一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，具体为：首先将植物提取物与溶剂混合进行前处理，获得提取浓缩后的植物提取物样品；然后采用高效液相色谱-串联质谱法，检测植物提取物中的吡啶类农药残留。本发明专利技术检测方法的前处理方法操作简便，免去了传统方法中固相萃取或凝胶渗透净化过程，节省了样品前处理时间2倍以上，本方法完整检测一个样品仅需1个小时，检出限可达到10μg/kg，检测周期短、检测成本低、检出限低、重复性好，适合生产企业及管理部门进行产品质量检测。

【技术实现步骤摘要】
一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法
本专利技术属于有害物检测
，涉及一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法。
技术介绍
吡啶类农药具有生物活性高、毒性低、内吸性强、选择性好的特点，是由吡啶代替苯环而得到的的一类新化合物。啶虫脒和吡虫啉属于烟碱类杀虫剂，具有杀虫广谱，活性高、持续时间长等特点，氟硫草定、氟啶草酮、甲氧咪草烟和噻唑烟酸广谱、高活性和选择性强的吡啶类除草剂；啶酰菌胺为新型烟酰胺类杀菌剂，主要用于各种腐烂病、白粉病等，对孢子的萌发有很强的抑制能力，且与其它杀菌剂无交互抗性。由于吡啶类农药在杀虫、杀菌和除草方面效果显著，常在植物和中药材中使用。植物提取物(PlantExtract，P.E)是以植物为原料，经过物理或化学的方法提取、分离，获得植物中的某一种或多种有效成分，而不改变其有效成分结构的一种产品。随着中国植物提取物的大量出口，植物提取物中农药残留、重金属、有机溶剂、环境污染物等问题也显现出来，国际上对其限量要求日益严格，植物提取物出口面临着严格的质量要求。目前，吡啶类农药的分析方法主要有气相色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法等，但这些方法的样品前处理均需采用固相萃取或凝胶渗透色谱净化，过程复杂、成本高、周期长等问题，不能实现7种吡啶类农药的快速检测。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，解决了现有检测方法存在的样品前处理均需要采用固相萃取柱或凝胶渗透色谱净化，过程复杂、成本高、周期长的问题。本专利技术所采用的技术方案是，一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，具体按以下步骤实施：步骤1，对植物提取物进行前处理：将植物提取物与溶剂混合，获得提取浓缩后的植物提取物样品；步骤2，检测植物提取物中的吡啶类农药残留：采用高效液相色谱-串联质谱法，简称TF-LC-MS/MS，检测植物提取物中的吡啶类农药残留。本专利技术的特点还在于，步骤1具体为：将植物提取物与氨水、乙酸乙酯涡旋混匀后超声提取25～35min，在4000～6000rpm下离心4～10min；取上清液10～15mL，浓缩至干，与1mL甲醇-0.1％甲酸水溶液复溶，涡旋均匀后过滤，得到提取浓缩后的植物提取物样品。植物提取物和氨水的质量体积比1：0.2～0.4g/mL，植物提取物和乙酸乙酯的质量体积比为1：10～30g/mL。甲醇与0.1％甲酸水的体积比为1：9。步骤2具体为：2.1设置色谱条件及质谱条件；2.2制作标准曲线；2.3精密度与加标回收率实验；2.4样品液检测。步骤2.1具体为：色谱条件设置，包括TF检测参数设置和液相检测参数设置，具体为：1)TF检测参数设置：TF净化柱：CycloneTM-P，0.5mm×50mm；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；流动相A与流动相B的体积比为3：7；2)液相检测参数设置：HypersilGOLDaQC18，柱长50mm，柱内径2.1mm，填料粒径3μm；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；流动相A与流动相B的体积比为1：9；柱温：室温18～22℃，进样量：50～100μL；质谱条件设置：扫描方式：电喷雾正离子模式；检测方式：多反应监测MRM；喷雾电压：3300V；气化温度：330℃；鞘气压N2：0.5L/min，辅助气压N2：4.5L/min；离子传输管温度：300℃；碰撞气体Ar；碰撞气体压力1.5mTorr。步骤2.2具体为：称取吡啶类农药标准品适量，以甲醇溶解并定容至10mL，配制成1.0mg/mL的标准储备液；取吡啶类农药100μL至10.00mL容量瓶中，配制成10μg/mL的混合标准工作液，以空白植物提取物样品溶液为稀释溶液；将储备液逐级稀释为500ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、20ng/mL、10ng/mL系列的混合基质标准溶液，进样测定，以每种化合物的峰面积对应化合物的质量浓度进行线性回归，得到标准工作曲线。步骤2.3具体为：采用不含吡啶类农药的植物提取物作为空白样品进行加标回收率实验，每个样品分别做10μg/kg、20μg/kg、50μg/kg的添加水平的回收率实验，每个添加水平做6份平行样，进行测定，求其平均回收率与相对标准偏差。步骤2.4具体为：取步骤1得到的处理好的样品液，每个样均重复进样3次取其峰面积平均值带入相应的标准曲线方程，计算出样品液中各种吡啶类农药的含量。本专利技术的有益效果是，本专利技术植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法的前处理方法操作简便，免去了传统方法中固相萃取或凝胶渗透净化过程，节省了样品前处理时间2倍以上，本方法完整检测一个样品仅需1个小时，检出限可达到10μg/kg，检测周期短、检测成本低、检出限低、重复性好，适合生产企业及管理部门进行产品质量检测。附图说明图1是7种吡啶类农药在TF净化柱的上样品色谱图；图2是7种吡啶类农药在TF净化柱上样品保留色谱图；图3是实施例1中枸杞提取物中7种吡啶类农药的的基质标准色图；图4是实施例1枸杞提取物样品色谱图；图5是枸杞提取物样品加标水平为10μg/kg的色谱图。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对本专利技术进行详细说明。本专利技术提供了一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，具体按以下步骤实施：步骤1，对植物提取物进行前处理：按照植物提取物和氨水的质量体积比1：0.2～0.4g/mL，植物提取物和乙酸乙酯的质量体积比为1：10～30g/mL，分别称取植物提取物、氨水和乙酸乙酯，涡旋混匀后超声提取25～35min，在4000～6000rpm下离心4～10min；取上清液10～15mL，浓缩至干，与1mL甲醇-0.1％甲酸水溶液复溶，涡旋均匀后过0.22μm有机微孔滤膜，得到提取浓缩后的植物提取物样品；其中甲醇与0.1％甲酸水的体积比为1：9。步骤2，检测植物提取物中的吡啶类农药残留：采用高效液相色谱-串联质谱法(TurboFlow-LC-MS/MS简称TF-LC-MS/MS(Thermofisher公司))检测植物提取物中的吡啶类农药残留，具体按照以下步骤实施：2.1设置色谱条件及质谱条件：1)TF检测参数：TF净化柱：CycloneTM-P，0.5mm×50mm；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；梯度洗脱程序及流速见表1。2)液相检测参数：HypersilGOLDaQC18(柱长50mm，柱内径2.1mm，填料粒径3μm)，或者相当；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；柱温：室温18～22℃，进样量：50～100μL；梯度洗脱程序及流速见表1。表1在线净化梯度洗脱程序3)质谱条件：扫描方式：电喷雾正离子模式(ESI+)；检测方式：多反应监测(MRM)；喷雾电压：3300V；气化温度：330℃；鞘气压(N2)：0.5L/min(35arb)，辅助气压(N2)：4.5L/min(arb)；离子传输管温度：300℃；碰撞气体(Ar)：1.5mTorr，质谱参数见表2。表27种吡啶类农药的质谱参数2.2制作标准曲线，具体按照以下步骤实施：2.2.1各称取7种吡啶类农药标准品适量，以甲醇溶解并定容至10mL，配制成1.0mg/mL的标准储备液。2.2.2各取7种吡啶类农药100μL至10.00mL容量瓶中，配制成10μg/mL的混合标准本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，其特征在于，具体按以下步骤实施：步骤1，对植物提取物进行前处理：将植物提取物与溶剂混合，获得提取浓缩后的植物提取物样品；步骤2，检测植物提取物中的吡啶类农药残留：采用高效液相色谱‑串联质谱法，简称TF‑LC‑MS/MS，检测植物提取物中的吡啶类农药残留。

【技术特征摘要】
1.一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，其特征在于，具体按以下步骤实施：步骤1，对植物提取物进行前处理：将植物提取物与溶剂混合，获得提取浓缩后的植物提取物样品；步骤2，检测植物提取物中的吡啶类农药残留：采用在线净化-高效液相色谱-串联质谱法，简称TF-LC-MS/MS，检测植物提取物中吡虫啉、啶虫脒、甲氧咪草烟、氟啶草酮、啶酰菌胺、噻唑烟酸、氟硫草定7种吡啶类农药残留，具体为：2.1设置色谱条件及质谱条件：1)TF检测参数：TF净化柱：CycloneTM-P，0.5mm×50mm；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；梯度洗脱程序及流速见表1；2)液相检测参数：HypersilGOLDaQC18，柱长50mm，柱内径2.1mm，填料粒径3μm；流动相：A为甲醇；B为0.1％甲酸水；柱温：室温18～22℃，进样量：50～100μL；梯度洗脱程序及流速见表1；表1在线净化梯度洗脱程序3)质谱条件：扫描方式：电喷雾正离子模式；检测方式：多反应监测MRM；喷雾电压：3300V；气化温度：330℃；鞘气压N2：0.5L/min，辅助气压N2：4.5L/min；离子传输管温度：300℃；碰撞气体Ar；碰撞气体压力1.5mTorr；2.2制作标准曲线；2.3精密度与加标回收率实验；2.4样品液检测。2.根据权利要求1所述的一种植物提取物中吡啶类农药的快速检测方法，其特征在于，所述步骤1具体为：将植物提取物与氨水、乙酸乙酯涡旋混匀后超声提取25～35min，在4000～6000rpm下离心4～10min；取上清液10～15mL，浓缩至干，与1mL甲醇-0.1％甲酸水溶液复溶，涡旋均匀后过...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔祥虹，刘开，何强，张璐，邹阳，付骋宇，李莹，
申请(专利权)人：陕西出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：陕西;61