一种刺参养殖用复合型合生元添加剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种刺参养殖用复合型合生元添加剂及其应用，添加剂组成包括：解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、海洋源寡糖类益生元、菌体保护剂、矿物质载体。本发明专利技术还提供了上述合生元添加剂的制备方法，取上述芽孢杆菌菌液，加入海洋源寡糖类益生元、菌体保护剂后，与矿物质载体混合；制得的混合物真空冷冻干燥，制成冻干粉，即为复合型海洋合生元添加剂。本发明专利技术高效科学配伍益生菌及益生元，使二者协同作用，发挥“1+1>2”的效果，利用本发明专利技术所述合生元添加剂可同时发挥芽孢杆菌和海洋源寡糖类益生元的双重益生作用，显著提高刺参的生长性能及非特异性免疫应答，更好地促进动物健康生长。

Compound Biostime additive and its application in a sea cucumber culture

The present invention provides a compound Biostime additive and its application in a sea cucumber breeding, additive comprises Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis, Bacillus subtilis, marine oligosaccharides prebiotics, cell protective agent, carrier minerals. The invention also provides a method for preparing the Biostime additive, the Bacillus liquid, add sea source oligosaccharide prebiotics, cell protective agent, mixed with mineral carrier; mixture prepared by vacuum freeze drying, freeze dried powder is made, the composite marine Biostime additive. The present invention, scientific compatibility of probiotics and prebiotics, the synergistic effect of the two play, \1+1> 2\ effect, the use of the synbiotics can also play bacillus and marine oligosaccharides prebiotics dual prebiotic effects, significantly improve the growth performance and non-specific immune responses of sea cucumber, better to promote the healthy growth of animal.

【技术实现步骤摘要】
一种刺参养殖用复合型合生元添加剂及其应用
本专利技术涉及复合芽孢杆菌-海洋活性寡糖合生元研制方法及其在刺参养殖中的应用。
技术介绍
刺参是中国20多种可食用海参中品质最好的一种，位列海产八珍之首，具有极高的营养价值和经济价值。近十多年来，刺参养殖业发展迅猛，2013年全国刺参产量超过13×104吨，产值突破300亿元，在水产养殖行业单种产值和利润中最高，其发展速度和综合经济效益都是其他经济水产品种所无法比拟的。随着刺参产业向高密度集约化方式转变，刺参养殖的健康和病害问题日益凸显，腐皮综合征等疾病频发，导致生产性能降低，严重制约了刺参产业健康和可持续发展。虽然使用抗生素和化学药物防治水生动物疾病具有一定的效果，但是会导致细菌出现抗药性、药物残留及破坏动物与环境中正常菌群平衡等诸多弊端。随着现代水产养殖业逐步向绿色、环保和无公害方向发展，益生菌和益生元等天然绿色饲料添加剂因具有利于肠道及水体微生态群系平衡、促进动物生长及增强免疫应答，可为宿主带来诸多益处，且绿色安全、无污染，逐渐成为水产养殖领域研究的焦点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于高效科学配伍益生菌及益生元，从而显著提高刺参的生长性能及非特异性免疫应答，以保证刺参产业健康可持续性发展。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种海洋合生元添加剂，该添加剂包含源自海洋、具有生物活性的海洋寡糖类益生元——壳寡糖，以及能利用壳寡糖作为能源物质生长的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslincheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。所述三种芽孢杆菌与上述寡糖类益生元科学配伍，制备出的海洋合生元添加剂为可用于刺参养殖促进其生长及增强免疫力的复合型合生元添加剂；上述海洋合生元添加剂的组成包括：解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、海洋寡糖类益生元、菌体保护剂、矿物质载体；所述海洋益生元壳寡糖的聚合度为2～10；所述壳寡糖分子量<2000；所述菌体保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖或明胶；优选脱脂奶粉；所述矿物质载体为沸石粉。优选方式下，所述海洋合生元添加剂各组分的配比为：浓度分别大于等于1×1010CFU/mL的解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌菌液中加入占所述菌液质量5～8％的海洋寡糖类益生元壳寡糖、占所述菌液质量5～10％的菌体保护剂后得到的溶液与所述矿物质载体按体积质量比1:0.25ml/g混合，冻干。进一步优化，解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌菌液浓度等于1×1010CFU/mL，加入的海洋寡糖类益生元占所述菌液质量5％、菌体保护剂占所述菌液质量的10％。本专利技术所述三种芽孢杆菌均对刺参没有安全性风险，无致病性，可作为刺参的益生菌使用。本专利技术还提供了上述海洋合生元添加剂的制备方法，具体步骤如下：S1、取解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌菌液，加入海洋寡糖类益生元、菌体保护剂，得到混合液；所述海洋寡糖类益生元为聚合度为2～10的壳寡糖；所述壳寡糖分子量<2000；所述菌体保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖或明胶；优选脱脂奶粉。优选方式下，所述三种芽孢杆菌菌液浓度分别大于等于1×1010CFU/mL；优选等于1×1010CFU/mL；加入的所述海洋寡糖类益生元的量占所述三种芽孢杆菌菌菌液质量的5～8％；优选5％；加入的所述菌体保护剂的量占所述三种芽孢杆菌菌液质量的5～10％；优选10％。所述三种芽孢杆菌菌液的制备方法优选为：将上述三种芽孢杆菌分别进行发酵富集，培养温度为25～30℃，pH6.8～7.8，培养48～72h，得到芽孢杆菌发酵液；分别调整芽孢杆菌发酵液浓度之后将三种芽孢杆菌发酵液混合制成混合菌液；所述三种芽孢杆菌发酵培养基为改进后的2216E海洋培养基，具体成分质量体积比为：蛋白胨:壳寡糖:酵母膏:沙滤海水＝0.3:0.1:0.1:100(g:g:g:g:ml)。此步骤可采用平板计数法调整发酵后的三种芽孢杆菌发酵液浓度。S2、将步骤S1制得的混合液与矿物质载体混合；所述矿物质载体为沸石粉；所述混合液与矿物质载体混合的体积质量比优选为1:0.25mL/g。S3、将步骤S2制得的混合物真空冷冻干燥24h～48h，制成冻干粉，即为海洋合生元添加剂。经实际测算，本专利技术制得的海洋合生元添加剂产品中三种芽孢杆菌的总含量>1010CFU/g。本专利技术还提供了上述海洋合生元添加剂在刺参养殖中的应用，具体步骤为：将所述海洋合生元添加剂与海参基础饲料按比例混合；所述海洋合生元添加剂为所述基础饲料质量的2～5％。本专利技术的有益效果是：1、本专利技术高效科学配伍益生菌及益生元，使二者协同作用，发挥“1+1>2”的效果，利用本专利技术所述合生元添加剂可同时发挥芽孢杆菌和海洋寡糖类益生元的双重益生作用，选择性促进外源性益生菌与内源性肠道有益微生物在动物肠道内定植及增殖，集益生菌的速效性和慢效应物质益生元的生长保护作用于一体，发挥协同效应，促进动物生长，激活宿主免疫系统，并直接或间接抑制有害微生物的繁殖，从而显著提高刺参的生长性能及非特异性免疫应答，更好地促进动物健康生长。2、本专利技术能改善刺参肠道微生态环境，促进刺参生长性能，提高刺参养殖品质与效益，可用作水产养殖功能性绿色饲料添加剂。综上所述，本专利技术依据肠道微生态营养学原理，在研究与把握现有水产添加剂基础上，结合最新一代高通量测序与微生态菌群分析技术，科学筛选配伍特定益生菌和新型海洋寡糖类益生元，提供一种具有促进刺参生长及激活免疫系统的高效合生元制剂，使其充分发挥合生元各组分的益生作用，达到增强高密度集约化养殖模式下刺参的生长性能及抵御疾病的能力的目的，促进刺参养殖业的健康稳定发展。具体实施方式下面将说明本专利技术的具体实施方式：实施例1一、制备海洋合生元添加剂步骤1：在改进后的2216E海洋培养基中分别发酵培养解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌，培养温度为30℃，pH7.0，培养时间为48h，得到解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌发酵液，分别调节三种芽孢杆菌发酵液至1×1010CFU/mL，将三种芽孢杆菌菌液混合得到混合菌液；所述三种芽孢杆菌发酵培养基为改进后的2216E海洋培养基，具体成分质量体积比为：蛋白胨:壳寡糖:酵母膏:沙滤海水＝0.3:0.1:0.1:100(g:g:g:ml)；步骤2：将上述三种芽孢杆菌混合菌液与海洋寡糖类益生元及脱脂奶粉混合，使海洋寡糖类益生元质量浓度为5％，脱脂奶粉保护剂质量浓度为10％；上述海洋寡糖类益生元为聚合度为2～10的壳寡糖；所述壳寡糖分子量<2000。步骤3：将步骤2溶液与矿物质载体沸石粉混合，体积质量比为1:0.25ml/g；步骤4：将步骤3制得的混合物真空冷冻干燥24h，制成冻干粉，即为海洋合生元添加剂。二，试验用刺参饲料的制备步骤1：刺参基础饲料的选择，此处提供一种饲料配方(具体配方应视情况选择)：称量海带粉2kg，鼠尾藻粉2kg，豆粕粉1kg，鱼粉1kg，海泥3kg，贝壳粉0.75kg，复合维生素和矿物质0.25kg；其中，所述复合维生素和矿物质与现有技术的基础饲料所需添加成份和数量的要求相同。在此提供一种优选方式，所述复合维生素和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合型海洋合生元添加剂，其特征在于，组成包括：解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、海洋寡糖类益生元、菌体保护剂、矿物质载体；所述海洋寡糖类益生元为聚合度为2～10的壳寡糖；所述壳寡糖分子量<2000；所述菌体保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖或明胶；所述矿物质载体为沸石粉。

【技术特征摘要】
1.一种复合型海洋合生元添加剂，其特征在于，组成包括：解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、海洋寡糖类益生元、菌体保护剂、矿物质载体；所述海洋寡糖类益生元为聚合度为2～10的壳寡糖；所述壳寡糖分子量<2000；所述菌体保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖或明胶；所述矿物质载体为沸石粉。2.根据权利要求1所述海洋合生元添加剂，其特征在于，各组分的配比为：浓度分别大于等于1×1010CFU/mL的解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌液中加入占所述菌液质量5～8％的壳寡糖、占所述菌液质量5～10％的菌体保护剂后得到的溶液与所述矿物质载体按体积质量比1:0.25ml/g混合，冻干。3.根据权利要求1或2所述海洋合生元添加剂，其特征在于，所述矿物质载体为沸石粉；所述菌体保护剂为脱脂奶粉。4.权利要求1所述海洋合生元添加剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：S1、取解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌液，加入海洋寡糖类益生元、菌体保护剂，得到混合液；所述海洋寡糖类益生元是聚合度为2～10的壳寡糖；所述壳寡糖分子量<2000；所述菌体保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖或明胶；S2、将步骤S1制得的混合液与矿物质载体混合；所述植物源载体为沸石粉；S3、将步骤S2制得的混合物真空冷冻干燥24h～48h，制成冻干粉，即为海洋合生元添加剂。5.根据权利要求4所述海洋合生元添加剂的制备方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐永平，李淑英，王熙涛，
申请(专利权)人：大连赛姆生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21