鱼腥草组织培养培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种鱼腥草组织培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基。增殖和生根培养通过添加合适量的荔枝汁，能促进鱼腥草不定芽的伸长，繁殖系数高，且在增殖的同时诱导生根，缩短培育周期。生根率和移栽成活率高，遗传稳定性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织培养基，尤其涉及一种鱼腥草组织培养培养基。
技术介绍
鱼腥草，英文名HERBA HOUTTUYNIAE，是中国药典收录的草药，草药来源为三白草科植物蕺菜(拉丁学名:Houttuynia cordata Thunb.)的干燥地上部分。夏季莖叶茂盛花穗多时采割，除去杂质，晒干。草药性状:茎呈扁圆柱形，扭曲，长20-35cm，直径0.2-0.3cm ；表面棕黄色，具纵棱数条，节明显，下部节上有残存须根；质脆，易折断。叶互生，叶片卷折皱缩，展平后呈心形，长3-5cm，宽3-4.5cm ;先端渐尖，全缘；上表面暗黄绿色至暗棕色，下表面灰绿色或灰棕色；叶柄细长，基部与托叶合生成鞘状。穗状花序顶生，黄棕色。搓碎有鱼腥气味。鱼腥草味辛，性寒凉，归肺经。能清热解毒、消肿疗疮、利尿除湿、清热止痢、健胃消食，用治实热、热毒、湿邪、疾热为患的肺痈、疮疡肿毒、痔疮便血、脾胃积热等。现代药理实验表明，本品具有抗菌、抗病毒、提高机体免疫力、利尿等作用。鱼腥草在我国长江流域及以南各省均有野生分布。鱼腥草为多年生宿根草本植物，性喜温暖湿润环境，能在各种土壤中生长，以疏松肥沃的中性或微酸性沙土(或沙质壤土)生长最为旺盛，怕霜冻，不耐干旱和水涝，耐阴性强。鱼腥草具有很高的药用价值和食用价值，并且其植株生长健壮，抗病虫能力极强，在生产栽培中一般不需进行病虫防治，可免受药物污染，是一种无污染的药、菜兼用植物，作为绿色无公害保健型蔬菜开发和利用有广阔的发展前景。由于过度采集，目前蕺菜野生资源破坏严重，为了保护野生资源，应积极开发利用和进行人工家化引种栽培。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种鱼腥草组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中:每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下:(I)大量元素:硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1350mg/L、二水氯化钙350mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾150mg/L、七水硫酸亚铁27.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L ；(2)微量元素:四水硫酸锰21.5mg/L、七水硫酸锌8.3mg/L、硼酸6.0mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L ；(3)有机物:肌醇80.0mg/L、甘氨酸2.5mg/L、核黄素(VB2)6.0mg/L、盐酸卩比卩多醇(VB6)0.45mg/L、烟酸 0.45mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.lmg/L ；(4)植物生长调节剂:6_苄基腺嘌呤0.5-2.0mg/L、萘乙酸0.2-0.8mg/L、荔枝汁0.3-0.5mg/L ；余量为蒸馏水；每升(L)生根培养基的组分及各组分的含量如下:(I)大量元素:硝酸钾900mg/L、硝酸铵675mg/L、二水氯化钙175mg/L、七水硫酸镁160mg/L、磷酸二氢钾75mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.5mg/L ；(2)微量元素:四水硫酸锰21.5mg/L、七水硫酸锌8.3mg/L、硼酸6mg/L、碘化钾0.83mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L ；(3)有机物:肌醇80.0mg/L、甘氨酸2.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.lmg/L、盐酸吡哆醇(VB6) 0.45mg/L、烟酸 0.45mg/L ；(4)植物生长调节剂:萘乙酸0.3-0.6mg/L、惹枝汁0.3-0.5mg/L ；余量为蒸馏水。本专利技术所述荔枝汁为新鲜荔枝去除枝叶、病虫果、烂果、腐果、未成熟果，清洗、去除果皮果核，果肉压榨，得到的果汁，灭菌得到。本专利技术鱼腥草组织培养培养基中的继代、生根培养基的配制方法为:I母液的配制与保存1.1为便于取样，宜先配制各种母液，分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液，需要时直接称样；1.2大量元素母液浓度成100倍溶液，有机物、微量元素母液配成200倍溶液，植物生长调节试剂母液的浓度配成lmg/ml ；1.3母液选用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制，大量生产时用煮沸过的水；1.4配制大量元素母液时，每个组分应单独溶解，后按氮、钙、镁、磷的顺序逐个混合，否则容易引起沉淀；1.5微量元素、有机物、植物生长调节剂母液应用棕色瓶装好并置于冰箱中保存；1.6母液配制后应及时使用，贮存时间不宜超过I个月；1.7发现母液有沉淀，或有微生物生长，或有藻类生长，应废弃不用。2培养基的配制2.1依照培养基配方，按比例量取各种母液；2.2在定量容器内放入准备配制培养基总量的约1/2以上的纯净水，并加入适量的糖，然后边搅拌边逐一加入所需量的母液；2.3琼脂可加热熔化后加入，如有搅拌设备时也可直接加入琼脂粉，然后用纯净水补足所需配制培养基的总量，搅拌均匀即可； 2.4培养基中的糖，在大量组培苗生产中，一般可用市售白糖，但最好是用蔗糖而不要用甜菜糖；2.5用1.0摩尔/升的盐酸或1.0摩尔/升的氢氧化钠调节培养基的pH值至5.8 ；2.6配制好的培养基要尽快分装到培养容器中，以免培养基凝固或变稠而难以分装；2.7分装培养基时应注意避免培养基粘在瓶口上，如果粘有培养基，在盖瓶盖或瓶塞前必须用干净纱布擦净瓶口。3培养基消毒灭菌3.1将分装好的培养基装于高压灭菌锅内消毒；3.2加热初期，当消毒锅消毒室的气压达0.05Mpa时，打开冷凝阀，排尽消毒室内冷空气；3.3当消毒室内气压达到0.llMpa、温度达121°C时，开始计时，保持温度与压力消毒15-20分钟；3.4关闭加热电源开关，按慢排气方式排放热气，待消毒室内的气压降至大气压时打开消毒锅盖或门，取出培养基；3.5培养基应置于空气少流动和少灰尘的干净环境冷却，否则在降温进气过程中导致霉菌孢子进入培养器皿，产生霉菌污染。4培养基储藏4.1培养基应尽量现配现用；4.2可在空气干净且不流动的环境短时间储藏培养基，但储藏超过I个月的培养基应废弃不用。本专利技术鱼腥草组织培养的方法为:(I)外植体的取材与消毒:取当年生鱼腥草的地下茎节流水清洗4_6h后，切成带1-2个茎节的茎段，用链霉素和青霉素钠的混合液浸泡12h，混合液中链霉素和青霉素钠的浓度均为0.5g/L ;然后用70%酒精浸泡30s ;再用0.1 %升汞消毒12min ;后用无菌水冲洗4-5次；最后用0.1 %升未消毒灭菌lOmin，无菌水冲洗5次后备用；(2)诱导培养:将消毒好的带1-2个茎节的茎段接种在MS+0.5mg/LNAA+2mg/L6-BA培养基上诱导不定芽产生，培养条件为25°C ± 1°C，光照强度为2000-30001χ，光照时间为16h/d，30d后得到l-3cm高的启动苗；(3)增殖培养与生根:将启动苗切成单个茎段，接种在继代培养基上，培养条件为25 0C ±1°C，光照强度为2000-30001X，光照时间为16h/d，5_8d，芽条长至约2.0cm时，将较健壮的芽苗由丛生芽上单个切下转至生根培养基上诱导生根，其余芽苗转至继代培养基上继续进行增殖培养。生根培养需要在5-8d左右，此时小苗的基部形成白色突起，并逐渐伸长，形成明显幼根，逐渐长本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱼腥草组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其特征在于：每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下：(1)大量元素：硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1350mg/L、二水氯化钙350mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾150mg/L、七水硫酸亚铁27.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、；(2)微量元素：四水硫酸锰21.5mg/L、七水硫酸锌8.3mg/L、硼酸6.0mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L；(3)有机物：肌醇80.0mg/L、甘氨酸2.5mg/L、核黄素(VB2)6.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.45mg/L、烟酸0.45mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L；(4)植物生长调节剂：6‑苄基腺嘌呤0.5‑2.0mg/L、萘乙酸0.2‑0.8mg/L、荔枝汁0.3‑0.5mg/L；余量为蒸馏水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：覃永亮，
申请(专利权)人：桂林市一峰食品有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45