肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂及其制备方法技术

本发明专利技术涉及医药类抗肿瘤药物制剂领域，特别是涉及一种防止恶性肿瘤生长和复发的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂及其制备方法。本发明专利技术的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂包括原料药丝裂霉素C、载体材料以及兼备靶向和抗癌作用的MTX前药，所述载体材料为卵磷脂，二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)，所述的MTX前药为DSPE-PEG-MTX。本发明专利技术的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂为球形，粒径在20-80nm之间分布，适合作为静脉注射制剂，具有靶向性强、长循环、低毒性和协同治疗的特点。

【技术实现步骤摘要】
肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂及其制备方法
本专利技术涉及医药类抗肿瘤药物制剂领域，特别是涉及一种防止恶性肿瘤生长和复发的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂及其制备方法。
技术介绍
丝裂霉素C(Mitomycin C，MMC)，Mr 334.37，氮丙啶类衍生物，是一种从放线菌Streptomyces caespitosus的培养液中分离得到的抗肿瘤抗生素,属细胞周期非特异性抗肿瘤药，抗瘤谱广。其作用机制为=MMC分子中具有烷化功能的氨甲酰基与氮丙啶官能团在一定情况下被激活后，成为不同的解离状态。激活态的MMC的主要作用为使互补的DNA双键之间形成交联，从而抑制肿瘤细胞的DNA的复制与合成，而不是直接影响RNA。丝裂霉素C和DNA结合时，大部分只和其中的一条链结合，一部分形成交联而阻碍了 DNA双链的拆开，同时也引起单链断裂，所以丝裂霉素对肿瘤细胞的作用部位是细胞核。 MMC临床用于治疗消化道癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等多种肿瘤。但其具有全身毒性，特别是持久的骨髓抑制，白细胞和血小板减少、恶心、呕吐、腹泻、胃炎、皮炎发热和不适等亦有发生，并可引起溶血性尿毒综合症(HUS)。目前市场使用的MMC制剂有粉针剂、片剂、微胶囊剂等。徐英宏等还将丝裂霉素制成栓剂用于治疗直肠癌和结肠癌，但是这些传统剂型常常因为毒副作用大，或患者不能耐受而被迫停药。 甲氨喋呤(MTX)是一种叶酸类抗代谢药剂，能与肿瘤细胞表面的叶酸受体进行结合起到很好的靶向作用，常用于各种恶性肿瘤治疗，也是常用的抗风湿药物。MTX在药用上也有许多不利之处，本品可增加肝肾功能毒性，由于药物作用机理是作用部位是肿瘤细胞的细胞质而非细胞核，通过对二氢叶酸还原酶的抑制而达到阻碍肿瘤细胞DNA的合成，所以对正常的生物细胞也有药物作用，毒副作用较大。 临床上医生为了减少剂量和减少副作用常常把作用部位不同的两种以上的抗肿瘤药物联合，如将丝裂霉素与甲氨喋呤的联合用药常常比单独用药效果好，并且不容易产生抗药性。但临床上单纯的联合用药只能一定程度上减轻药物的毒副作用，而无法使药物发挥一定的缓释和靶向作用。 申请号为:201410181451.X的中国专利技术专利公开了一种甲氨喋呤前药及其胶束制剂和制备方法，利用柔性分子载体(DSPE-PEG-Nh2)与MTX化学健合形成MTX前药，然后进一步制成胶束制剂。 虽然，前者的两种专利技术专利的产品可以达到靶向缓释治疗肿瘤的效果，但是单独应用时剂量较大，并且没有双药或多药协调治疗效果。
技术实现思路
为解决上述现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种使肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤双药协调作用，具有缓释和靶向作用的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂及其制备方法。 本专利技术的技术方案为提供一种肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂，包括原料药丝裂霉素C、MTX前药和载体材料，所述载体材料包括卵磷脂和DSPE-PEG ;所述丝裂霉素C与卵磷脂的摩尔比为:1:1-4 ;所述MTX前药为DSPE-PEG-MTX，所述MTX前药与DSPE-PEG 的摩尔比为:1:0.5-5。 本专利技术的另一技术方案为提供一种上述肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂的制备方法，包括如下步骤: (I)将丝裂霉素C和卵磷脂溶于有机溶剂A中，所述有机溶剂A为四氢呋喃、二氯甲烷、乙醇或丙酮，40-60°C水浴反应2-6h，减压除去有机溶剂A，加入有机溶剂B洗涤，所述有机溶剂B为二氯甲烷或三氯甲烷，过滤收集溶液，溶液旋蒸干燥得丝裂霉素卵磷脂复合物； (2)将丝裂霉素卵磷脂复合物、DSPE-PEG和MTX前药溶解于有机溶剂C中得混合溶液，所述MTX前药为DSPE-PEG-MTX，所述有机溶剂C为二甲基亚砜，二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，向所述混合溶液中加入其质量2-3倍的去离子水，搅拌均匀后使用3500分子量的透析袋进行透析，得透析液； (3)将所述透析液通过200nm微孔滤膜过滤，得到肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药胶束溶液，冻干得到其纳米胶束制剂，所述纳米胶束制剂即为肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂。 本专利技术有益效果:本专利技术的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂为球形，平均粒径为40nm左右，稳定性好，具有较好的缓释特性，细胞毒性试验证明其对比于丝裂霉素C和甲氨喋呤的单纯双药使用，具有更强的抑瘤作用，适合作为静脉注射制剂，具有靶向性强、长循环、低毒性和协同治疗的特点。 【附图说明】 图1为本专利技术实施例中的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤双药制剂的纳米胶束的粒径分布和透射电镜图； 图2为本专利技术实施例中的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂和纯药的释药对比图； 图3为本专利技术实施例中的肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤双药制剂在不同pH环境下主药丝裂霉素药物释放对比图。 【具体实施方式】 为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。 本专利技术最关键的构思在于:提供一种肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药递送系统，是一种以双亲性分子DSPE-PEG和MTX前药(DSPE-PEG-MTX)为载体形成的胶束制剂，其中主药是丝裂霉素C、其通过与卵磷脂形成脂溶性复合物存在于胶束的疏水性内核中，辅药兼靶向分子的甲氨喋呤通过酰胺键化学交联到PEG的亲水端形成胶束的亲水外壳。 本专利技术实施例中使用的MTX前药可为申请号为:201410181451.X的中国专利技术专利中公开的MTX-DSPE-PEG。其制备方法可为:1)将DSPE-PEg-NH2溶于有机溶剂中，得溶液A ；MTX溶于DMSO水溶液中，得到溶液B ;在溶液B中加入TEA和交联剂，所述交联剂为DCC和NHS，将溶液A、B混合，在氮气保护下反应12h，得到溶液C;2)将步骤I)所得溶液C依次置于磷酸盐缓冲液和去离子水中透析去除杂质，透析液冻干得到MTX-PEG-DSPE化合物冻干品；3)将步骤2所得MTX-PEG-DSPE化合物冻干品用有机溶剂溶解，去除有机溶剂杂质后冻干，消毒得MTX前药。 实例I 秤取大豆卵磷脂、丝裂霉素(摩尔比为:4:1)，置于圆底烧杯中，加入适量四氢呋喃溶解，40°C水浴反应4h，减压除去反应溶剂四氢呋喃，再加入适量的三氯甲烷洗涤，过滤收集溶液，旋蒸干燥得紫色的粘稠状物质，即为丝裂霉素卵磷脂复合物； 将丝裂霉素卵磷脂复合物、DSPE-PEG以及MTX前药溶解于二甲基亚砜中，加入2倍的去离子水，搅拌均匀后使用3500分子量的透析袋进行透析； 透析8h后，使用200nm的微孔滤膜将透析液进行过滤，得到肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤双药制剂的胶束溶液，冻干得到其纳米胶束制剂。利用本法制备的制剂载药量丝裂霉素为8%,甲氨喋呤为2%,平均粒径为50nm。 实例2 秤取大豆卵磷脂300.0mg、丝裂霉素102.Smg(摩尔比为:3:1)，置于圆底烧杯中，加入适量四氢呋喃溶解，40°C水浴反应4h，减压除去反应溶剂四氢呋喃，再加入适量的二氯甲烷洗涤，过滤收集溶液，旋蒸干燥得紫色的粘稠状物质，即为丝裂霉素卵磷脂复合物； 将丝裂霉素卵磷脂复合物、DSPE-PEG以及MTX前药溶解于二甲基甲酰胺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肿瘤靶向丝裂霉素C和甲氨喋呤的双药制剂，其特征在于，包括原料药丝裂霉素C、MTX前药和载体材料，所述载体材料包括卵磷脂和DSPE‑PEG；所述丝裂霉素C与卵磷脂的摩尔比为：1：1‑4；所述MTX前药为DSPE‑PEG‑MTX，所述MTX前药与DSPE‑PEG的摩尔比为：1：0.5‑5。

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤靶向丝裂霉素和甲氨喋呤的双药制剂，其特征在于，包括原料药丝裂霉素0、前药和载体材料，所述载体材料包括卵磷脂和03？2-？郎；所述丝裂霉素与卵磷脂的摩尔比为:1:1~4 ；所述11前药为所述前药与的摩尔比为:1:0.5-5。2.根据权利要求1所述的肿瘤靶向丝裂霉素和甲氨喋呤的双药制剂，其特征在于，所述卵磷脂为蛋黄卵磷脂或大豆卵磷脂。3.根据权利要求1所述的肿瘤靶向丝裂霉素和甲氨喋呤的双药制剂，其特征在于，其特征在于，所述是由03？2-？%-順2和经过酰胺健化学交联获得。4.一种肿瘤靶向丝裂霉素和甲氨喋呤的双药制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)将丝裂霉素和卵磷脂溶于有机溶剂八中，所述有机溶剂八为四氢呋喃、二氯甲烷、乙醇或丙酮，40-601水浴反应2-61！，减压除去有机溶剂八，加入有机溶剂8洗涤，所述有机溶剂8为二氯甲烷或三氯甲烷，过滤收集溶液，溶液旋蒸干燥得丝裂霉素卵磷脂复合物； (2)将丝裂霉素卵磷脂复合物、和前药溶解于有机溶剂中得混合溶液，所述前药为所述有机溶剂为二甲基亚砜，二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，向所述混合溶液中加入其质量2-3倍的去离子水，搅拌均匀后使用3500分子量的透析袋进行透析，得透析液； (3)将所述透析液通...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯振清，蔺金燕，侯鲁，
申请(专利权)人：厦门市壳聚糖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35