本发明专利技术公开了一种PCT与CRP定量联检免疫层析试纸条及其制备方法，所述试纸条包括底衬及设在所述底衬上的包被膜，所述包被膜上设有样品垫、包被线区和吸水纸，所述包被线区包括从靠近所述样品垫端至靠近所述吸水纸端依次平行设置的包被荧光胶乳标记抗体的标记线、包被鸡IgY抗体的质控线、包被能与待检抗原CRP特异性结合的另一株CRP单克隆抗体的CRP检测线、以及包被能与待检抗原PCT特异性结合的另一株PCT单克隆抗体的PCT检测线。本发明专利技术的试纸条简化了普通试纸条的结构，通过去掉传统试纸条中荧光乳胶标记抗体得以固化的结合垫，将抗体改为固化在包被膜上，提高了测试的精密度，降低了试纸条成本。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种PCT与CRP定量联检免疫层析试纸条及其制备方法，所述试纸条包括底衬及设在所述底衬上的包被膜，所述包被膜上设有样品垫、包被线区和吸水纸，所述包被线区包括从靠近所述样品垫端至靠近所述吸水纸端依次平行设置的包被荧光胶乳标记抗体的标记线、包被鸡IgY抗体的质控线、包被能与待检抗原CRP特异性结合的另一株CRP单克隆抗体的CRP检测线、以及包被能与待检抗原PCT特异性结合的另一株PCT单克隆抗体的PCT检测线。本专利技术的试纸条简化了普通试纸条的结构，通过去掉传统试纸条中荧光乳胶标记抗体得以固化的结合垫，将抗体改为固化在包被膜上，提高了测试的精密度，降低了试纸条成本。【专利说明】PCT与CRP定量联检层析试纸条及其制备方法
本专利技术属于医学检验领域，具体地说，本专利技术涉及一种PCT与CRP定量联检层析试 纸条及其制备方法。
技术介绍
CRP是环状五球体蛋白，属于Oligomeric钙结合蛋白，相对分子质量约120000,由 5个相同的单体以非共价键构成，是炎性淋巴因子白介素_6、白介素-1、肿瘤坏死因子刺激 肝脏上皮细胞合成的。CRP在感染发生后6?8h即开始升高，24?48h达到高峰，高峰值 可达正常的数百倍，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。而CRP在病毒感染 时无显著升高，这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其重要的依据。 hsCRP(0. 1?10mg/L)对未来心血管疾病发生危险程度的预测：近年来，通过很多 前瞻性研究，已经对hsCRP的升高在心血管疾病包括冠心病、中风、外周血管疾病发病的危 险性方面的作用有所认识。hsCRP对于急性冠脉综合征的诊断也有十分重要的作用。 临床实验室CRP检测一直采用透射免疫和散射免疫方法，这些方法的参考值范围 变动很大，从3mg/L到超过200mg/L。随着人们对于低水平CRP与心血管疾病关系的认识， 这些测定方法的灵敏度远远不能满足要求。 降I丐素原（procalcitonin,PCT)是1992年发现的人类降I丐素的前体物质，无激素 活性，是由116个氨基酸残基组成，相对分子量为13kD的糖蛋白。 PCT能有效地反映感染导致的炎症损伤程度，具有高灵敏度、特异性。它在细菌或 真菌感染合并严重全身系统反应或器官低灌注时显著升高，而在病毒或局灶感染时水平正 常或轻度升高。这个特性使得PCT用来鉴别系统感染和非感染性炎症或局灶感染。此外， PCT还可用来判断治疗的有效性、疾病的严重程度和预后。 健康成人的PCT浓度〈0.lng/ml，严重全身感染者血PCT在24h内可升高达1000 倍。脓毒症时一般PCT升高且>2ng/ml，通常PCT>5ng/ml提示重症感染，包括免疫抑制患者 如艾滋病人群，高浓度的PCT、特别是抗生素治疗后无下降者常提示预后不良。 目前PCT检测方法有： 1、放射免疫学分析法--该方法能检测正常人的血清PCT，可靠敏感度为4pg/ml， 但该法检测耗时长（19?22h)，而且有放射性元素的污染，使得使用受到限制。 2、双抗夹心免疫化学发光法--该法操作简便，特异性强，敏感性高，测定的低限 值为0·lng/ml，2h可以出结果。 3、金标法--该法具有快速简便，易观察的特点。但是灵敏度不高。 4、透射免疫浊度法--该测定方法简便、快速，可自动化，适合于批量检测，但是 免疫透射比浊的方法学及临床应用尚需做进一步的验证。 PCT是特异性较高的早期细菌感染标志物，可较好地区别细菌感染与非细菌感染。 CRP测定虽有助于感染性疾病的早期诊断，但单独测定不能确定诊断。PCT与CRP联合检测 可提高敏感性和特异性，减小误诊率。 何静发表在"检验医学与临床"的文章"联合测定血清PCT与CRP对感染性疾病的 诊断价值"，研究对90例感染性患者PCTXRP的含量变化进行检测，结果显示细菌感染组与 病毒感染组比较，PCT水平明显升高，而且重症细菌感染组与一般细菌感染组比较，PCT浓 度亦有明显增加。血中PCT的升高可能与细菌内毒素可刺激机体，诱导体内甲状腺外组织 产生大量PCT有关。细菌感染组的PCT与CRP之间存在正相关，这说明细菌感染引起CRP 改变的同时，也会引起PCT的改变，而病毒感染组中PCT与CRP之间无相关性，表明病毒能 刺激机体CRP合成增多，而不能诱导PCT合成。 戴佩佩发表在"检验医学"的文章"降钙素原与C反应蛋白联合检测在细菌感 染中的应用"，研究对ICU的60例细菌感染患者PCT、CRP的含量及动态变化进行检测，以 PCT>0. 5ng/ml为界，诊断细菌感染的敏感性为96. 7% (58/60)，特异性为85. 3% (29/34)， 阳性预测值92. 1 % (58/63)，阴性预测值93. 5% (29/31);以CRP>8mg/L为界，诊断细菌感 染的敏感性为96. 7% (58/60)，特异性为73. 5% (25/34)，阳性预测值86. 6% (58/67)，阴 性预测值92. 5% (25/27)。PCT在敏感性与CRP相差不大的情况下，特异性却显著高于CRP。 同时测定血CRP和PCT有助于提高细菌感染性疾病早期判断的特异性，对抗菌药物应用有 一定的参考价值。在局部感染时，PCT-般轻度升高，而CRP升高相对明显，在没有全身表 现的感染时，CRP可能是一个重要的观察指标。 然而，目前市面上仅有南京基蛋生物科技有限公司专利技术的定性用的PCT/CRP联合 检测免疫层析试纸条（申请号为201210212105. 4)，采用胶体金作为标记抗体的载体，来检 测人全血、血浆、学清中的PCT和CRP。该试纸条采用的是定性的方法，只能给出阴性和阳性 判断，无法给出明确的定量结果。方法学采用胶体金，灵敏度低。且试纸条的结构复杂：包 括底衬、顺次搭接粘贴的样品垫、聚酯膜、包被膜和吸水纸。 另外，现有技术中还公开了一种PCT与CRP联合检测用上转发光材料（UCP)试纸 条（申请号为201310257936. 8)，该试纸条包括试纸条底衬，以及试纸条底衬上顺次相互搭 接粘贴的样品垫、涂覆有UCP生物标记物抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有一 条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，包被膜上还设有与所述控制线平行的两条检测线，分别 包被能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体；所述UCP 生物标记物抗体有两种，分别为上转发光材料（UCP)标记的能与待检抗原PCT特异性结合 的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体。该试纸条结构复杂：包括底衬、顺次搭接粘贴 的样品垫、聚酯膜、包被膜和吸水纸。且该试纸条采用的也是定性的方法，只能给出阴性和 阳性判断，无法给出明确的定量结果。 本专利技术专利技术人经过反复试验发现，当用普通的荧光胶乳定量层析检测试纸条的结 构套在PCT与CRP双项联检上时，CRP的线性范围只能达到0.l-40mg/L，同时CV值大于5， 而正常检测要求CRP的线性范围必须是0.l-150mg/L，正常情况下CV值小于5,目前已控制 到3以内；且使用普通结构的试纸条实现本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种PCT与CRP定量联检免疫层析试纸条，其特征在于，包括底衬及设在所述底衬上的包被膜，所述包被膜上设有样品垫、包被线区和吸水纸，所述包被线区包括从靠近所述样品垫端至靠近所述吸水纸端依次平行设置的、且相互间隔的包被荧光胶乳标记有CRP单克隆抗体、PCT单克隆抗体和羊抗鸡IgY抗体的标记线、包被鸡IgY抗体的质控线、包被能与待检抗原CRP特异性结合的另一株CRP单克隆抗体的CRP检测线、以及包被能与待检抗原PCT特异性结合的另一株PCT单克隆抗体的PCT检测线。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：戴旭青，黄春荣，李凯，唐时幸，王继华，
申请(专利权)人：广州万孚生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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