一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法，按下列步骤进行：一是无菌花芽体系的建立，二是愈伤组织诱导培养，三是愈伤组织的继代培养，四是愈伤组织的分化培养，五是试管苗的生根培养，六是再生植株的炼苗和移栽。本发明专利技术涉及一种以竹子的花芽为外植体的植物组培方法，是对以竹子花芽为外植体经愈伤组织诱导建立再生体系的有益尝试，采用本方法能够使外植体诱导出愈伤组织，并建立再生体系，为该竹子育种及遗传转化研究创造有利条件。本方法简单易行、利于推广，实施条件宽松，效果显著。

【技术实现步骤摘要】
一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法。
技术介绍
绿竹（BambusaoldhamiiMcClure）属于禾本科竹亚科箣竹属，为优良的笋材两用竹种。笋期5-11月，较长的笋期和较大的产量使其具有很高的经济效益。另外，其竹材纤维长，劈篾性好，是造纸建筑的好材料。然而传统的母竹移栽、埋鞭、扦插等方法，效率低，成本高。这一直都限制了优良竹种的大规模推广。因此，采用合适的外植体，利用植物组织培养的技术来建立优良竹种的离体快速繁殖和再生体系一直是科学研究的方向。竹类植物的组织培养起步于1968年，到现在已经先后对20余属80多个竹种开展了组培研究，而且应用于生产实践中。迄今为止，建立竹子再生体系所用的外植体大多是种胚、花药、花序、笋、芽、茎段、叶鞘等，关于花芽再生的报道极少，有关对绿竹通过花芽再生途径来实现植株的再生的研究未见有报道。
技术实现思路
针对现有技术中存在的问题，本专利技术利用绿竹的无菌花芽为外植体，经过愈伤组织诱导、增殖、分化、试管苗生根，移栽，建立其再生体系的方法。本专利技术通过以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法，其特征在于按下列步骤进行：1）无菌花芽的获得选取健壮、生长力旺盛、无病斑的绿竹植株，切下侧芽，经消毒处理后，在解剖显微镜下切下无菌芽尖为外植体，将芽尖接种在增殖培养基中，基本培养基为MS，添加的外源激素为6‑BA 即6‑苄基腺嘌呤，浓度为1mg·L‑1；培养条件：光培养，光强2400lux，光周期16/8h，温度25±2℃，随着继代次数增加，竹子出现试管开花，取开花植株的花芽作为外植体，无菌花芽在原培养基中继代培养；2）愈伤组织诱导培养诱导愈伤组织所用的花芽选用步骤1）已经建立好的无菌花芽体系，将0.05 ‑ 0.1cm长的花芽接种于诱导培养基中...

【技术特征摘要】
1.一种利用绿竹花芽进行快速高效再生体系的建立方法，其特征在于按下列步骤进行：1）无菌花芽的获得选取健壮、生长力旺盛、无病斑的绿竹植株，切下侧芽，经消毒处理后，在解剖显微镜下切下无菌芽尖为外植体，将芽尖接种在增殖培养基中，基本培养基为MS，添加的外源激素为6-BA即6-苄基腺嘌呤，浓度为1mg·L-1；培养条件：光培养，光强2400lux，光周期16/8h，温度25±2℃，随着继代次数增加，竹子出现试管开花，取开花植株的花芽作为外植体，无菌花芽在原培养基中继代培养；2）愈伤组织诱导培养诱导愈伤组织所用的花芽选用步骤1）已经建立好的无菌花芽体系，将0.05-0.1cm长的花芽接种于诱导培养基中：愈伤组织诱导基本培养基为MS培养基，添加的外源激素为2,4-D即2,4-二氯苯氧乙酸，2,4-D浓度为2mg·L-1，并在诱导培养基中添加500mg·L-1的水解酪蛋白、500mg·L-1的脯氨酸和500mg·L-1的谷氨酰胺；pH为5.7；诱导条件为：暗培养，温度25±2℃；3）愈伤组织增殖培养一个月后，将诱导出的致密愈伤组织转移到新的培养基中增殖培养，愈伤组织增殖培养基同诱导培养基，pH为5.7；培养条件为：暗培养，温度25±2℃；4）分化培养将经过增殖培养的致密愈伤组织接种在分化培养中进行分化...

【专利技术属性】
技术研发人员：林新春，臧巧路，王晓芹，黄丽春，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33