纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用制造技术

技术编号:12083589 阅读:115 留言:0更新日期:2015-09-19 22:18
本发明专利技术涉及医药技术领域,本发明专利技术提供了纳米银在制备抗真菌药物以及抗真菌药物增效剂中的应用。本发明专利技术经实验证明,纳米银在体外单独使用能有效抑制真菌的生长增殖,与氟康唑、咪康唑等唑类抗真菌药合用可以降低抗真菌药物的用量。本发明专利技术为纳米银开辟了新用途,在临床治病真菌耐药性日趋普遍,耐药程度日趋严重的情况下,纳米银对耐药真菌的生长有抑制作用,具有良好的临床应用前景。

【技术实现步骤摘要】

:本专利技术涉及医药
,是纳米银用于制备抗真菌产品的新用途,特别是纳米银作为抗真菌药物的增效剂。
技术介绍
:从远古时代,人们就知道银及其复合物能够有效地对抗微生物,利用银来加速伤口愈合、治愈感染、净化水和保存食物饮料等。在我国也有用银制器皿存放食物,防止细菌生长的记载。有报道纳米银对白念珠菌、黄曲霉和黑曲霉有明显的抑制作用(郑丛龙,周广任,景立新,等.纳米银体外抗真菌作用的实验研究[J].Chinese Modern Medical&Clinical,2007,6:3-4),但纳米银与抗真菌药合用抗真菌的研究未见报道。纳米材料是指直径在1~100nm之间的粒子,其优异特性取决于独特的微观结构,具有小尺寸效应、表面效应、量子尺寸效应、宏观量子和隧道效应等,显示出不同于常规材料的热、光、电、磁、催化和敏感等特性。将纳米材料和技术与银的特性相结合,研制出的纳米银材料已应用于各领域,例如建筑涂料、环境净化、医药、陶瓷、塑料、纸制品、纺织品、化妆品等。在医疗卫生领域主要是运用纳米银独特的抗菌性能,制备抗菌凝胶和医用敷料。至今未见纳米银与抗真菌药协同抗真菌的相关报道。
技术实现思路
:本专利技术的目的在于提供一种纳米银的新用途,即纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用。我们发现纳米银在体外单独使用能有效抑制真菌的生长增殖,与氟康唑、咪康唑等唑类抗真菌药合用可以降低抗真菌药物的用量。<br>实验证明,纳米银在体外具有抗真菌活性,对敏感菌和耐药菌有同样的活性(MIC80=8μM)。与唑类抗真菌药合用,在抑制真菌的生长增殖的同时可以降低抗真菌药物的用量,MIC80为0.125μM-0.5μM。本专利技术提供了纳米银在制备抗真菌药物中的应用,纳米银对白念珠菌单独用药使用,当纳米银的浓度为4、8μM时,均表现出良好的抗白念珠菌作用。本专利技术还提供了纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用。较优的,所述的纳米银的粒径为105.8nm。较优的,所述的纳米银的浓度为4~8微克/摩尔。较优的,所述的真菌是白色念珠菌Y0109、SC5314;白色念珠菌103、100。较优的,所述的抗真菌药物为氟康唑或咪康唑等等唑类抗真菌药。本专利技术为纳米银开辟了新用途。在临床治病真菌耐药性日趋普遍,耐药程度日趋严重的情况下,纳米银对耐药真菌的生长有抑制作用,具有良好的临床应用前景。具体实施方式:以下结合具体实施例,对本专利技术作进一步说明。应理解,以下实施例仅用于说明本专利技术而非用于限定本专利技术的范围。实施例1:纳米银单用对不同白念珠菌菌株的作用。材料和方法1、试药纳米银:按Lee法合成,由上海材料研究所检测中心检测,纳米粒径为105.8nm。氟康唑:购自Sigma公司。咪康唑:购自Sigma公司。两性霉素B:购自生工生物工程有限公司。二甲亚砜(DMSO):中国医药(集团)上海化学试剂公司,用前重蒸。2、菌株ATCC标准株:白念珠菌(Candida albicans)SC5314由William A.Fonzi(Department of Microbiology and Immunology,Georgetown University,Washington,DC)赠送。临床株:耐药白念珠菌(100、103)由长海医院真菌室提供,也可购自中科院药物所,分别采自长海医院不同科室临床样本,并经形态学和生化学鉴定。所有实验用菌株均于沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化,白念珠菌于35℃培养48h后,分别挑取单克隆再次划板活化,取第二次所得单克隆置SDA斜面,用上述方法培养后于4℃保存备用。3、培养液RPMI1640培养液:RPMI1640(Gibco BRL)10g,NaHCO32.0g,吗啡啉丙磺酸(morpholinepropanesulfonic acid,MOPS)(Sigma)34.5g(0.165M),加三蒸水900ml溶解,1N NaOH调pH至7.0(25℃),定容至1000ml,滤过除菌,4℃保存。沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA):蛋白胨10g,葡萄糖40g,琼脂18g,加三蒸水900ml溶解,加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml,调整pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后4℃保存。YEPD培养液:酵母浸膏10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,加三蒸水900ml溶解定容至1000ml,高压灭菌后4℃保存。4、仪器隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂);THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗器械厂);511型酶标分析仪(上海第三分析仪器厂);5、菌液制备实验前,用接种圈从4℃保存的SDA培养基上挑取白念珠菌少量,接种至1ml YEPD培养液,于30℃,200rpm振荡培养,活化16h,使真菌处于指数生长期后期。取该菌液至1ml YEPD培养液中,用上述方法再次活化,16h后,用血细胞计数板计数,以RPMI1640培养液调整菌液浓度至1×103~5×103CFU/ml。6、药敏板制备取无菌96孔板,于每排1号孔加RPMI1640培养液100μl作空白对照;3~12号孔各加新鲜配制的菌液100μl;2号孔分别加新鲜配制的菌液187.2μl和纳米银溶胶12.8μl或新鲜配制的菌液168.5μl和氟康唑溶液31.5μl或新鲜配制的菌液198.4μl和两性霉素B溶液1.6μl或新鲜配制的菌液199.2μl和咪康唑溶液0.8μl。2~11号孔10级倍比稀释,使各孔的纳米银最终药物浓度分别为64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125μM,氟康唑最终药物浓度分别为1024、512、256、128、64、32、16、8、4和2μM,两性霉素B和咪康唑最终药物浓度分别为16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625和0.03125μM,各孔中DMSO含量均低于1%。各药敏板于37℃培养。7、MIC80值判定在30℃恒温箱中培养48h后,用酶标分析仪于630nm测各孔OD值。与阳性对照孔比,以OD值下降80%以上的最低浓度孔中的药物浓度为MIC80(真菌生长80%被抑制时的药物浓度)。当药物的MIC80值超过测定浓度范围时,按以下方法进行统计:MIC80值高于最高浓度64μg/ml时,计为“>64μg/ml”;MIC80值为最低浓度或在最低浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用,其特
征在于,所述的纳米银的粒径为105.8nm。
3.根据权利要求1或2所述的纳米银在制备抗真菌药物增效剂中的应用,
其特征在于,所述的纳米银的浓度为4~8微克/摩尔。

【专利技术属性】
技术研发人员:张璐璐曹永兵阎澜姜远英苗琦叶招浇王彦曹颖瑛蔡同凯金磊
申请(专利权)人:中国人民解放军第二军医大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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