一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法技术

本发明专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法。本发明专利技术提供一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法，包括如下步骤：1）选用大粒径的胶乳颗粒与抗体反应，进行抗体包被；2）将包被后的胶乳经过清洗和封闭步骤后，分散于缓冲液中，制得胶乳增强免疫比浊法试剂盒试剂2；3）配置胶乳增强免疫比浊法试剂盒试剂1；4）在全自动生化分析仪上，设置参数；5）运行生化仪，在使用已知浓度的样品进行定标后，检测待测样本得到吸光度变化值，根据校准曲线，计算出样本中待测物的含量。本发明专利技术所提供的提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法大大提升试剂的分析灵敏度和精密度，且并未提高检测成本，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度 的方法。
技术介绍
当光线通过一个浑浊介质溶液时，由于溶液中存在混浊颗粒，光线被吸收一部分， 吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。这一方法 早于1959年Schultre和Schuick等报道应用于血楽蛋白与其抗体结合后形成复合物，导 致浊度的改变，再进行透射比浊测定，一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法，称为免疫透 射比浊法。其原理是，利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物，通过测定复合物形成量的 多少对抗原或抗体进行定量的方法。 但是经典的免疫比浊法，少量的小的抗原抗体复合物极难形成浊度，除非放置较 长时间；如形成较大的复合物，则抗原和抗体用量也较大，显然不符合微量化的要求。于是 发展了现在广泛应用于生化分析仪的胶乳增强免疫比浊法（PETIA):以多克隆抗体为基础 的改良免疫比浊分析法，利用基因工程方法将抗体与胶乳颗粒结合，当抗原抗体相结合时 便形成了抗原-抗体-胶乳颗粒复合物，增强了反应吸光度，反应液在一定波长处比浊，与 同样处理的标准液比本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法，包括如下步骤：1)选用大粒径的胶乳颗粒与抗体反应，进行抗体包被，大粒径的胶乳颗粒的粒径为0.2‑1.0μm；2)将包被后的胶乳经过清洗和封闭步骤后，分散于缓冲液中，制得胶乳增强免疫比浊法试剂盒试剂2；3)配置有促进抗原和抗体反应作用的缓冲液，制得胶乳增强免疫比浊法试剂盒试剂1；4)在全自动生化分析仪上，设置参数，其中，主波长设置为300‑500nm，副波长设置为500‑800nm，反应方向为负方向；5)运行生化仪，在使用已知浓度的样品进行定标后，检测待测样本得到吸光度变化值，根据校准曲线，计算出样本中待测物的含量。

【技术特征摘要】
1. 一种提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法，包括如下步骤： 1) 选用大粒径的胶乳颗粒与抗体反应，进行抗体包被，大粒径的胶乳颗粒的粒径为 0. 2-1. 0 u m ； 2) 将包被后的胶乳经过清洗和封闭步骤后，分散于缓冲液中，制得胶乳增强免疫比浊 法试剂盒试剂2 ; 3) 配置有促进抗原和抗体反应作用的缓冲液，制得胶乳增强免疫比浊法试剂盒试剂 1 ; 4) 在全自动生化分析仪上，设置参数，其中，主波长设置为300-500nm，副波长设置为 500-800nm，反应方向为负方向； 5) 运行生化仪，在使用已知浓度的样品进行定标后，检测待测样本得到吸光度变化值， 根据校准曲线，计算出样本中待测物的含量。2. 如权利要求1所述的提升胶乳增强免疫比浊法灵敏度的方法，其特征在于，所述步 骤2中，缓冲液为Tris-HCl缓冲液，浓度为50mM，其中牛血清白蛋白BSA的浓度为5g/L，叠 氮钠的浓度为lg/L。3. 如权利要求1所述的提升...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘霖，
申请(专利权)人：重庆中元生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;85