Linc-RAM在治疗肌肉疾病中的用途制造技术

本发明专利技术涉及Linc-RAM在治疗肌肉疾病中的用途。具体地，本发明专利技术涉及Linc-RAM在制备治疗肌肉疾病，特别是肌肉损伤和横纹肌肉瘤的药物中的用途。本发明专利技术还涉及Linc-RAM制备促进肌肉干细胞分化的药物中的用途，制备促进成纤维细胞转变为成肌细胞试剂及药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及。具体地，本专利技术涉及Linc-RAM在制备治疗肌肉疾病，特别是肌肉损伤和横纹肌肉瘤的药物中的用途。本专利技术还涉及Linc-RAM制备促进肌肉干细胞分化的药物中的用途，制备促进成纤维细胞转变为成肌细胞试剂及药物中的用途。【专利说明】L i nc-RAM在治疗肌肉疾病中的用途
Linc-RAM是本专利技术人首次鉴定并对其功能和分子机制进行研究，本专利技术涉及 Linc-RAM在治疗肌肉疾病，特别是肌肉损伤和横纹肌肉瘤的作用。
技术介绍
骨骼肌是人体最大的组织器官，约占体重的40%，在生物体的生命活动中起着非 常重要的作用。它不仅发挥运动和支持的功能，同时它也是一个重要的代谢器官。身体所 摄取的糖和脂类物质大多在骨骼肌中代谢产生能量，这对维持整个身体的平衡状态起着非 常重要的作用。骨骼肌的发生是一个有序和严格调控的过程，不仅受各种肌肉特异性转录 因子的调控，同时受到ncRNAs以及染色质修饰和重塑等表观遗传的精细调控。 在众多的肌肉疾病中，如周期性瘫痪、肌营养不良、肌炎等都存在不同程度的肌肉 损伤，目前的治疗药物较少、副作用较大，效果较差。如杜氏肌营养不良症（DMD)，是一种性 联隐性遗传病，又名为假性肥大型肌肉萎缩症，为症状最严重的肌肉萎缩症。由于基因突 变缺陷导致肌肉细胞不能正常产生一种称为抗肌萎缩蛋白（Dystrophin)的蛋白质，会使 钙离子渗入细胞，引发瀑布反应，导致患者全身肌肉无力，又因肌肉细胞内缺少抗肌萎缩蛋 白，导致细胞组织肌肉纤维变得无力且脆弱，其肌细胞不断地处于损伤修复过程中,经长期 的伸展后该缺失肌肉细胞组织将产生机械性伤害等因素而破坏，最终导致肌肉细胞死亡。 全球平均每3500个新生男婴中就有一人罹患此病，患者在学龄前就会因骨骼肌不断退化 出现肌肉无力或萎缩，导致不便行走。大概在7岁到12岁时，会彻底丧失行走能力，通常到 20多岁就会因为心肌、肺肌无力而死亡。目前针对该病，医学界尚无有效疗法。 近年来，将成体干细胞植入DMD肌肉疾病的小鼠体内，取得显著治疗效果， 参见 Benchaouir R，Meregalli M，Farini A，D'Antona G，Belicchi M，Goyenvalle A, Bat t i ste 11 i M,Bresolin N,Bottinelli R,Garcia L, Torrente Y.Cell Stem Cell. Restoration of human dystrophin following transplantation of exon-skipping-engineered DMD patient stem cellsinto dystrophic mice. 2007, 1 (6) :646-57。但是成肌细胞移植治疗存在着排异反应以及差的细胞生存率等 局限性，Partridge TA. Cells that participate in regeneration of skeletal muscle. Gene Ther. 2002, 9(11) :752-3。利用基因治疗将肌萎缩蛋白（Dystrophin)导入患者体内， 使之表达肌萎缩蛋白，具体实施非常困难，主要是因为携带DNA片段较大且要将它们置于 大基因组的正确的位置，且外源DNA需先转录mRNA后再翻译为目的蛋白，此过程会受到体 内各种机制的调节和影响。因而寻找到直接用于基因治疗的核酸类药物更容易治疗或缓解 疾病的效果。 此外，横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma)是发生自胚胎间叶组织的一种恶性肿 瘤，其细胞类似于成肌细胞（myoblast)，大多数的横纹肌肉瘤细胞表达生肌决定因子 (myogenic differentiation l，MyoD)，然而横纹肌肉瘤细胞却不具备从增殖至终末分化 的能力，因而无限增殖，形成恶性肿瘤。横纹肌肉瘤占儿童实体肿瘤的15%，软组织肉瘤的 50%。临床表现的多样性、病理改变的多重性以及发病部位的不同，使横纹肌肉瘤成为小儿 肿瘤中最复杂的一种。横纹肌肉瘤分成以下4种亚型：胚胎型、腺泡型、葡萄簇型和多形型。 早期的根治性手术方法包括截肢、骨盆及眼眶肿瘤剜除术。在过去的几十年里，针对肿瘤的 不同发生部位及其扩展的范围采用化疗、放疗与手术相结合的措施，患者的生存率有了显 著地提高，由于横纹肌肉瘤的治疗具有特征性，即外科及放射的局部治疗往往达不到长期 生存的目的，只有应用全身性化疗才能明显提高生存率，这种全身性的化疗对人体产生极 大的危害。 因此，寻找抑制横纹肌肉瘤细胞增殖，且降低对病人身体伤害的药物成为当今癌 症治疗的研究热点，目前，已有报道表明anti-miR-122在美国已经获准进入临床治疗肝 癌，提示越来越多的核酸类药物进入临床应用的可能性，且核酸类药物因其自身的使用方 便，容易大量生产，特异性强等特点，为临床用药的选择提供了潜能。 长链非编码RNA(long non-coding RNA, IncRNA)广泛存在于各种生物体中， 参见 Stefani G, Slack FJ_ Small non-coding RNAs in animal development· Nat Rev Mol Cell Biol. 2008,9(3):219-30。绝大多数由RNA聚合酶II转录并经可变剪接而来。 IncRNA是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形 式在多种层面上，如表观遗传调控、参见Mazo A, Hodgson JW，Petruk S，Sedkov Y, Brock HW. Transcriptional interference:an unexpected layer of complexity in gene regulation. J Cell Sci. 2007, 120(Pt 16):2755-61 ；Katayama S, Tomaru Y, Kasukawa T, ffaki K, Nakanishi M, Nakamura M, et al.Antisense transcription in the mammalian transcriptome. Science, 2005, 309 (5740) : 1564-6。转录调控以及转录后调控等调控基因 的表达水平。 最近的研究表明，一些IncRNAs参与调控骨骼肌发育过程中重要的转录因子 和信号分子的表达，从而调控骨骼肌细胞的增殖和分化。如，Myostain处理小鼠后， Malatl在腓肠肌中的表达水平显著下调，进一步研究发现在C2C12细胞和原代骨骼肌 细胞分化时Malat 1 mRNA的表达上调，敲除Malat 1后，细胞增殖受到抑制，参见Watts R, Johnsen VL, Shearer J, Hittel DS Myostatin-induced inhibition of the long noncoding RNA Malatl is associated with decreased myogenesis. Am 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长链非编码RNA分子在制备治疗肌肉疾病的药物中的用途，所述长链非编码RNA分子选自Linc‑RAM。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱大海，于潇华，张勇，李婷婷，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11