一种肉苁蓉多肽提取物、制备方法及其用途技术

本发明专利技术提供了一种从肉苁蓉中提取肉苁蓉多肽提取物的方法，及其由此方法获得的肉苁蓉多肽提取物和该肉苁蓉多肽提取物的用途。本发明专利技术利用肉苁蓉渣，经烘干粉碎，再经过碱溶酸沉法处理、酶解、超滤纯化，最终得到的分子量为500-10000道尔顿的肉苁蓉多肽，并对肉苁蓉多肽治疗癌症及癌症化疗引起的腹泻的功效进行研究。本发明专利技术提高了珍稀濒危药材肉从蓉的利用率，使其产生更高的经济价值，同时为广大肿瘤患者提供了一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻癌症化疗相关性腹泻并起化疗增效作用的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体涉及一种从肉苁蓉中提取肉苁蓉多肽提取物的方 法，及其由此方法获得的肉苁蓉多肽提取物和该肉苁蓉多肽提取物的用途。
技术介绍
肉灰蓉（Cistanche deserticola Y. C. Ma)是列当科（Orobanchaeceae)肉灰蓉 属（Cistanche)植物肉灰蓉干燥带鳞叶的肉质莖，叉名精舆、纵蓉、肉松蓉、地精、大芸，有 沙漠人参之美誉，始记载于《神农本草经》，列为上品，是常用中药之一，具有补肾壮阳、填 精补髓、养血润燥、悦色延年等功效。本属植物全球约18个种，我国约4个种1个变种，分 别为肉苁蓉、盐生肉苁蓉、管花肉苁蓉、白花盐肉苁蓉及沙苁蓉，除沙苁蓉外，其他4种主产 于我国西北各省区。 20世纪80年代初日本学者开始研究肉苁蓉的化学成分。到20世纪80年代后 期，国内学者开始研究我国产出的肉苁蓉的化学成分。随着提取分离和检测技术的飞速发 展，已分离得到苯乙醇苷类、环烯醚萜类、挥发性成分、木脂素类、多糖、生物碱等多种化学 成分。 现代药理学研究也证明肉苁蓉除具有补肾壮阳、润肠通便作用外，还具有抗衰老 的作用，并且没有发现不良反应。近年来肉苁蓉广泛应用于各类药品及保健品中。 肉从蓉传统的初加工方法有晾晒法、盐渍法、窖藏法等，这些方法费工费时，受自 然条件的影响，且质量不稳定，严重影响药材的利用率及疗效；并且，传统的初加工方法己 远远不能满足产地大量药材初加工的需要。因此，如何提高珍稀濒危药材肉从蓉的利用率， 使其产生更高的经济价值，是巫待解决的关键问题。 中国专利CN102349650A公开了 一种提高肉苁蓉有效成分溶出率的方法，该专利技术 主要通过新鲜的肉苁蓉经过快速清洗，然后切分、柠檬酸液浸泡、微波灭酶后，加入淀粉酶 和果胶酶进行酶解，然后加入助滤剂，对酶解液进行分离。该专利解决的技术问题是提高出 汁率，使出汁率由54%提高到65%，从而提高了肉苁蓉有效成分的溶出率，该专利没有给出 本专利技术肉苁蓉多肽及其制备方法的技术启示。 本专利采用塔克拉玛干沙漠优质肉苁蓉为原料，对其鲜药材进行剥皮处理，所得 的肉苁蓉皮进行干燥再采用乙醇进行提取，可以得到传统的化学成分；对果肉采用榨汁机 进行榨汁，得到水提取物；对榨汁后所得到的肉苁蓉渣进行烘干处理，粉碎成粉，再经过碱 溶酸沉法处理、酶解、超滤纯化，最终得到的分子量为500-10000道尔顿的多肽，并进行治 疗癌症及癌症化疗引起的腹泻功效的研究，以及与中国专利CN103585546A公开的中药组 合物配伍使用的研究。 目前癌症已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上 升的趋势。肿瘤患者进行化疗，虽然有一定的疗效，但化疗后大部分患者会出现不同程度的 副作用，其中化疗药单用或联合用均会引起患者腹泻等毒副反应，肿瘤化疗后腹泻又叫化 疗相关性腹泻。近年来随着化疗药物如5-氟尿嘧啶、紫杉烷类、羟基喜树碱、伊立替康、希 罗达等的面世及推广应用，化疗相关性腹泻的发生率逐年提高，而且若不进行积极治疗，易 导致患者脱水、营养不良、血清电解质紊乱、酸碱平衡失调等，不仅对机体的康复带来极大 的不利，也给周期性化疗带来一定的困难，因此对化疗相关性腹泻的有效治疗已成为肿瘤 患者整体治疗的重要组成部分。 目前尚无对抗癌症化疗具有减轻腹泻及增效作用的中成药，中国专利 CN103585546A公开的中药组合物在治疗癌症化疗引起的腹泻的作用机理不明确，药效不明 显，因此在此中药组合物的辅助下，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻 癌症化疗相关性腹泻并起化疗增效作用的药物组合物显得尤其重要。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的在于提供肉苁蓉多肽提取物、制 备方法及其用途。本专利技术提供的一种从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方法，包括以 下步骤： (1) 往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为8-10,在45-55°C下浸提时间40-60min，然后 离心处理，即得肉苁蓉蛋白； (2) 使用步骤（1)得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度5-9%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节 肉苁蓉蛋白反应体系的pH值至6. 0-7. 0,控制温度60-70°C，加入酶底比3. 0-4. 0%的酶解 蛋白酶，恒温搅拌酶解，酶解时间为3. 0-4. 0h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为碱性蛋白 酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、果胶酶和淀粉酶中的至少一种； (3) 对步骤（2)得到的酶解液进行12-17min的煮沸灭酶处理，冷却后使用2 mol/L的 HCL溶液调至pH值至中性，然后离心除去沉淀，取上清液，上清液含有肉苁蓉蛋白肽； (4) 将步骤（3)所得到的含有肉苁蓉蛋白肽的上清液，在温度为40-50°C，pH值 为7.0-9. 0,压力为0.7-0. 9MPa下，选择500Da和IOOOODa的超滤膜对肉苁蓉蛋白肽中 500-10000Da分子量的肉苁蓉多肽进行分离，获得分离液，60°C下浓缩得到相对密度为 1. 20的浸膏，即为肉苁蓉多肽提取物。 进一步地，本专利技术提高了一种最优的从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方 法，包含以下步骤： (1) 往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为9,在50°C下浸提时间50min，然后离心处理， 即得肉苁蓉蛋白； (2) 使用步骤（1)得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度7%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节肉 苁蓉蛋白反应体系的pH值至6. 5,控制温度65°C，加入酶底比3. 5%的酶解蛋白酶，恒温搅 拌酶解，酶解时间为3. 5h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为木瓜蛋白酶； (3) 对步骤（2)得到的酶解液进行15min的煮沸灭酶处理，冷却后使用2 mol/L的HCL 溶液调至pH值至中性，然后离心除去沉淀，取上清液，上清液含有肉苁蓉蛋白肽； (4) 将步骤（3)所得到的含有肉苁蓉蛋白肽的上清液，在温度为45°C，pH值为8. 0,压 力为0. 8MPa下，选择500Da和IOOOODa的超滤膜对肉苁蓉蛋白肽中500-10000Da分子量的 肉苁蓉多肽进行分离，获得分离液，60°C下浓缩得到相对密度为1.20的浸膏，即为肉苁蓉 多肽提取物。 经过检测，上述方法获得的肉苁蓉多肽提取中的活性多肽的含量为99%，活性多肽 的分子量范围在500-10000道尔顿之间。 本专利技术的第二个目的是提供一种按照上述方法从肉苁蓉粉获得的肉苁蓉多肽提 取物，肉苁蓉多肽提取物中含有肉苁蓉多肽99%，并且肉苁蓉多肽的分子量在500-10000 道尔顿之间。 本专利技术的第三个目的在于提供肉苁蓉多肽提取物在用于制备治疗癌症药物中的 用途。 本专利技术的第四个目的在于提供肉苁蓉多肽提取物在用于制备治疗癌症化疗引起 的腹泻的药物中的用途。 进一步的，所述的药物为由如下重量份的原料组成的组合物：肉苁蓉多肽提取物 5-16份、山楂7-9份、红曲5-8份、莱菔子6-14份、黄连3-9份、绞股蓝5-9份、桂花5-12 份、三七5-14份、丹参8-12份、黄芪9-15份、砂仁6-14份、黄芩4-6份、飞仙藤6-12份、蔷 薇根5-12份、干姜5-9份和荜拔6-10份。 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方法，其特征在于，包含以下步骤：（1）往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为8‑10，在45‑55℃下浸提时间40‑60min，然后离心处理，即得肉苁蓉蛋白；（2）使用步骤（1）得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度5‑9%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节肉苁蓉蛋白反应体系的pH值至6.0‑7.0，控制温度60‑70℃，加入酶底比3.0‑4.0%的酶解蛋白酶，恒温搅拌酶解，酶解时间为3.0‑4.0h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、果胶酶和淀粉酶中的至少一种；（3）对步骤（2）得到的酶解液进行12‑17min的煮沸灭酶处理，冷却后使用2 mol/L的HCL溶液调至pH值至中性，然后离心除去沉淀，取上清液，上清液含有肉苁蓉蛋白肽；（4）将步骤（3）所得到的含有肉苁蓉蛋白肽的上清液，在温度为40‑50℃，pH值为7.0‑9.0，压力为0.7‑0.9MPa下，选择500Da和l0000Da的超滤膜对肉苁蓉蛋白肽中500‑10000Da分子量的肉苁蓉多肽进行分离，获得分离液，60℃下浓缩得到相对密度为1.20的浸膏，即为肉苁蓉多肽提取物。

【技术特征摘要】
1. 一种从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方法，其特征在于，包含以下步骤： (1) 往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为8-10,在45-55°C下浸提时间40-60min，然后 离心处理，即得肉苁蓉蛋白； (2) 使用步骤（1)得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度5-9%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节 肉苁蓉蛋白反应体系的pH值至6. 0-7. 0,控制温度60-70°C，加入酶底比3. 0-4. 0%的酶解 蛋白酶，恒温搅拌酶解，酶解时间为3. 0-4. 0h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为碱性蛋白 酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、果胶酶和淀粉酶中的至少一种； (3) 对步骤（2)得到的酶解液进行12-17min的煮沸灭酶处理，冷却后使用2 mol/L的 HCL溶液调至pH值至中性，然后离心除去沉淀，取上清液，上清液含有肉苁蓉蛋白肽； (4) 将步骤（3)所得到的含有肉苁蓉蛋白肽的上清液，在温度为40-50°C，pH值 为7. 0-9. 0,压力为0. 7-0. 9MPa下，选择500Da和lOOOODa的超滤膜对肉苁蓉蛋白肽中 500-10000Da分子量的肉苁蓉多肽进行分离，获得分离液，60°C下浓缩得到相对密度为 1. 20的浸膏，即为肉苁蓉多肽提取物。2. 如权利要求1所述的一种从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方法，其特征在 于，包含以下步骤： (1) 往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为9,在50°C下浸提时间50min，然后离心处理， 即得肉苁蓉蛋白； (2) 使用步骤（1)得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度7%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节肉 苁蓉蛋白反应体系的pH值至6. 5,控制温度65°C，加入酶底比3. 5%的酶解蛋白酶，恒温搅 拌酶解，酶解时间为3. 5h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为木瓜蛋白酶； (3) 对步骤（2)得到的酶解液进行15...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙喜翠，
申请(专利权)人：北京京隆卓尚投资有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11