新型醛缩酶和取代α-酮酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及新型醛缩酶和取代α-酮酸的制备方法。通过使用来自假单胞菌属、欧文氏菌属、黄杆菌属、黄单胞菌属的新型醛缩酶，可以由吲哚丙酮酸和丙酮酸(和/或草酰乙酸)合成4-(吲哚-3-基甲基)-4-羟基-2-氧代戊二酸，该4-(吲哚-3-基甲基)-4-羟基-2-氧代戊二酸可用作合成monatin的中间体。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及。通过使用来自假单胞菌属、欧文氏菌属、黄杆菌属、黄单胞菌属的新型醛缩酶，可以由吲哚丙酮酸和丙酮酸(和/或草酰乙酸)合成4-(吲哚-3-基甲基)-4-羟基-2-氧代戊二酸，该4-(吲哚-3-基甲基)-4-羟基-2-氧代戊二酸可用作合成monatin的中间体。【专利说明】本申请为分案申请，原申请的申请日为2003年8月26日，申请号为03819899. I (PCT/JP2003/010750)，专利技术名称为“新型醛缩酶和取代α -酮酸的制备方法”。
本专利技术涉及醛缩酶和取代α-酮酸的制备方法，更详细地说，涉及优选用于合成4-(吲哚-3-基甲基）-4-羟基-2-氧代戊二酸（以下成为IH0G)的醛缩酶，而所述IHOG可用作合成monatin的中间体,还涉及取代α -酮酸的制备方法。
技术介绍
具有下式（5)所示结构的monatin是从南非灌木的根中分离萃取出来的天然甜味氨基酸。它具有相当于蔗糖的数十倍至数千倍的强烈甜味，有望作为甜味剂使用。但是，monatin的有用性刚刚才被发现，尚未建立工业规模合成monatin的方法。【权利要求】1.下述（e)的DNA： (e)核苷酸序列由SEQ ID No. 15的核苷酸序列或者同一序列中碱基编号398-1141的核苷酸序列表示的DNA。2.下述（g)的DNA： (g)编码氨基酸序列由SEQ ID No. 16的氨基酸序列表示的蛋白的DNA。3.重组DNA，其由权利要求1或2的DNA与载体DNA连接得到。4.用权利要求3所述的重组DNA转化而成的细胞。5.制备具有醛缩酶活性的蛋白的方法，其包括将权利要求4中所述细胞在培养基中进行培养，在培养基和/或细胞中累积具有醛缩酶活性的蛋白。6.下述（k)的蛋白： (k)氨基酸序列由SEQ ID No. 16的氨基酸序列表示的蛋白。7.一种制备下述通式（3)所示取代α-酮酸的方法，该方法包括使下述通式（I)所示取代α -酮酸与下述通式（2)所示取代α -酮酸反应，8.权利要求7所述的取代α-酮酸的制备方法，其中R2为氢。9.权利要求7所述的取代α-酮酸的制备方法，其中R1为苄基或3-吲哚基甲基，和R2为氢或羧基。10.一种由草酰乙酸或丙酮酸与吲哚-3-丙酮酸制备下式（4)所示取代α-酮酸的方法， 11.一种制备下述通式（3’）所示的取代α-酮酸的方法，该方法包括使下述通式（1)所示化合物与下述通式（2’ )所示取代α-酮酸反应， 【文档编号】C12P7/42GK103525847SQ201310231146【公开日】2014年1月22日 申请日期:2003年8月26日 优先权日:2002年8月26日【专利技术者】杉山雅一, 渡部乙比古 申请人:味之素株式会社本文档来自技高网...

【技术保护点】
下述(e)的DNA：(e)核苷酸序列由SEQ?ID?No.15的核苷酸序列或者同一序列中碱基编号398?1141的核苷酸序列表示的DNA。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：杉山雅一，渡部乙比古，
申请(专利权)人：味之素株式会社，
类型：发明
国别省市：