本发明专利技术涉及一种胶原蛋白的提取工艺，其先将猪跟腱洗净粉碎成猪跟腱颗粒，再将猪跟腱颗粒脱脂，再将脱脂后的猪跟腱颗粒放入乙酸溶液中并加入胃蛋白酶，将它们充分混匀，使用磁力搅拌在常温下浸泡，获得酶解液；再将酶解液过滤、离心，获得胶原蛋白溶液粗品；再用乙酸溶液对胶原蛋白溶液粗品透析，最终剩下的透析液即为胶原蛋白提取液。本发明专利技术以猪跟腱为原材料，采用酸酶结合提取胶原蛋白，可促进猪跟腱的深加工利用，避免猪跟腱潜在巨大价值的埋没浪费。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种胶原蛋白的提取工艺，属于于蛋白基生物材料领域。
技术介绍
胶原蛋白是一类在所有哺乳动物中都存在的纤维状、大分子蛋白质，在哺乳动物体内是由结缔组织细胞和其他类型的细胞(如肝脏、肺、脾及脑组织细胞)所分泌的，作为骨骼与皮肤的主要组成部分，它们是哺乳动物细胞中最丰富的蛋白质，约占整个细胞总蛋白的1/4。典型的胶原分子是长且坚韧的三螺旋结构，由2条α 1链和1条α 2多肽链组成，3条α肽链交互缠绕形成了绳索状的超螺旋结构，每种胶原蛋白至少含有一段三螺旋结构区域。同样的动物跟腱中含有大量的胶原。胶原蛋白是一类蛋白质家族，现在已发现27种以上不同类型的胶原蛋白，其中I型、II型、III型以及IV型胶原蛋白是通过蛋白质水平上的一级结构分析发现的，其他则是通过在核酸水平上的胶原域的相似性分析发现的。胶原蛋白与其他蛋白质一样，也是由α-氨基酸组成的，并且具有1?4级结构和典型的三螺旋结构。胶原蛋白因其具有低免疫原性、细胞适应性和细胞增殖作用、组织相容性、可生物降解性等特性，而被广泛应用于制备止血敷料、人工皮肤、血管、神经、软骨、粘膜组织以及骨组织等领域的研究中，并且逐渐在拓展化工、食品相关方面的领域。但现在对于猪跟腱料提取胶原并应用在生产中鲜有研究。而我国畜牧业发展迅速，全国猪肉年产量、肉制品及副产品加工总值逐年上升。我国是一个养猪大国，随着科学技术的不断发展，养猪业也得到了飞速的发展，猪出栏数和猪肉产量保持逐年增长的势头。在生猪产品的生产过程中大量的优质胶原蛋白源一一猪跟腱潜在的巨大价值被埋没。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的不足，提供一种一种胶原蛋白的提取工艺，其以猪跟腱为原材料，采用酸酶结合提取胶原蛋白，可促进猪跟腱的深加工利用，避免猪跟腱潜在巨大价值的埋没浪费。按照本专利技术提供的技术方案:一种胶原蛋白的提取工艺，其特征在于包括如下步骤: (1)猪跟腱颗粒的准备:将猪跟腱洗干净，粉碎成猪跟腱颗粒； (2)猪跟腱颗粒的脱脂:将步骤(1)中制得的猪跟腱颗粒进行脱脂； (3)酶解:将步骤(2)脱脂后的猪跟腱颗粒放入浓度为0.1%?0.5%的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶；猪跟腱颗粒和胃蛋白酶的放入比例为:每100?150毫克的0.1%?0.5%乙酸溶液中加入5?10克猪跟腱颗粒和1?5克的胃蛋白酶；然后将它们充分混匀，使用磁力搅拌在常温下浸泡30?60小时，获得酶解液； (4)过滤:将步骤(3)获得的酶解液使用纱布过滤除渣，然后真空抽滤； (5)离心:将步骤(4)过滤后的酶解液使用离心机进行离心，然后取上清液，上清液为胶原蛋白溶液粗品； (6)透析:将步骤(5)获得的胶原蛋白溶液粗品先用0.05mol/L?0.155mol/L的乙酸溶液透析40?50小时，再以蒸馏水透析20?25小时，最终剩下的透析液即为胶原蛋白提取液。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤(1)中猪跟腱颗粒的获得方法具体为:将猪跟腱洗干净，沿着跟腱纤维方向切成厚度不超过5mm的薄片，然后再切碎、烘干，最后放入粉碎机中粉碎，获得猪跟腱颗粒。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤(2)中猪跟腱颗粒的脱脂方法具体为:将制得的猪跟腱颗粒放入滤纸包内，用长镊子将滤纸包放入抽提筒中，注入1?2倍一次虹吸量的石油醚，使样品包完全浸没在石油醚中；然后将抽提器各部分连接好，接通冷凝水水流，在水温为70?80°C的恒温水浴中进行脱脂抽提，抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，放通风处使石油醚挥发。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤(2)中进行脱脂抽提操作的抽提室室温为12 ?25Γ。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤(3)中所用的胃蛋白酶选用酶活力大于等于1200u/g的胃蛋白酶。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤(5)中离心的工艺参数为:离心机转速5000r/min，离心时间 90min。作为本专利技术的进一步改进，所述胶原蛋白提取工艺中的酶解到透析均是在温度为5?35°C、pH值为1.5?3的条件下进行。本专利技术与现有技术相比，具有如下优点:本专利技术以猪跟腱为原材料，采用酸酶结合提取胶原蛋白，可促进猪跟腱的深加工利用，避免猪跟腱潜在巨大价值的埋没浪费。【具体实施方式】下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1 (1)、猪跟腱颗粒的准备:将猪跟腱洗干净，沿着跟腱纤维方向切成厚度不超过5mm的薄片，然后再切碎、烘干，最后放入粉碎机中粉碎，获得猪跟腱颗粒； (2)、猪跟腱颗粒的脱脂:取步骤(1)中制得的猪跟腱颗粒25g放入滤纸包内，用长镊子将滤纸包放入抽提筒中，注入1.67倍一次虹吸量的石油醚，使样品包完全浸没在石油醚中；然后将抽提器各部分连接好，接通冷凝水水流，在水温为70°C的恒温水浴中进行脱脂抽提，抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，放通风处使石油醚挥发；脱脂抽提操作的抽提室室温为18°C ; (3)酶解:将步骤(2)脱脂后的猪跟腱颗粒放入浓度为0.1%的乙酸溶液中，并加入酶活力多1200 u/g的胃蛋白酶；猪跟腱颗粒和胃蛋白酶的放入比例为:每100毫克的0.1%乙酸溶液中加入6克猪跟腱颗粒和1克的胃蛋白酶；然后将它们充分混匀，使用磁力搅拌在常温下浸泡50小时，获得酶解液； (4)过滤:将步骤(3)获得的酶解液使用纱布进行过滤除渣，然后进行抽滤； (5 )离心:将步骤(4)过滤后的溶液使用离心机进行离心，离心机转速为5000r/min，离心时间90min ;然后取上清液，上清液为胶原蛋白粗品； (6)透析:将步骤(5)获得的胶原蛋白粗品先用0.lmol/L的乙酸溶液透析45小时，再以蒸馏水透析23小时，最终剩下的透析液即为胶原蛋白提取液。在实施例1中，所述胶原蛋白提取工艺中的酶解到透析均是在温度为5?35°C、pH值为1.5?3的条件下进行。当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种胶原蛋白的提取工艺，其特征在于包括如下步骤：（1）猪跟腱颗粒的准备：将猪跟腱洗干净，粉碎成猪跟腱颗粒；（2）猪跟腱颗粒的脱脂：将步骤（1）中制得的猪跟腱颗粒进行脱脂；（3）酶解：将步骤（2）脱脂后的猪跟腱颗粒放入浓度为0.1%～0.5%的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶；猪跟腱颗粒和胃蛋白酶的放入比例为：每100～150毫克的0.1%～0.5%乙酸溶液中加入5～10克猪跟腱颗粒和1～5克的胃蛋白酶；然后将它们充分混匀，使用磁力搅拌在常温下浸泡30～60小时，获得酶解液；（4）过滤：将步骤（3）获得的酶解液使用纱布过滤除渣，然后真空抽滤；（5）离心：将步骤（4）过滤后的酶解液使用离心机进行离心，然后取上清液，上清液为胶原蛋白溶液粗品；（6）透析：将步骤（5）获得的胶原蛋白溶液粗品先用0.05mol/L～0.155mol/L的乙酸溶液透析40～50小时，再以蒸馏水透析20～25小时，最终剩下的透析液即为胶原蛋白提取液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王利强，刘迪，杨思聪，王琳，沈俊逸，杨振宇，李思聪，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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