一种快速检测抗体的试纸条制造技术

本发明专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种快速检测抗体的试纸条。所述试纸条是由底板（1）和相互紧密搭接粘贴在底板上的样品垫（6）、抗原垫（5）、标记物结合垫（4）、包被膜（3）和吸收垫（2）组成，所述抗原垫上包被有与待测抗体相结合的抗原，所述标记物结合垫上包被有与所述抗原垫上包被的抗原相结合的标记抗体，所述包被膜上固定有检测T线（8）和质控C线（7），所述检测T线上包被有待测抗体的抗体，所述质控C线上包被有与标记抗体相结合的抗体。本发明专利技术试纸条解决了病毒抗原由于稳定性差而不容易被标记的问题，具有操作简便、反应快速、特异性强，适合现场检验和经济实用的优点。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种快速检测抗体的试纸条。所述试纸条是由底板（1）和相互紧密搭接粘贴在底板上的样品垫（6）、抗原垫（5）、标记物结合垫（4）、包被膜（3）和吸收垫（2）组成，所述抗原垫上包被有与待测抗体相结合的抗原，所述标记物结合垫上包被有与所述抗原垫上包被的抗原相结合的标记抗体，所述包被膜上固定有检测T线（8）和质控C线（7），所述检测T线上包被有待测抗体的抗体，所述质控C线上包被有与标记抗体相结合的抗体。本专利技术试纸条解决了病毒抗原由于稳定性差而不容易被标记的问题，具有操作简便、反应快速、特异性强，适合现场检验和经济实用的优点。【专利说明】一种快速检测抗体的试纸条
本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种快速检测抗体的试纸条。
技术介绍
目前，抗体检测的方法众多，除传统的沉淀反应、凝集试验、补体结合试验外，标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)已成为主要的免疫测定技术，这些方法各自具备自己的优点，但是在便捷性、快速性等方面均存在不足。 免疫胶体金技术是上世纪80年代继荧光素、放射性同位素和酶三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。该方法最大特点是简单快速、特异敏感、不需仪器设备和试剂，几分钟内就可用肉眼观察到颜色鲜明的检测结果，并可保存其检测结果。近年来，胶体金免疫层析技术己成为当今最快速的免疫学检测技术之一，并越来越受到相关研究领域的关注。 胶体金免疫层析技术的发展是基于胶体金标记技术的发展，胶体金溶液在一定条件下，由胶体金颗粒表面的负电荷，与蛋白质、多肽等物质上所带的正电荷因静电吸附作用而牢固结合，形成以胶体金标记的蛋白质复合物。这种金标记物可代替酶标记物形成显色反应，形成肉眼可见的条带。 近年来，疫苗保护性抗体的快速检测日渐兴起，但由于检测方法的局限，已严重限制了该行业的发展。目前，胶体金标记的快速检测抗体的检测试纸都是由样品垫、标记物结合垫、包被膜(其上划有检测线、质控线)和吸收垫组成，根据检测原理的不同大体分为两种:一种是将抗原标金，在标记物结合垫上包被胶体金标记的抗原，在包被膜上用待测抗体的抗体划膜得到检测T线；另一种是将抗原划膜，在标记物结合垫上包被胶体金标记的待测抗体的抗体，在包被膜上用待测抗体的抗体标金得到检测T线。现有研究表明:因为抗体蛋白性质较为稳定，所以对抗体蛋白的胶体金标记较为稳定，因此上述第一种方法所述的抗原的胶体金标记存在颇多问题，因为抗原多为病毒类，性质多样，有的大小甚至比胶体金颗粒还大，且稳定性较差，因此很难直接将抗原标记在胶体金颗粒上；即使勉强能将抗原标记上，也需要抗原达到极高的纯度，而对抗原病毒的纯化是一项难度较大、成本较高的工程；也有人寻找抗原的重组抗原来代替这些天然抗原，但是很多抗原很难寻到能替代的重组抗原，而且即使有，成本也是极高的，由此说明，上述第一种方法的局限性比较高。上述的第二种方法使用待测抗体的抗体进行金标记，这种方法可以避免抗原金标记的问题，但在包被膜上使用抗原划膜得到检测T线，需要抗原具有较高的浓度和纯度，这也增加了产品生产的成本和难度；另外将抗原划到膜上，由于抗原稳定性较差，抗原划膜后，很难长时间保存，因此试纸条的有效期极短。这些都是限制抗体快速检测类试剂盒快速发展的原因。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，目的在于提供一种快速检测抗体的试纸条，以实现对抗体的快速检测。 为实现上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案为:一种快速检测抗体的试纸条，由底板和相互搭接粘贴在底板上的样品垫、抗原垫、标记物结合垫、包被膜和吸收垫组成，所述抗原垫上包被有与待测抗体相结合的抗原，所述标记物结合垫上包被有与所述抗原垫上包被的抗原相结合的标记抗体，所述包被膜上固定有检测T线和质控C线，所述检测T线上包被有待测抗体的抗体，所述质控C线上包被有与标记抗体相结合的抗体。 按上述方案，所述标记物结合垫、抗原垫和样品垫为玻璃纤维、无纺布或聚酯膜；所述吸收垫为吸水纸，所述包被膜为硝酸纤维素膜。 按上述方案，所述标记抗体为胶体金标记抗体。 按上述方案，所述抗原垫的制备方法为:使用抗原保护液将抗原进行稀释后均匀铺在玻璃纤维、无纺布或聚酯膜上，置于37°C，相对湿度低于40%的环境中，干燥4小时，制成抗原垫；所述抗原保护液的配方为:Na2HPO4 5.72g, NaH2PO4 0.624g，柠檬酸三钠8.5g，蔗糖1g,叠氮钠Ig,水定容至1L。 按上述方案，所述抗原为粗抗原，其中抗原的含量为40wt°/T50wt%。 本专利技术试纸条的检测原理:在样品垫处加入血清或血浆或全血(待检样品)，若样品中含有待测抗体，样品加入后，待测抗体先与抗原垫中的抗原形成抗原-待测抗体复合物，复合物向前移动，复合物中的抗原再与标记物结合垫中的胶体金标记抗体结合，形成待测抗体-抗原-胶体金标记抗体免疫复合物，该复合物由于层析作用沿纸条向前移动，至检测T线，复合物中的待测抗体与检测T线上包被的待测抗体的抗体反应形成待测抗体的抗体-待测抗体-抗原-胶体金标记抗体免疫复合物，该复合物可聚集在检测区，当聚集的复合物达到一定的数量时，则形成一条肉眼可见的条带(T线)，判断结果为阳性；若样品中不含有或含很少量的待测抗体，则不能形成免疫复合物，即不能形成肉眼可见的条带，判断结果为阴性。C线作为试剂的质控标准，阳性和阴性检测样品均会产生条带。用肉眼直接观察试纸条在5、10、15、20、25、30分钟内的出线情况，并判定检测结果。 本专利技术试纸条的使用方法:将试纸条平放，在样品垫加入5μ I血样，用肉眼直接观察在30分钟内检测T线和质控C线的显色情况:质控C线不显色，说明本试验失败；质控C线显色，检测T线不显色(阴性)说明样品中不含有或含有低于检测线值的待测抗体；质控C线和检测T线均显色(阳性)说明样品中含有高于检测线值的待测抗体。 本专利技术的有益效果:(I)与现有技术相比，本专利技术所述快速检测抗体的试纸条增加了抗原垫的结构，通过在抗原垫上加入抗原保护液并包被能与待测抗体相结合的抗原，在标记物结合垫上包被能与所述抗原垫上包被的抗原相结合的标记抗体，解决了很多病毒因为抗原稳定性差而不容易被标记的问题。另一方面，本专利技术采用待测抗体的抗体划膜得到检测T线，因为抗体相比较为稳定，因此试纸条的有效期较长。 (2)本专利技术所述抗原为粗抗原，不需对粗抗原进一步纯化就能达到反应效果，这是因为在试纸条反应层析过程中，已经通过双抗体夹心法对粗纯抗原进行了筛选和纯化，保证了试剂反应的特异性，因此本试剂条的制备成本低，利于应用推广。实验结果表明，利用本专利技术制备的试纸条检测产品，检测的结果与ELISA检测结果一致，本专利技术试纸条具有操作简便、反应快速、特异性强，适合现场检验和经济实用的优点。 【专利附图】【附图说明】 图1为本专利技术快速检测抗体的试纸条结构示意图。其中，1-底板，2-吸收垫，3-包被膜，4-标记物结合垫，5-抗原垫，6-样品垫，7-质控C线，8-检测T线。 【具体实施方式】 为了更好地理解本专利技术，下面结合实施例进一步阐明本专利技术的内容，但本专利技术的内容不仅仅局限于下面的实例。 如图1所示，一种快速检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测抗体的试纸条，其特征在于，所述试纸条是由底板和相互紧密搭接粘贴在底板上的样品垫、抗原垫、标记物结合垫、包被膜和吸收垫组成，所述抗原垫上包被有与待测抗体相结合的抗原，所述标记物结合垫上包被有能与所述抗原垫上包被的抗原相结合的标记抗体，所述包被膜上固定有检测T线和质控C线，所述检测T线上包被有待测抗体的抗体，所述质控C线上包被有能与标记抗体相结合的抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张薇，吴边，金玉翠，龚华岳，王方杰，倪龙泉，
申请(专利权)人：武汉生命科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42