本发明专利技术属于微生物技术领域，具体公开了一种潮间带微小杆菌及其应用。本发明专利技术菌株为潮间带微小杆菌（Exiguobacterium aestuarii）CAMT25481，所述菌株于2015年10月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），菌种保藏号为CGMCC NO. 11512。菌株CAMT25481对T-2毒素降解率最高可达73.80%，可有效降解T-2毒素，解决了饲料、原料虾受T-2毒素污染无法利用，并严重污染环境的重大问题，为确保原料虾深加工产品的食品安全性奠定基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物
，具体涉及。
技术介绍
T-2毒素是由多种镰刀菌（Fusarium)产生的一种倍半萜类真菌毒素，是单端孢霉 烯族毒素类中毒性最强的毒素，其毒性官能团为环氧环、（；-(；。间双键、羟基、乙酰氧基，毒 性主要表现为细胞毒性和免疫系统毒性，具有致畸、致癌、致突变的"三致"作用，对人畜健 康具有潜在的致癌威胁。T-2毒素普遍存在于水产饲料中，而对虾对真菌毒素具有很强的耐 受性，T-2毒素极易在对虾中蓄积。此外，T-2毒素纯品为白色针状晶体，难溶于水，易溶于 甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮等极性有机溶剂，性质稳定，有很强的耐热性和紫外线耐受 性。有研究报道T-2毒素常温放置6~7年或高温至200°C毒力仍无减弱，不容易清除。因 此，养殖对虾中T-2毒素的残留已经严重影响对虾产业链的健康发展。如何有效消解对虾 中残留T-2毒素的危害成为亟待解决的问题。目前常见的真菌毒素消除技术有物理法、化 学法和生物法。因物理和化学方法降毒不仅收效甚微，且增加不安全性，所以生物降解真菌 毒素具有诱人的前景。国内有程波财对抑制镰刀菌及降解两种真菌毒素的益生菌筛选和机 理进行了研究，施琦等人从对虾养殖环境中分离到的5株镰孢菌作为试验菌种，在其产毒 培养过程中分离出弯曲假单胞菌和尼泊尔葡萄球菌，对T-2毒素的降解率分别为90. 9%和 85. 5%。国外有研究者报道灌木酒神菊属（Baccharisspp.)能将T-2毒素氧化成3' -0H T-2或3'-OHHT-2,降低了其毒性。ChristopherYoung发现鸡肠道混合微生物可清除包 括T-2毒素在内的各种单端孢霉烯族化合物。传统发酵虾酱中存在大量有益的发酵微生 物，连鑫对传统虾酱中呈味优势菌进行分离鉴定，分离出一株产香季氏毕赤氏酵母（Pichia gilliermondii)，一株产蛋白酶黑曲霉（Aspergillusniger);孙业盈等人从猛子4下酱中分 离鉴定出一株中度嗜盐菌MKY20,经初步鉴定为枝芽孢杆菌属（Virgibacillus)中的盐脱 氮枝芽孢杆菌（Virgibacillushalodenitrificans);杜云建等人用米曲霉发酵生产4下酱； 袁三平利用乳酸菌发酵虾酱，不仅提高了虾酱的口味，而且降低了虾酱中亚硝酸盐的含量； 刘树青利用酵母菌并结合酶解发酵虾酱，不仅增加了虾酱产品的浓香度，更提高了产品的 营养成分；孟凌玉采用混合微生物发酵法改良虾头酶解产物风味和发酵工艺。但目前利用 虾酱中微生物降解T-2毒素没有报道。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供了 一种潮间带微小杆菌Exiguobacterium aestuariiCAMT25481，所述菌株具有降解T-2毒素的能力。 本专利技术的另一目的在于提供上述菌株的应用。 本专利技术的另一目的在于提供一种T-2毒素的降解剂。 本专利技术的上述目的是通过以下技术方案予以实现的。 一种潮间带微小杆菌（Exiguobacteriumaestuarii)CAMT25481，所述菌株于2015 年10月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)，菌种保藏号 为CGMCCNO. 11512。 所述菌株CAMT25481的16srRNA的序列结果如SEQIDNO: 1所示。 菌株CAMT25481的培养特性为：幼龄培养物为杆菌，老培养物为球状，1. 1~ 1. 2μmX1. 4~3. 2μm，革兰氏阳性；以周生鞭毛运动，兼性厌氧；在营养琼脂上菌落平坦， 淡橙色，色素不扩散；不生孢，不抗酸，耐盐；嗜碱，能在PH6. 5~11. 5生长；化能异养菌，发 酵代谢。 菌株CAMT25481的生化性质：产β-葡萄糖苷酸酶、α-葡萄糖苷酶、吡咯烷基芳 胺酶、酪氨酸芳胺酶、β-木糖苷酶、β-半乳糖苷酶，分解蔗糖、D-甘露醇，不产H2S。 本专利技术还提供上述潮间带微小杆菌（Exiguobacteriumaestuarii)CAMT25481在 降解T-2毒素中的应用。 优选地，所述菌株CAMT25481的浓度为105-107CFU/mL。 优选地，所述T-2毒素的浓度为15-25ng/mL。 本专利技术还提供一种T-2毒素的降解剂：所述降解剂中含有105-107CFU/mL所述菌株 CAMT25481。 与现有技术相比，本专利技术有益效果在于：菌株CAMT25481对T-2毒素降解率达 73. 80%，可有效降解T-2毒素，解决了饲料、原料虾受T-2毒素污染无法利用，并严重污染 环境的重大问题，为确保原料虾深加工产品的食品安全性奠定基础。【附图说明】 图1为菌株CAMT25481的系统发育树。【具体实施方式】 下面结合说明书附图和具体实施例对本专利技术做进一步详细说明，但实施例并不对 本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常 规试剂、方法和设备。 实施例1T-2毒素降解微生物的分离纯化 传统虾酱的制备：市售鲜虾经挑选后洗净沥干，打浆后加入虾重30%的食盐，搅 拌均匀后分成两部分，一部分作为鲜虾酱样品，另一部分浸没入发酵罐中进行自然发酵，日 晒夜露，每天搅拌2次，每次20min，发酵20d后作为发酵虾酱样品。 分别取上述鲜虾酱和发酵虾酱样品2. 00g，将两批样品均分为4组，分别加入0、 10、20、30ng的T-2毒素，在同等条件下进行微量发酵，在每组发酵ld、5d、10d、15d、20d后， 采用LC-MS/MS检测发酵液中的T-2毒素残留量。 T-2毒素的降解率（％ )=X100%。 选择T-2毒素降解率最大的发酵液为目标样本。10倍系列稀释目标发酵液，取 lmL3个合适的连续稀释度的样液倾注营养琼脂（NA)平板，每个稀释度做2个平行，37°C培 养48h。计算菌落数量，观察并记录各菌落形态特征。根据菌落形态、大小、颜色、形状等选 择有代表性的单菌落，编号后用三段划线法划线，将平板倒置于30±1°C培养箱中恒温培养 48h。革兰氏染色镜检观察，筛选出样品中的优势菌株为可能的降毒菌株，其中，将分离纯化 得到一株菌株编号为CAMT25481。保存待用。 实施例2分离的菌株的鉴定将实施例1分离得到的菌株CAMT25481用VITEK2革兰氏阴性细菌鉴定卡进行生 化特征分析，并参考《伯杰细菌鉴定手册》。用16SrRNA分析方法对其进行系统发育分析及 菌种鉴定。 菌株CAMT25481的培养特性为：幼龄培养物为杆菌，老培养物为球状，1. 1~ 1. 2μmX1. 4~3. 2μm，革兰氏阳性；以周生鞭毛运动，兼性厌氧；在营养琼脂上菌落平坦， 淡橙色，色素不扩散；不生孢，不抗酸，耐盐；嗜碱，能在PH6. 5~11. 5生长；化能异养菌，发 酵代谢。 菌株CAMT25481的生化性质：产β-葡萄糖苷酸酶、α-葡萄糖苷酶、吡咯烷基芳 胺酶、酪氨酸芳胺酶、β-木糖苷酶、β-半乳糖苷酶，分解蔗糖、D-甘露醇，不产H2S等；具 体见表1的鉴定结果。 表1菌株CAMT25481的生化特性 注：+为阳性，一为阴性 菌株CAMT25481的16srRNA测序结果如SEQIDN0:1所示。将获得的序列输入 GenBank进行BLAST比对，将相似性相近的序本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种潮间带微小杆菌（Exiguobacterium aestuarii）CAMT25481，其特征在于，所述菌株于2015年10月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），菌种保藏号为CGMCC NO. 11512。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王雅玲，孙力军，谢主兰，刘颖，黄正花，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
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