本发明专利技术涉及BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物及其制备方法和应用。所述纳米颗粒复合物包含BDNF基因物质和聚阳离子，所述的聚阳离子是聚精胺咪唑-4,5-二亚胺或聚精胺咪唑-4,5-二酰胺，所述的聚阳离子与BDNF基因物质的质量比为1~100。本发明专利技术的纳米颗粒复合物毒性小、转染效率高，可以在体内循环过程中兼顾到达靶细胞之前的稳定性和进入靶细胞之后的生物响应性，聚阳离子自身可在体内完成无毒化的代谢，因此可通过颅内局部注射用于帕金森病及其并发症的治疗。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物及其制备方法和应用。所述纳米颗粒复合物包含BDNF基因物质和聚阳离子，所述的聚阳离子是聚精胺咪唑-4,5-二亚胺或聚精胺咪唑-4,5-二酰胺，所述的聚阳离子与BDNF基因物质的质量比为1~100。本专利技术的纳米颗粒复合物毒性小、转染效率高，可以在体内循环过程中兼顾到达靶细胞之前的稳定性和进入靶细胞之后的生物响应性，聚阳离子自身可在体内完成无毒化的代谢，因此可通过颅内局部注射用于帕金森病及其并发症的治疗。【专利说明】BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及非病毒基因载体
，具体地说，涉及BDNF基因-聚阳离子纳米 颗粒复合物及其制备方法和应用。
技术介绍
在基因治疗的发展过程中，基因运载系统即基因载体的研究始终是人们关注的焦 点，基因载体能否安全有效地运载基因到指定地点是基因治疗是否能在临床上应用的关键 所在。基因载体可分为病毒型载体和非病毒型载体两大类。虽然目前使用最多的仍然是病 毒型载体，其转染效率可达90%以上，但病毒载体存在自身难以克服的局限性，如能诱导宿 主免疫反应及潜在的致癌性，制备复杂，而且所能装载的外源DNA大小有限，使其应用受到 很大限制。于是，人们开始着眼于非病毒型载体的研究。目前已有的非病毒型载体介导基因 转染的方法有裸DNA注射、磷酸钙介导、电转移法、阳离子脂质体及阳离子聚合物介导等， 前三者虽然没有病毒载体的缺点，但转染效率不尽如人意。阳离子脂质体转染效率较高、重 复性好，但转染时需除血清，体内不稳定一直是困扰医学界的难题。从目前发展趋势看，阳 离子聚合物载体在基因转移方面呈现显著优势。 阳离子聚合物又称聚阳离子，种类很多，目前研究较多的有多肽类：聚赖氨酸、 聚谷氨酸及其衍生物；多聚胺类：聚乙烯亚胺、聚丙烯亚胺树状物；聚甲基丙烯酸类：聚酰 胺-胺型树状物、聚甲基丙烯酸乙酯2 - (二甲胺);以及一些天然高分子如壳聚糖、明胶等。 这些聚合物结构上的一个共同特点是分子内含有许多氨基，在生理PH下会发生质子化，这 些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷，使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对 较小的DNA粒子，或将目的基因包裹在其中，使DNA免受核酸酶的降解，它们可以作为基因 载体。 阳离子聚合物-DNA复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞，形成内 含体（endosome)，DNA从内含体释放，进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。 聚精胺咪唑-4，5-二亚胺（Polyspermine imidazole-4, 5-imine，PSI)结构式如 下： 【权利要求】1 一种BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，它包含仙即基因物质和聚 阳离子，所述的聚阳离子是聚精胺咪唑一4, 5一二亚胺或聚雛咪挫―4, 5-二酰胺，所述的 聚阳离子与BDNF基因物质的质量比为1〇~80。2. 根据权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，所述的 聚阳离子与M)NF基因物质的质量比为20~30。3. 根据权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米衝立复合物，斟寺征在于，它是由 以下方法制备得到的： 、_ 、 (1) 将聚阳离子溶液快速加入到相同体积的耶即基因溶液中，混合，匀； (2) 将混合溶液于室温下孵育20?30分钟，即得BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合 物。4. 根据权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，所述的 聚精胺咪唑-4，5-二亚胺结构式为：其中，n 为 400~1000。5. 根据权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，所述的 聚精胺咪唑-4，5-二酰胺结构式为：其中，n为400?1000。6. 根据权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，所述的 BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物的粒径为150?300纳米。 7?权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物的制备方法，其特征在于， 包括以下步骤： (1) 将聚阳离子溶液快速加入到相同体积的KINF基因溶液中，混合均匀； (2) 将混合溶液于室温下孵育20?30分钟，即得BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合 物。 8?根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于， 所述的聚精胺咪唑-4，5-二亚胺结构式为：所述的聚精胺咪唑-4，5-二酰胺结构式为：其中，n为400?1000。9. 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗 粒复合物的粒径为150?300纳米。10. 权利要求1所述的BDNF基因-聚阳离子纳米颗粒复合物在制备治疗帕金森病或异 动症药物中的应用。【文档编号】A61K9/14GK104225626SQ201410507653【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日 【专利技术者】刘振国, 袁伟恩, 原明璐, 车俊怡 申请人:上海交通大学医学院附属新华医院本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种BDNF基因‑聚阳离子纳米颗粒复合物，其特征在于，它包含BDNF基因物质和聚阳离子，所述的聚阳离子是聚精胺咪唑‑4, 5‑二亚胺或聚精胺咪唑‑4, 5‑二酰胺，所述的聚阳离子与BDNF基因物质的质量比为10~80。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘振国，袁伟恩，原明璐，车俊怡，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属新华医院，
类型：发明
国别省市：上海;31
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