本发明专利技术从福建省顺昌县的黄龙病红心柚的柚叶片上分离并通过产多糖胶质筛选得到的菌株，该菌株为地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151(Xanthomonas axonopodis)，并采用该地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151制备获得一种性能良好的多糖胶质；该多糖胶质硬度小，弹性、粘着性好，胶粘性和咀嚼性佳，此外还具有制备过程简单的特点。
【技术实现步骤摘要】
【专利说明】
本专利技术涉及微生物及其应用，尤其涉及其制备多 糖胶质。 【
技术介绍
】 多糖是以单糖为基本组成单位，按一定方式重复排列而成的聚合物。用于食品加 工的多糖俗称为胶质，即多糖胶质。多糖胶质可来源于动物、植物、微生物，海藻类多糖胶 质主要包括琼脂和卡拉胶以及海藻酸及其衍生物。植物类多糖胶质包括阿拉伯胶、纤维素 胶及其衍生物、魔芋粉等。微生物多糖胶质主要包括黄原胶、结冷胶、卡拉胶等，具有粘着 性、稳定性、乳化性和凝胶性等特点，在食品、医药领域等方面都有着广泛的应用，尤其是近 些年来，随着分子生物学技术的引入，多糖在抗凝血、延缓衰老、抗癌防癌、疾病免疫等方 面的功能也逐渐被揭示出来。按其用途，多糖胶质又可被分类为增稠剂和胶凝剂，可作为 食品添加剂、凝结剂、保鲜剂等。已报道的可产多糖胶质的微生物菌属有鞘氨醇单胞菌属 (Sphingomonas)、农杆菌属（Agrobacterium)、黄单胞菌属（Xanthomonas)等，但未见将地 毯草黄单胞菌作为制备多糖胶质的应用。 【
技术实现思路
】 本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种地毯草黄单胞菌菌株 FJAT-10151 (Xanthomonas axonopodis)，该地毯草黄单胞菌菌株 FJAT-10151 (Xanthomonas axonopodis)于2015年01月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 10271，且采用该地毯 草黄单胞菌菌株FJAT-10151制备获得一种硬度小、且弹性和粘着性均较佳的多糖胶质。 本专利技术是通过以下技术方案解决上述技术问题的： 本实验室从福建省顺昌县的黄龙病红心柚的柚叶片上分离并通过产多糖胶质筛 选得到的菌株，并对该菌株其理化特性等进行鉴定，最终鉴定其为地毯草黄单胞菌菌属的 一个菌株。 进一步地，采用该菌株制备获得一种硬度小、且弹性和粘着性均较佳的多糖胶质， 其制备方法的具体步骤如下： (1)权利要求1中所述的地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151的活化：用接种环将权 利要求1中所述的地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151划线于NA平板上，并于恒温培养箱中 培养48h，并且培养温度为30°C ; (2)制备种子液：将步骤（1)所获得的地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151的单菌落 接种于种子培养基中，并将其置于恒温振荡摇床中培养16h，温度30°C，转速170rpm/min ; (3)制备菌株发酵液：按2%接种量将步骤（2)所获得的种子液转入已消毒灭菌的 发酵培养基中培养，温度30°C，转速190rpm/min，培养72h即获得菌株发酵液； (4)多糖胶质的制备：将步骤（3)所得的菌株发酵液进行离心分离，收集上清液， 用冰乙醇沉降多糖胶质，且冰乙醇与上清液的体积比为3 :1 ;之后于4°C下静置过夜，接着 进行离心分离，采用无水乙醇洗涤离心所得的沉淀3遍，氮气吹干，最后粉碎即得所述多糖 胶质的产物。 进一步地，所述NA平板的组分为：牛肉膏3g七1、蛋白胨5g七1、葡萄糖IOg七 1、 酵母膏Ig · L'琼脂粉17g · L'pH 7. 2 ;所述种子培养基的组分为：鹿糖20g · L'蛋白胨 5g ·Ι7\酵母膏5g .L'pH 7. 0 ;发酵培养基：葡萄糖30g .L'蛋白胨3g ·Ι7\酵母膏2g七1、 KH2PO4Ig · IAMgSO4O. Ig · L-1、微量元素盐溶液lmL/L、pH 7. 0 ;其中，微量元素盐溶液的组 分为：MnCl2 · 4H20 I. 8g · Γ1，FeSO4 · 7H20 2. 4g · Γ1，H3BO3O. 283g · Γ1，CuCl20.00 27g · Γ1， CoCl2 · 6H20 0· 0074g · Γ1。 本专利技术的有益效果在于： 提供了一种地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151，并且采用该地毯草黄单胞菌菌株 FJAT-10151制备多糖胶质；该多糖胶质硬度小，弹性、粘着性好，胶粘性和咀嚼性佳，此外 还具有制备过程简单的特点。 【【附图说明】】 下面参照附图结合实施例对本专利技术作进一步的描述。 图1是16S rDNA序列构建的菌株FJAT-10151的系统发育树。 【【具体实施方式】】 本专利技术一种地毯草黄单胞菌菌株FJAT-10151 (Xanthomonas axonopodis)是从福 建省顺昌县的黄龙病红心柚的柚叶片上分离并通过产多糖胶质筛选得到的菌株，且通过该 菌株获得一种硬度小、胶性良好的多糖胶质。 1、该菌株 FJAT-10151 的分离： (1)称取黄龙病红心柚的柚叶片（该柚叶片处于整棵红心柚子树的北面下部）5g， 首先将柚叶片用自来水冲洗干净，吸干柚叶片表面的水，之后于75 %酒精中浸泡30s，接着 取出用10%次氯酸钠浸泡5分钟，再用无菌水漂洗柚叶片3次； (2)为了检验柚叶片表面灭菌的效果，用灭过菌的镊子夹着经步骤（1)处理过的 柚叶片并使其表面与NA平板接触2min，然后将NA平板放在30°C培养2d，若发现平板上没 有菌落出现，证明该柚叶片表面灭菌彻底，能够用于后续的操作； (3)取步骤（2)检验后灭菌彻底的柚叶片，无菌操作下将柚叶片剪碎至研钵里 并加入45mL无菌水，充分研磨匀浆制成KT 1样品原液，静置30min ;依次将样品原液进行 梯度稀释，选用稀释度为10' KT3;取200 μ L稀释液分别加到NA平板上，并涂布至平板 干燥，重复3次；将涂布后的NA平板置于28°C的培养箱中培养24h，观察菌落形态、颜色、 边缘状态、透明度、表面干湿状态等特征；挑取各部位具有代表性的单菌落，并计数、纯化、 20%甘油-80°C保存，从而分离得到菌株，为了方便描述，将分离所得的菌株命名为菌株 FJAT-10151〇 2.该菌株 FJAT-10151 的鉴定： 形态学鉴定： 对菌株FJAT-10151的理化特性等进行鉴定，得到该菌株FJAT-10151的主要形态 及生理生化如下：菌落较小、圆形、淡黄色、表面光滑且湿润、微隆、边缘整齐、不透明、具有 迀移性，革兰氏阴性，七叶苷、ONPG、半固体琼脂、葡萄糖半固体、葡萄糖铵和鸟氨酸脱羧酶 为阳性，MR-VP、丙二酸盐、尿素酶、甘露醇、山梨醇、卫矛醇、乳糖、木糖、水杨苷、鼠李糖、棉 子糖、木糖明胶、西蒙氏枸橼酸盐、赖氨酸脱羧酶和色氨酸肉汤为阴性。 分子生物学鉴定： 采用苯酚-氯仿法对菌株FJAT-10151进行DNA提取；以提取所获 得的菌株DNA为模板，以细菌通用引物（如SEQ ID NO :1、2所示：正向引物 5' -GAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，反向引物 5' -ACGGCTACCTTGTTA CGACTT-3')为引物对 进行PCR扩增： ?0?扩增反应体系（25 4 1^体系）：1414莫板、0.5 41^0.0当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种地毯草黄单胞菌菌株，其特征在于：所述菌株为地毯草黄单胞菌菌株FJAT‑10151(Xanthomonas axonopodis)，于2015年01月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10271。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：朱育菁，郑梅霞，刘波，黄素芳，潘志针，陈峥，
申请(专利权)人：福建省农业科学院农业生物资源研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35
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