【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子检测中的核酸样本处理领域，特别是涉及一种通用样本的核酸释放剂以及快速释放核酸的方法。
技术介绍
1、分子诊断技术是一种基于待测物核酸序列的检测技术，通过对待测的特异性核酸序列的识别，检测基因的存在、缺陷或表达异常。得到适合检测的核酸是分子诊断的关键步骤，核酸的质量与浓度直接影响诊断的准确性和灵敏度，核酸制备的速度也是限制诊断速度的重要环节。常规的核酸提取方法包括柱式提取法和磁珠提取法，费时长、需要专业操作，还需要离心机、核酸提取仪等特殊仪器。
2、基于恒温扩增体系的分子快检和分子家庭自检由于其简单易用、无需复杂仪器的特点逐渐受到关注并已在国内外进行应用。这就要求核酸样本的制备需要简单、快速、不依赖复杂仪器，同时核酸释放效率高、不对后续扩增反应产生抑制。市面上的核酸释放剂多为pcr技术开发，配方对恒温扩增兼容性不佳，对于恒温扩增反应有抑制或者核酸释放效率差，影响了整体检测的灵敏度，限制了分子快检的普及。
技术实现思路
1、基于此，本专利技术的目的在于提供一种通用的核酸释放剂，其具有常温释放、操作简单、释放速度快、不抑制后续核酸扩增反应、无需依赖仪器的特点，并且适配样本类型广泛、能够应用于多种核酸扩增技术。
2、为了达到上述专利技术目的，本专利技术包括如下技术方案。
3、一种核酸释放剂，包括如下组分：chelex-100、柠檬酸钠、氯化锂和水；所述chelex-100的质量体积分数为5％～40％，所述柠檬酸钠的浓度为0.1mm～1m
4、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为10％～40％。
5、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为15％～40％。
6、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为20％～40％。
7、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为20％～35％。
8、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为25％～30％。
9、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为22％～28％。
10、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为24％～26％。
11、在其中一些实施例中，所述chelex-100的质量体积分数为25％。
12、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.3mm～1mm。
13、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.4mm～1mm。
14、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.5mm～0.9mm。
15、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.5mm～0.7mm。
16、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.6mm～0.8mm。
17、在其中一些实施例中，所述柠檬酸钠的浓度为0.7mm。
18、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为3mm～10mm。
19、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为4mm～10mm。
20、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为5mm～9mm。
21、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为5mm～7mm。
22、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为6mm～8mm。
23、在其中一些实施例中，所述氯化锂的浓度为7mm。
24、在其中一些实施例中，所述核酸释放剂还包括：乙基苯基聚乙二醇(np-40)，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.1％～2.0％。
25、在其中一些实施例中，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.5％～1.8％。
26、在其中一些实施例中，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.8％～1.5％。
27、在其中一些实施例中，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.9％～1.4％。
28、在其中一些实施例中，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为1.0％～1.3％。
29、在其中一些实施例中，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为1.2％。
30、在其中一些实施例中，所述核酸释放剂的ph为10～12。
31、在其中一些实施例中，所述核酸释放剂的ph为10.5～11.5。
32、在其中一些实施例中，所述核酸释放剂由chelex-100、柠檬酸钠、氯化锂、乙基苯基聚乙二醇和水组成；所述chelex-100的质量体积分数为25％～30％，所述柠檬酸钠的浓度为0.5mm～0.7mm，所述氯化锂的浓度为5mm～7mm，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为1.0％～1.3％。
33、本专利技术还提供了一种从生物样本中快速释放核酸的方法，包括如下步骤：将待测生物样本与本专利技术所述核酸释放剂混匀，于常温下静置裂解2min～10min，待颗粒物充分沉降后，所得上清液即为释放后的核酸溶液。
34、在其中一些实施例中，所述待测生物样本与核酸释放剂的体积比为1：1-9。
35、在其中一些实施例中，所述待测生物样本与核酸释放剂的体积比为1：3-5。
36、在其中一些实施例中，所述待测生物样本是来自鼻拭子、咽拭子、肛拭子、痰液、唾液、血清、血浆、全血、尿液、粪便、肠道灌洗液、植物组织或动物组织的生物样本。
37、其中，如果待测生物样本是来自鼻拭子、咽拭子、肛拭子、痰液、唾液、血清、血浆、全血、尿液时，直接将样本与核酸释放剂按比例混匀，于常温下静置裂解2～10min，待颗粒物充分沉降后，所得上清液即为释放后的核酸溶液；对于粪便样本，先用10倍以上体积的无核酸酶水溶解稀释，取稀释后的液体样本与核酸释放剂按比例混匀，于常温下静置裂解2～10min，待颗粒物充分沉降后，所得上清液即为释放后的核酸溶液；对于植物种子、植物组织、动物组织等固体样本，先使用研磨器研磨至粉末状或泥状，取芝麻大小加入核酸释放剂，于常温下静置裂解2～10min，待颗粒物充分沉降后，所得上清液即为释放后的核酸溶液。
38、本专利技术提供的核酸释放剂，其主要成分包括chelex-100、氯化锂和柠檬酸钠。其中，chelex-100是一种阳离子螯合剂，包含配对亚氨基二乙酸离子(在结合多价金属离子过程中用作螯合基团)的苯乙烯二乙烯基苯共聚物，可以抑制样本中核酸酶的活性，保护核酸不被降解，同时，促进细胞膜破裂和蛋白质沉淀，帮助样本中核酸的释放；氯化锂是强脱水剂，可以从染色质中剥离蛋白，使蛋白质与核酸分离；柠檬酸钠可螯合溶液中的二价金属离子，抑制依赖于二价离子的核酸酶活性。在这三种主成分的协同配合下，本专利技术的核酸释放剂具有优异的裂解性能，核酸释放效率高，同时抑制效果低，不会对后续扩增反应产生抑制作用，对复杂体系的核酸扩增不产生干扰，极大地提高了灵敏度，且检测特异性好。
39、本专利技术的核酸释放剂本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种核酸释放剂，其特征在于，包括如下组分：Chelex-100、柠檬酸钠、氯化锂和水；所述Chelex-100的质量体积分数为5％～40％，所述柠檬酸钠的浓度为0.1mM～1mM，所述氯化锂的浓度为1mM～10mM。
2.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述Chelex-100的质量体积分数为15％～40％；和/或，
3.根据权利要求2所述的核酸释放剂，其特征在于，所述Chelex-100的质量体积分数为20％～40％；和/或，
4.根据权利要求3所述的核酸释放剂，其特征在于，所述Chelex-100的质量体积分数为20％～30％；和/或，
5.根据权利要求1-4任一项所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂还包括：乙基苯基聚乙二醇，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.1％～2.0％。
6.根据权利5所述的核酸释放剂，其特征在于，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.8％～1.5％。
7.根据权利要求1-4任一项所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂的pH为10～12。
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9.一种从生物样本中快速释放核酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：将待测生物样本与权利要求1-8任一项所述的核酸释放剂混匀，于常温下静置裂解2min～10min，待颗粒物充分沉降后，所得上清液即为释放后的核酸溶液。
10.根据权利要求9所述的从生物样本中快速释放核酸的方法，其特征在于，所述待测生物样本与核酸释放剂的体积比为1：1-9，优选为1：3-5；和/或，
...【技术特征摘要】
1.一种核酸释放剂，其特征在于，包括如下组分：chelex-100、柠檬酸钠、氯化锂和水；所述chelex-100的质量体积分数为5％～40％，所述柠檬酸钠的浓度为0.1mm～1mm，所述氯化锂的浓度为1mm～10mm。
2.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述chelex-100的质量体积分数为15％～40％；和/或，
3.根据权利要求2所述的核酸释放剂，其特征在于，所述chelex-100的质量体积分数为20％～40％；和/或，
4.根据权利要求3所述的核酸释放剂，其特征在于，所述chelex-100的质量体积分数为20％～30％；和/或，
5.根据权利要求1-4任一项所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂还包括：乙基苯基聚乙二醇，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓度为0.1％～2.0％。
6.根据权利5所述的核酸释放剂，其特征在于，所述乙基苯基聚乙二醇的体积浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷张梦雪，钟玥，王婉君，王汉明，杭跃航，
申请(专利权)人：广州万孚生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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