藤黄酸季铵化壳聚糖纳米粒的制备方法属于药品技术领域，尤其涉及一种藤黄酸季铵化壳聚糖纳米粒的制备方法。本发明专利技术提供一种操作简单，有效性高且安全性高的一种藤黄酸季铵化壳聚糖纳米粒的制备方法。藤黄酸季铵化壳聚糖纳米粒的制备方法，包括下步骤。（1）取壳聚糖原料(70k，12g)，加入1-甲基-2-吡咯烷酮240mL，碘甲烷70mL，碘化钠31.2g和15%氢氧化钠溶液66mL，搅拌，在60℃水浴中回流1h。（2）采用混合溶剂法制备载药纳米粒。14mgGA与10mgTMC分别溶于0.56mL二甲亚砜和1.67mL蒸馏水中。（3）标准曲线的建立：将藤黄酸标准品用色谱甲醇溶解制成1.084mg/mL的储备液。（4）粒径、电位与形态：纳米粒溶液经过0.45µm微孔滤膜后，干燥后使用透射电镜JEM-200CX在200kV下观察。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药品
，尤其涉及一种。
技术介绍
藤黄酸为植物藤黄的主要成分，具有良好的抗肿瘤作用，其水溶性较差，限制了其临床应用。文献报道藤黄酸与L-精氨酸形成盐、加入聚氧乙烯麻油(cremophorEL)或进行结构改造达到增溶的目的。纳米粒具有稳定、载药量高的特点，粒径较小，可以避免被网状内皮系统细胞摄取实现在血液中长循环，并通过肿瘤部位通透性增强滞留效应最终被动靶向到肿瘤部位。水溶性季铵化壳聚糖(TMC)是天然聚合物壳聚糖的衍生化产物，可作为药物和基因载体。由于TMC具有正电性，GA结构中具有带负电的羧基。因此笔者设想可将TMC与GA通过电性作用形成水溶性纳米粒，增加藤黄酸的水溶性，提高GA在化学治疗中的有效性与安全性。现有的，有效性低且安全性差。
技术实现思路
本专利技术就是针对上述问题，提供一种操作简单，有效性高且安全性高的一种。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案。，包括下步骤。(1)取壳聚糖原料(70k, 12g)，加入1-甲基-2-吡咯烷酮240mL,碘甲烷70mL,碘化钠31.2g和15%氢氧化钠溶液66mL，搅拌，在60°C水浴中回流lh。反应完毕，将反应产物倾入300mL乙醇和200mL乙醚的混和溶剂中，沉淀，离心，沉淀物用乙醚洗涤2次，然后再加入1-甲基-2-吡咯烷酮260L，加热到40°C，除去乙醚，冷却到室温后加入碘甲烷70mL，碘化钠31.2和15%氢氧化钠溶液66mL，快速搅拌，60°C水浴加热30min，再加入碘甲烷12mL，2.4gNaOH,继续反应lh，反应结束后，沉淀，离心，沉淀用乙醚洗涤2次，将产物倒入10%NaC1240mL中交换I 一，去离子水透析3d，冻干。得淡黄色絮状的水溶性TMC。(2)采用混合溶剂法制备载药纳米粒。14mgGA与lOmgTMC分别溶于0.56mL 二甲亚砜和1.67mL蒸馏水中，两溶液在磁力搅拌下混合装入透析袋，封口后在蒸馏水中透析，所得溶液经3000r/min离心后过0.451^微孔滤膜。所得样品在4°C下避光保存。(3)标准曲线的建立:将藤黄酸标准品用色谱甲醇溶解制成1.084mg/mL的储备液，分别吸取上述储备液和量瓶中，容量瓶中，以流动相定容的标准溶液，在上述的色谱条件下测定GA含量，记录色谱峰面积A，绘制标准曲线。(4)粒径、电位与形态:纳米粒溶液经过0.45Mm微孔滤膜后，在25°C，633nm的He-Ne光下，使用Zetasizer3000H粒径测定仪测定载药纳米粒的粒径。将过0.22Mm膜的纳米粒溶液滴加到铜载网上，干燥后使用透射电镜JEM-200CX在200kV下观察。作为一种优选方案，以壳聚糖为原料采用两步季铵化合成季铵化壳聚糖(TMC)，用FT-1R和1HNMR表征其结构并计算季铵化程度(DQ)。通过混合溶剂法制备藤黄酸(GA)TMC纳米粒，采用HPLC测定载药量与包封产率。本专利技术有益效果。本专利技术本文粒径、电位与形态:粒径对纳米药物传递系统的性质具有重要的影响。纳米粒的平均粒径能影响其被动革G向以及所包裹药物的传递，纳米粒粒径在10~200nm之间能减少被网状内皮系统摄取进入体循环的可能性，这也是纳米粒药物递送系统具有一些独特性质的结构基础。经测定载药纳米粒的粒径是98.24nm。从透射电镜照片中可以看出载药纳米粒为粒径lOOnm左右球体。电镜结果与粒径仪测定相符。是一种效果好且操作简单的。【具体实施方式】，包括下步骤。(1)取壳聚糖原料(70k，12g)，加入1-甲基-2-吡咯烷酮240mL，碘甲烷70mL，碘化钠31.2g和15%氢氧化钠溶液66mL，搅拌，在60°C水浴中回流lh。反应完毕，将反应产物倾入300mL乙醇和200mL乙醚的混和溶剂中，沉淀，离心，沉淀物用乙醚洗涤2次，然后再加入1-甲基-2-吡咯烷酮260L，加热到40°C，除去乙醚，冷却到室温后加入碘甲烷70mL，碘化钠31.2和15%氢氧化钠溶液66mL，快速搅拌，60°C水浴加热30min，再加入碘甲烷12mL，2.4gNaOH,继续反应lh，反应结束后，沉淀，离心，沉淀用乙醚洗涤2次，将产物倒入10%NaC1240mL中交换I 一，去离子水透析3d，冻干。得淡黄色絮状的水溶性TMC。(2)采用混合溶剂法制备载药纳米粒。14mgGA与lOmgTMC分别溶于0.56mL 二甲亚砜和1.67mL蒸馏水中，两溶液在磁力搅拌下混合装入透析袋，封口后在蒸馏水中透析，所得溶液经3000r/min离心后过0.45μπι微孔滤膜。所得样品在4°C下避光保存。(3)标准曲线的建立:将藤黄酸标准品用色谱甲醇溶解制成1.084mg/mL的储备液，分别吸取上述储备液和量瓶中，容量瓶中，以流动相定容的标准溶液，在上述的色谱条件下测定GA含量，记录色谱峰面积A，绘制标准曲线。(4)粒径、电位与形态:纳米粒溶液经过0.45Mm微孔滤膜后，在25°C，633nm的He-Ne光下，使用Zetasizer3000H粒径测定仪测定载药纳米粒的粒径。为了观察其表面形态，将过0.22Pm膜的纳米粒溶液滴加到铜载网上，干燥后使用透射电镜JEM-200CX在200kV下观察。作为一种优选方案，以壳聚糖为原料采用两步季铵化合成季铵化壳聚糖，用FT-1R和1HNMR表征其结构并计算季铵化程度(DQ)。通过混合溶剂法制备藤黄酸TMC纳米粒，采用HPLC测定载药量与包封产率。【主权项】1.，其特征在于，包括下步骤； (1)取壳聚糖原料(70k，12g)，加入1-甲基-2-吡咯烷酮240mL，碘甲烷70mL，碘化钠31.2g和15%氢氧化钠溶液66mL，搅拌，在60°C水浴中回流lh ;反应完毕，将反应产物倾入300mL乙醇和200mL乙醚的混和溶剂中，沉淀，离心，沉淀物用乙醚洗涤2次，然后再加入1-甲基-2-吡咯烷酮260L，加热到40°C，除去乙醚，冷却到室温后加入碘甲烷70mL，碘化钠31.2和15%氢氧化钠溶液66mL，快速搅拌，60°C水浴加热30min，再加入碘甲烷12mL, 2.4gNaOH,继续反应lh，反应结束后，沉淀，离心，沉淀用乙醚洗涤2次，将产物倒入10%NaC1240mL中交换I 一，去离子水透析3d，冻干；得淡黄色絮状的水溶性TMC ； (2)采用混合溶剂法制备载药纳米粒；14mgGA与lOmgTMC分别溶于0.56mL 二甲亚砜和1.67mL蒸馏水中，两溶液在磁力搅拌下混合装入透析袋，封口后在蒸馏水中透析，所得溶液经3000r/min离心后过0.451^微孔滤膜；所得样品在4°C下避光保存； (3)标准曲线的建立:将藤黄酸标准品用色谱甲醇溶解制成1.084mg/mL的储备液，分别吸取上述储备液和量瓶中，容量瓶中，以流动相定容的标准溶液，在上述的色谱条件下测定GA含量，记录色谱峰面积A，绘制标准曲线； (4)粒径、电位与形态:纳米粒溶液经过0.45Pm微孔滤膜后，在25°C，633nm的He_Ne光下，使用Zetasizer3000H粒径测定仪测定载药纳米粒的粒径；将过0.22Pm膜的纳米粒溶液滴加到铜载网上，干燥后使用透射电镜JEM-200CX在200kV下观察。2.根据权利要求1所述的，其特征在于，以壳聚糖为原料采用两步季铵化合本文档来自技高网...
【技术保护点】
藤黄酸季铵化壳聚糖纳米粒的制备方法，其特征在于，包括下步骤；（1）取壳聚糖原料(70k，12g)，加入1‑甲基‑2‑吡咯烷酮240mL，碘甲烷70mL，碘化钠31.2g和15%氢氧化钠溶液66mL，搅拌，在60℃水浴中回流1h；反应完毕，将反应产物倾入300mL乙醇和200mL乙醚的混和溶剂中，沉淀，离心，沉淀物用乙醚洗涤2次，然后再加入1‑甲基‑2‑吡咯烷酮260L，加热到40℃，除去乙醚，冷却到室温后加入碘甲烷70mL，碘化钠31.2和15%氢氧化钠溶液66mL，快速搅拌，60℃水浴加热30min，再加入碘甲烷12mL，2.4gNaOH，继续反应1h，反应结束后，沉淀，离心，沉淀用乙醚洗涤2次，将产物倒入10%NaCl240mL中交换I－，去离子水透析3d，冻干；得淡黄色絮状的水溶性TMC；（2）采用混合溶剂法制备载药纳米粒；14mgGA与10mgTMC分别溶于0.56mL二甲亚砜和1.67mL蒸馏水中，两溶液在磁力搅拌下混合装入透析袋，封口后在蒸馏水中透析，所得溶液经3000r/min离心后过0.45µm微孔滤膜；所得样品在4℃下避光保存；（3）标准曲线的建立：将藤黄酸标准品用色谱甲醇溶解制成1.084mg/mL的储备液，分别吸取上述储备液和量瓶中，容量瓶中，以流动相定容的标准溶液，在上述的色谱条件下测定GA含量，记录色谱峰面积A，绘制标准曲线；（4）粒径、电位与形态：纳米粒溶液经过0.45µm微孔滤膜后，在25℃，633nm的He‑Ne光下，使用Zetasizer3000H粒径测定仪测定载药纳米粒的粒径；将过0.22µm膜的纳米粒溶液滴加到铜载网上，干燥后使用透射电镜JEM‑200CX在200kV下观察。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：史树元，
申请(专利权)人：史树元，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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