卤代烷和碳酸钾溶解于DMF中，最后反应生成3β,12α,13β‑三羟基‑齐墩果烷型‑28‑羧酸酯类化合物I1~I2；（3）OA‑1与乙酸酐在吡啶催化下，3,12位羟基被乙酰化，最终生成3β,12α‑二乙酰氧基‑13β‑羟基‑齐墩果烷型‑28‑羧酸（OA‑2）；（4）OA‑2与草酰氯反应后，再与相应胺反应生成酰胺类目标化合物I3~I4；（5）齐墩果酸和琼斯试剂反应得到3‑氧代齐墩果酸（OA‑3）；（6） OA‑3溶于适量吡啶中，与盐酸羟按反应得到3‑肟基‑齐墩果烷型‑12‑烯‑28‑羧酸（OA‑4）；（7）OA‑4与相应的卤代烷按照步骤（2），得到目标化合物II1~II2；（8）肉桂酸与草酰氯反应，制得肉桂酰氯；（9）OA‑4与肉桂酰氯溶解于苯中，加入少量DMAP，反应得到3‑肉桂酰氧亚氨基‑齐墩果烷型‑12‑烯‑28‑羧酸（OA‑5）；再按照步骤（2）与1,2‑二溴乙烷反应得到3‑肉桂酰氧亚氨基‑齐墩果烷型‑12‑烯‑28‑（2‑溴‑1‑）乙脂II3；（10）OA‑5与相应的胺按照步骤（4）反应得到目标化合物II4~II7；（11）OA‑4在二氧六环中与二氯亚砜反应，经贝克曼重排成七元内酰胺衍生物A‑同环‑4‑氮杂‑3‑氧代齐墩果烷型‑12‑烯‑28‑羧酸III1；（12）III1与相应的卤代烷按照步骤（2），得到目标化合物III2~III3。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孟艳秋，刘立伟，刘冬莹，李丹，关赛，王晓晨，
申请(专利权)人：沈阳化工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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