本发明专利技术公开了一种仿刺参用复合免疫增强剂，其组分及重量百分比为：葡萄糖酸锌1~5%，葡萄糖酸锰45~49%，蒲公英20~30%，苦参20~30%。其制备方法是将蒲公英和苦参两种中药成分加50倍水煎煮后，弃去药渣，再将葡萄糖酸锌和葡萄糖酸锰两种矿物元素溶于中药煎煮液中，然后按照0.1g/L的药量泼洒到养殖水体中。本发明专利技术的优点在于：配方科学合理，起效快，可显著改善仿刺参免疫力；成分明确，使用剂量小，对仿刺参无毒副作用，不会产生食品和环境安全问题；原料来源稳定，价格低廉，操作简单易行。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种海参用免疫增强剂，具体涉及一种仿刺参用矿物元素与中草药复合免疫增强剂，属于棘皮动物免疫学
技术介绍
仿刺参属于无脊椎动物棘皮动物门，是我国北方近海最主要的增养殖经济品种之一。近年来，由于种质退化、养殖密度增大和养殖环境恶化等原因，仿刺参在育苗、保苗和养殖过程中频发各类疾病，如烂胃病、烂边病、腐皮综合征、急性口围肿胀等，造成了严重的经济损失，影响了仿刺参养殖业的发展。抗生素类药物由于细菌抗药性、食品和环境安全等问题在水产动物病害防治应用上具有很大的局限性，因此，无公害免疫增强剂的使用成为水产动物病害防控最主要的手段之一。中草药作为水产养殖中常用的无公害免疫增强剂，在海参、海胆、对虾、鲍鱼等海水养殖动物中有广泛的应用。目前在仿刺参中，免疫增强剂配方主要是中草药复方或中草药提取物复方，通过投喂或养殖水体泼洒方式施药，可显著提高仿刺参的免疫力，但由于中药作用机制复杂，中草药复方或中草药提取物复方在改善仿刺参免疫力上也存在起效时间长的缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种对仿刺参无毒副作用、无公害、可快速持续提高仿刺参免疫力的矿物元素与中草药复合免疫增强剂，从而弥补现有技术的不足。本专利技术的技术解决方案是: 一种仿刺参用复合免疫增强剂，其特征在于包括以下重量百分比组分: 葡萄糖酸锌1~5%; 葡萄糖酸锰45~49%; 蒲公英 20~30% ； 苦参20~30%。进一步，各组分最佳重量百分比为: 葡萄糖酸锌2%; 葡萄糖酸锰46%; 蒲公英 25% ; 苦参27%。本专利技术中，蒲公英具有广谱抗菌和杀菌的功效，对某些真菌亦有抑制作用，同时还可显著激活机体内吞噬细胞的活力；苦参除具有抑制真菌、抗病毒、抗菌消炎的功效外，还具有免疫调节的作用。除中草药外，一些矿物元素在水产动物中也具有潜在的免疫增强剂应用价值。在矿物元素之中，锰和锌是包括人和仿刺参在内多种动物所必需的微量元素，可显著改善和提高一些免疫相关酶的活力。例如，锰对动物体内的超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、酚氧化酶和核酸聚合酶等具有显著的激活和促进作用；而锌在白细胞介素、超氧化物歧化酶、溶菌酶、ATP酶等的活力保持和促进中发挥重要作用。锰和锌的无机盐具有一定的生物毒性作用，而其葡萄糖酸盐无生物毒性作用，且作为保健品和食品添加剂等在人类生活中得到广泛使用，因此本专利技术选择葡萄糖酸锰和葡萄糖酸锌作为矿物元素锰和锌的来源。此外，矿物元素与中草药调节机体免疫力的机制不同，中草药一方面通过其含有的多糖类等成分经过复杂途径促进免疫细胞和免疫相关酶的活力，另一方面通过具有杀菌、抑菌活性的有机化合物直接抑制机体内病原体的生长和繁殖；而矿物元素主要作为酶催化的辅因子直接参与机体内免疫和代谢相关酶活力的维持和调节。因此，将适当的矿物元素与中草药配合使用，可通过多种途径共同作用，更快、更好的改善机体免疫力。本专利技术是一种用于提高仿刺参免疫力的矿物元素和中草药复合制剂，含有葡萄糖酸锌、和葡萄糖酸锰两种矿物成分以及蒲公英和苦参两种中药成分，其制备方法是将蒲公英和苦参两种中药成分加50倍水煎煮后，弃去药渣，再将葡萄糖酸锌和葡萄糖酸锰两种矿物成分溶于中药煎煮液中，然后按照0.lg/L的药量泼洒到养殖水体中。本专利技术的优点在于:配方科学合理，起效快，可显著改善仿刺参免疫力；成分明确，使用剂量小，对仿刺参无毒副作用，不会产生食品和环境安全问题；原料来源稳定，价格低廉，操作简单易行。【附图说明】图1为本专利技术的复合免疫增强剂对仿刺参酸性磷酸酶活力的影响。图2为本专利技术的复合免疫增强剂对仿刺参碱性磷酸酶活力的影响。图3为本专利技术的复合免疫增强剂对仿刺参超氧化物歧化酶活力的影响。图4为本专利技术的复合免疫增强剂对仿刺参溶菌酶活力的影响。图5为本专利技术的复合免疫增强剂对仿刺参酚氧化酶活力的影响。【具体实施方式】下面结合附图并通过具体实施例进一步说明本专利技术。以下各实施例中所用健康仿刺参共100只，取自辽宁省海洋水产科学研究院引育种中心，体重21±3.3 g，平均暂养于4个100L水槽(含80L海水，水温16 ~ 18°C，pH 8.2~ 8.5，盐度28)，水槽分别编号①、②、③、④。仿刺参暂养一周后添加复合免疫增强剂。实施例1: 取蒲公英20g、苦参30g，加2500g水煮沸半小时后，弃药渣，将葡萄糖酸锌lg、葡萄糖酸锰49g溶于煎煮液中，制备成免疫增强剂使用液。将上述制备的免疫增强剂以0.lg/L的量泼洒到水槽①的养殖水体中，随后暂养20天。期间每周换水1次并补充免疫增强剂至0.lg/L。添加免疫增强剂后第5天、10天和20天分别随机选取6只仿刺参，剖开腹腔获得体腔液。将同批6只仿刺参的体腔液混匀后离心，取上清，测定体腔液上清中免疫相关酶的活力。水槽④用作对照例，不添加免疫增强剂，其余操作同添加免疫增强剂。酸性磷酸酶活力和碱性磷酸酶活力采用“南京建成”磷酸苯二钠法试剂盒测定，超氧化物歧化酶活力采用“南京建成” WST-1法试剂盒测定，溶菌酶活力采用“南京建成”比浊法试剂盒测定，蛋白浓度采用“南京建成"BCA法试剂盒测定，具体测定步骤按照试剂盒说明书进行。酚氧化酶活力的测定方法如下:100 μ L仿刺参体腔液上清与2.0 mL 20 mmol/L左旋多巴溶液混匀后，在492 nm波长下测定吸光值，每隔3 min测一次，测10次J欄每分钟增加0.001定义为1个活力单位(U)。酶活检测实验重复3次，酶活力大小以比活力的形式表示，单位为U/mg蛋白。结果以平均值土标准差表示。数据使用SPSS 13.0进行单因素方差分析，差异性显著定义为P < 0.05，以表示。实施例2: 取蒲公英30g、苦参20g，加2500g水煮沸半小时后，弃药渣，将葡萄糖酸锌5g、葡萄糖酸锰45g溶于煎煮液中，制备成免疫增强剂使用液。将上述制备的免疫增强剂以0.lg/L的量泼洒到水槽②的养殖水体中，随后暂养20天。水槽④用作对照例，不添加免疫增强剂。换水、取样以及免疫酶活检测等操作同实施例1。实施例3: 取蒲公英25g、苦参27g，加2600g水煮沸半小时后，弃药渣，将葡萄糖酸锌2g、葡萄糖酸锰46g溶于煎煮液中，制备成免疫增强剂使用液。将上述制备的免疫增强剂以0.lg/L的量泼洒到水槽③的养殖水体中，随后暂养20天。水槽④用作对照例，不添加免疫增强剂。换水、取样以及免疫酶活检测等操作同实施例1。结果分析: 实施例1、2、3对仿刺参免疫相关酶活力的影响如图1~5所示:在使用免疫增强剂后的5天、10天、20天，仿刺参体腔液中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶和酚氧化酶的活力均显著高于对照例，其中，酸性磷酸酶和酚氧化酶的活力提升至对照例的2倍以上，并且实施例3对免疫相关酶的激活效果总体好于实施例1和实施例2。在选定的免疫指标中，酸性磷酸酶和碱性磷酸酶可通过水解作用直接杀死或抑制病原体，并能增强机体对病原的吞噬作用；超氧化物歧化酶能够清除机体免疫应答等过程中所产生的过量活性氧，保护机体免受过量活性氧的伤害，同时还能够催化超氧阴离子，产生具有很高杀菌活性的H202，直接参与杀菌、抑菌过程；溶菌酶可以破坏细菌的细胞壁，从而杀死入侵的病原菌；酚氧化酶通过酶促反应可以杀伤、抑制和本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种仿刺参用复合免疫增强剂，其特征在于包括以下重量百分比组分：葡萄糖酸锌 1~5%；葡萄糖酸锰 45~49%；蒲公英 20~30%；苦参 20~30%。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋经伟，董颖，高杉，关晓燕，周遵春，
申请(专利权)人：辽宁省海洋水产科学研究院，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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