一种海参的超高压提取方法及其制备的海参提取物技术

本发明专利技术公开了一种海参的超高压提取方法，包括如下步骤：（1）取鲜海参，洗净，加水，匀浆，得海参浆液；（2）超高压提取步骤（1）制得的海参浆液，提取温度为20～80℃，压强为100-600MPa，提取次数为2～5次，每次不低于10min，即得提取液；（3）离心步骤（2）的提取液，得上清液，浓缩，得浓缩液；（4）在步骤（3）的浓缩液中加入乙醇溶液至醇含量为30～60%（v/v），4～20℃静置6～48h，过滤，得上清液，浓缩，干燥，粉碎，即可。本发明专利技术还公开了前述方法制备的海参提取物。本发明专利技术超高压提取方法可以有效提取海参的有效成分，收率高，操作简便，应用前景良好。

【技术实现步骤摘要】
一种海参的超高压提取方法及其制备的海参提取物
本专利技术涉及一种海参的超高压提取方法及其制备的海参提取物。
技术介绍
海参，别名刺参、海鼠，属海参纲（Holothurioidea），是生活在海边至8000米的海洋棘皮动物，据今已有六亿多年的历史，海参以海底藻类和浮游生物为食。海参全身长满肉刺，广布于世界各海洋中。我国南海沿岸种类较多，约有二十余种海参可供食用，海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海参是典型的高蛋白、低脂肪、低胆固醇、富含矿物质和维生素的优质食品。干海参富含蛋白质，含量高达55%，由于海参本身胶原蛋白的包裹作用，无论是新鲜产品或干制品水发，蛋白质都不能有效利用和吸收，有效利用率通常在20%左右。近年来，人们发现海参中含有许多具有重要生物活性的物质，如海参多肽、多糖、皂苷等。海参多肽具有良好的溶解性和稳定性，易消化吸收，食用安全，而且具有降血压、预防心脑血管疾病、抗疲劳、提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老等生物活性。目前，海参提取通常采用酶法提取，但是，酶法提取无法兼顾提取物的收率和蛋白质含量，如，苏永昌等，“海参多肽的制备工艺优化及其抗氧化测定”，福建水产，2009，2（6）：6-9中公开了一种酶法提取海参多肽的方法，其加酶量1800U/g,酶解温度为55℃,酶解pH值为7.5,酶解时间为3h。经超滤与冷冻干燥后,多肽得率为6.9%,蛋白质含量为94.9%，该方法制备的提取物蛋白质含量高，但是多肽得率太低。另外，酶法对反应条件的要求较为苛刻，而且酶的价格高，导致生产成本高。超高压提取(ultrahigh-pressureextraction,UHPE)，也称超高冷等静压提取，是指用100～1000MPa的流体静压力作用于提取溶剂和中药的混合液上，并在预定压力下保持一段时间，使植物细胞内外压力达到平衡后迅速卸压。由于细胞内外渗透压力忽然增大，细胞膜的结构发生变化，使得细胞内的有效成分能够穿过细胞的各种膜而转移到细胞外的提取液中，达到提取中药有效成分的目的。超高压提取可以有效提取黄酮类、皂苷类、多糖类和生物碱类等有效成。目前，未见采用超高压方法提取海参的报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种海参的超高压提取方法。本专利技术海参的超高压提取方法，包括如下步骤：（1）取鲜海参，洗净，加水，匀浆，得海参浆液；（2）超高压提取步骤（1）制得的海参浆液，提取温度为20～80℃，压强为100-600MPa，提取次数为2～5次，每次不低于10min，即得提取液；（3）离心步骤（2）的提取液，得上清液，浓缩，得浓缩液；（4）在步骤（3）的浓缩液中加入乙醇溶液至醇含量为30～60%（v/v），4～20℃静置6～48h，过滤，得上清液，浓缩，干燥，粉碎，即可。步骤（1）中，水的加入量为鲜海参的6～10（v/w）倍。步骤（2）中，提取温度为40℃或60℃。步骤（2）中，压强为300-500MPa。优选地，所述压强为400MPa。步骤（2）中，提取时间为10～100min。优选地，所述提取时间为20-60min。进一步优选地，所述提取时间为40min。步骤（4）中，所述溶液的醇含量为60%（v/v）。步骤（4）中，所述静置的温度为8℃，时间为12小时。本专利技术还提供了前述方法制备的海参提取物。所述海参提取物的蛋白含量不低于70%（w/w）。优选地，所述海参提取物的蛋白含量为70.1-89.8%（w/w）。本专利技术采用超高压提取方法提取海参，收率为35.3%-42.8%，制得的提取物中，蛋白含量为70.1%-89.8%，可以兼顾收率和提取物的蛋白含量，具有良好的应用前景。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本专利技术权利要求书记载的内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施方式本专利技术中，蛋白质的含量采用GB50095-2010食品安全国家标准《食品中蛋白质的测定》第二法（分光光度法）进行测定。1范围本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品测定。2原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，在pH4.8的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。在波长400nm下测定吸光度值，与标准系列比较定量，结果乘以换算系数，即为蛋白质含量。3试剂和材料除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1硫酸铜（CuSO4·5H2O）。3.2硫酸钾（K2SO4）。3.3硫酸（H2SO4密度为1.84g/L）：优级纯。3.4氢氧化钠（NaOH）。3.5对硝基苯酚（C6H5NO3）。3.6乙酸钠（CH3COONa·32HO）。3.7无水乙酸钠（CH3COONa）。3.8乙酸（CH3COOH）：优级纯。3.937%甲醛（HCHO）。3.10乙酰丙酮（C5H8O2）。3.11氢氧化钠溶液（300g/L）：称取30g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL。3.12对硝基苯酚指示剂溶液（1g/L）：称取0.1g对硝基苯酚指示剂溶于2mL95%乙醇中，加水稀释至100mL。3.13乙酸溶液（1mol/L）：量取5.8mL乙酸（3.8），加水稀释至100mL。3.14乙酸钠溶液（1mol/L）：称取41g无水乙酸钠（3.7）或68g乙酸钠（3.6），加水溶解后并稀释至500mL。3.15乙酸钠-乙酸缓冲溶液：量取60mL乙酸钠溶液（3.14）与40mL乙酸溶液（3.13）混合，该溶液pH4.8.3.16显色剂：15mL甲醛（3.9）与7.8mL乙酰丙酮（3.10）混合，加水稀释至100mL，剧烈振摇混匀（室温下放置稳定3d）。3.17氨氮标准储备溶液（以氮计）（1.0g/L）：称取105℃干燥2h的硫酸铵0.4720g加水溶解后移于100mL容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1.0mg氮。3.18氨氮标准使用溶液（0.1g/L）：用移液管吸取10.00mL氨氮标准储备液（3.17）于100mL容量瓶内，加水定容至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于0.1mg氮。4仪器和设备4.1分光光度计。4.2电热恒温水浴锅：100℃±0.5℃。4.310mL具塞玻璃比色管。4.4天平：感量为1mg。5分析步骤5.1试样消解称取经粉碎混匀过40目筛的固体试样0.1g～0.5g（精确至0.001g）、半固体试样0.2g～1g（精确至0.001g）或液体试样1g～5g（精确至0.001g），移入干燥的100mL或250mL定氮瓶中，加入0.1g硫酸铜、1g硫酸钾及5mL硫酸（3.3），摇匀后于瓶口放一小漏斗，将定氮瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。缓慢加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热半小时。取下放冷，慢慢加入20mL水，放冷后移入50mL或100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海参的超高压提取方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）取鲜海参，洗净，加水，匀浆，得海参浆液；（2）超高压提取步骤（1）制得的海参浆液，提取温度为20～80℃，压强为100‑600MPa，提取次数为2～5次，每次不低于10min，即得提取液；（3）离心步骤（2）的提取液，得上清液，浓缩，得浓缩液；（4）在步骤（3）的浓缩液中加入乙醇溶液至醇含量为30～60%（v/v），4～20℃静置6～48h，过滤，得上清液，浓缩，干燥，粉碎，即可。

【技术特征摘要】
1.一种海参的超高压提取方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)取鲜海参，洗净，加水，匀浆，得海参浆液；(2)超高压提取步骤(1)制得的海参浆液，提取温度为40℃或60℃，压强为400MPa，提取次数为2～5次，每次提取时间为20～60min，即得提取液；(3)离心步骤(2)的提取液，得上清液，浓缩，得浓缩液；(4)在步骤(3)的浓缩液中加入乙醇溶液至醇含量为30～60％(v/v)，4～20℃静置6～48h，过滤，得上清液，浓缩，干燥，粉碎，即可。2.根据权利要求1所述的超高压提取方法，其特征在于：步骤(1)中，水的加入量为鲜海参的6～10(...

【专利技术属性】
技术研发人员：舒梅，李华菊，
申请(专利权)人：舒梅，
类型：发明
国别省市：四川;51