从油橄榄叶中提取分离橄榄苦甙的方法技术

本发明专利技术提供了一种从油橄榄叶中提取分离橄榄苦甙的方法，包括以下步骤：1)将油橄榄叶粉碎，加入其重量6～12倍的水，在水浴条件下回流提取2～3次，每次提取0.5～2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用；2)将滤液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相减压浓缩至无乙酸乙酯，得到橄榄苦甙粗提物；3)将橄榄苦甙粗提物加水溶解，加入混合溶液1～2倍重量的硅胶，搅拌均匀，干燥后装入层析柱，用乙醇洗柱，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液；4)将洗脱液浓缩，干燥，即为高纯度橄榄苦甙。本发明专利技术工艺简单，对设备要求低，产品收率高，适宜工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了一种，包括以下步骤：1)将油橄榄叶粉碎，加入其重量6～12倍的水，在水浴条件下回流提取2～3次，每次提取0.5～2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用；2)将滤液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相减压浓缩至无乙酸乙酯，得到橄榄苦甙粗提物；3)将橄榄苦甙粗提物加水溶解，加入混合溶液1～2倍重量的硅胶，搅拌均匀，干燥后装入层析柱，用乙醇洗柱，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液；4)将洗脱液浓缩，干燥，即为高纯度橄榄苦甙。本专利技术工艺简单，对设备要求低，产品收率高，适宜工业化生产。【专利说明】
本专利技术属于植物活性成分提取
，主要涉及一种。
技术介绍
油橄榄属木犀科木犀榄属常绿乔木，是世界著名的木本油料兼果用树种，在我国福建、广西、广东、四川、云南等地区广泛种植。现代生物技术分析表明油橄榄叶中含有大量的生物活性物质，其抗氧化活性成分较橄榄果更为突出，尤其是橄榄苦甙等多酚类化合物在叶中的含量明显高于果实和树皮。橄榄苦甙在临床上作为药品，能抑制病毒、细菌、微生物及其引起的毒素，对LDL胆固醇具有抗氧化作用，改善高血压、高血脂等心血管疾病，提高T淋巴细胞、NK细胞、吞噬细胞等的再生能力，加强细胞对病毒和感染的免疫能力。由于橄榄苦甙易氧化，吸湿性很强，不易结晶，所以高纯度的橄榄苦甙不易得到。为了保证了纯度，势必会增加纯化步骤，从而降低了收率，也大大增加了生产成本，不适合工业化生产。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一，该方法步骤简单，可同时保证的橄榄苦甙的纯度和收率，适合工业化生产。 本专利技术提供的技术方案是一种，包括以下步骤: I)将油橄榄叶粉碎，加入其重量6?12倍的水，在水浴条件下回流提取2?3次，每次提取0.5?2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相减压浓缩至无乙酸乙酯，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加水溶解，加入混合溶液I?2倍重量的硅胶，搅拌均匀，干燥后装入层析柱，用乙醇洗柱，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液浓缩，干燥，即为高纯度橄榄苦甙。 上述步骤3)中，所述乙醇体积浓度为10?30%。 上述步骤3)中，所述干燥是在55?65°C下干燥3?5h。 上述步骤3)中，乙醇的洗脱流速为I?2BV/h。 上述步骤3)中，水的用量为橄榄苦甙粗提取重量的I?2倍。 水浴回流提取可以确保橄榄苦甙最大程度溶出又不被分解，可以确保橄榄苦甙的收率；有机溶剂萃取可有效去除叶绿素、叶黄素、类胡萝卜素等脂溶性杂质和大分子杂质，进一步提高橄榄苦甙的纯度；硅胶层析可去掉混合溶液中盐类、糖类以及多酚物质，进一步实现橄榄苦甙的富集，提高其纯度。 与现有技术相比，本专利技术步骤简单，对设备要求较低，可同时保证的橄榄苦甙的纯度和收率，适合工业化生产。 【具体实施方式】 以下具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但不作为对本专利技术的限定。 实施例1 I)将5000g油橄榄叶粉碎，加入其重量6倍的水，在水浴条件下回流提取2次，每次提取0.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液加入沸程为60°C的石油醚，充分振摇萃取，静置分层，分液，石油醚相回收石油醚，残渣弃去，水相用乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加入其I倍重量的水溶解，得到混合溶液，再往混合溶液中加入其I倍重量的硅胶，搅拌均匀，在55°C下干燥3h后装入层析柱，用10v%乙醇洗柱，洗脱流速为I?BV/h，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液在40°C下减压回收溶剂，真空冷冻干燥，得到221g高纯度橄榄苦甙，经HPLC检测，成品中橄榄苦甙的含量为90.5%。 实施例2 I)将5000g油橄榄叶粉碎，加入其重量12倍的水，在水浴条件下回流提取3次，每次提取2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液加入沸程为90°C的石油醚，充分振摇萃取，静置分层，分液，石油醚相回收石油醚，残渣弃去，水相用乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加入其2倍重量的水溶解，得到混合溶液，再往混合溶液中加入其2倍重量的硅胶，搅拌均匀，在65°C下干燥5h后装入层析柱，用30v%乙醇洗柱，洗脱流速为2BV/h，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液在50°C下减压回收溶剂，真空冷冻干燥或喷雾干燥，得到228g高纯度橄榄苦甙，经HPLC检测，成品中橄榄苦甙的含量为92.5%。 实施例3 I)将5000g油橄榄叶粉碎，加入其重量9倍的水，在水浴条件下回流提取3次，每次提取1.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液加入沸程为80°C的石油醚，充分振摇萃取，静置分层，分液，石油醚相回收石油醚，残渣弃去，水相用乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加入其1.5倍重量的水溶解，得到混合溶液，再往混合溶液中加入其1.5倍重量的硅胶，搅拌均匀，在60°C下干燥4h后装入层析柱，用20v%乙醇洗柱，洗脱流速为1.5BV/h，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液在45°C下减压回收溶剂，真空冷冻干燥或喷雾干燥，得到220g高纯度橄榄苦甙，经HPLC检测，成品中橄榄苦甙的含量为90.9%。 实施例4 I)将5000g油橄榄叶粉碎，加入其重量6倍的水，在水浴条件下回流提取3次，每次提取0.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液加入沸程为90°C的石油醚，充分振摇萃取，静置分层，分液，石油醚相回收石油醚，残渣弃去，水相用乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加入其I倍重量的水溶解，得到混合溶液，再往混合溶液中加入其2倍重量的硅胶，搅拌均匀，在55°C下干燥5h后装入层析柱，用1v%乙醇洗柱，洗脱流速为2BV/h，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液在40°C下减压回收溶剂，真空冷冻干燥或喷雾干燥，得到209g高纯度橄榄苦甙，经HPLC检测，成品中橄榄苦甙的含量为90.4%。【权利要求】1.，其特征在于:包括以下步骤: 1)将油橄榄叶粉碎，加入其重量6?12倍的水，在水浴条件下回流提取2?3次，每次提取0.5?2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用； 2)将滤液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物； 3)将橄榄苦甙粗提物加水溶解，加入混合溶液1?2倍重量的硅胶，搅拌均匀，干燥后装入层析柱，用乙醇洗柱，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液； 4)将洗脱液浓缩，干燥，即为高纯度橄榄苦甙。2.根据权利要求1所述的，其特征在于:步骤3)中，所述乙醇体积浓度为10?30%。3.根据权利要求1所述的，其特征在于:步骤3)中，所述干燥是在55?65°C下干燥3?5h。4.根据权利要求1所述的，其特征在于:步骤3)中，乙醇的洗脱流速为1?2BV/h。5.根据权利要求1所述的，其特本文档来自技高网...

【技术保护点】
从油橄榄叶中提取分离橄榄苦甙的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将油橄榄叶粉碎，加入其重量6～12倍的水，在水浴条件下回流提取2～3次，每次提取0.5～2.5h，合并提取液，过滤，取滤液备用；2)将滤液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相减压浓缩至干，得到橄榄苦甙粗提物；3)将橄榄苦甙粗提物加水溶解，加入混合溶液1～2倍重量的硅胶，搅拌均匀，干燥后装入层析柱，用乙醇洗柱，薄层层析跟踪监测，收集含目标成分的洗脱液；4)将洗脱液浓缩，干燥，即为高纯度橄榄苦甙。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢照凯，周晓青，谢冬养，钟德品，陆美珍，
申请(专利权)人：桂林三宝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45