新的G蛋白偶联受体蛋白及其用途制造技术

本发明专利技术涉及新的GPCR(G蛋白偶联受体)蛋白和编码该蛋白的基因，以及所述蛋白和基因的新用途。具体而言，本发明专利技术涉及新的GPCR多肽、编码所述多肽的多核苷酸、携带所述多核苷酸或者其片段的重组载体、用所述载体转化的宿主细胞及转基因动物。此外，本发明专利技术涉及：用于检测癌症标志物的组合物，其包含能测量所述新的GPCR基因的mRNA或者蛋白水平的试剂；包含所述组合物的、用于诊断癌症的试剂盒；以及检测新的GPCR多肽及编码该新的GPCR多肽的基因的方法。并且，本发明专利技术涉及用于治疗及预防癌症的组合物以及筛选新的GPCR调节剂或者癌症治疗剂的方法，所述组合物包含，抑制GPCR的表达或者活性的试剂。

【技术实现步骤摘要】
新的G蛋白偶联受体蛋白及其用途
本专利技术涉及新的G蛋白偶联受体(Gprotein-coupledreceptor,GPCR)蛋白和编码该蛋白的基因，以及所述蛋白和基因的新用途。具体而言，本专利技术涉及新的GPCR多肽、编码所述多肽的多核苷酸、携带所述多核苷酸或者其片段的重组载体、用所述载体转化的宿主细胞及转基因动物。本专利技术还涉及用于检测癌症标志物的组合物，所述组合物包含，能测量本专利技术GPCR多核苷酸的mRNA或者蛋白表达水平的试剂；包含所述组合物的、用于诊断癌症的试剂盒；以及检测本专利技术的GPCR多肽及编码所述GPCR多肽的基因的方法。此外，本专利技术涉及用于治疗及预防癌症的组合物，其包含抑制编码本专利技术的GPCR多肽的基因表达的寡核苷酸或抗本专利技术GPCR蛋白的抗体；以及筛选本专利技术的GPCR的调节剂或者癌症治疗剂的方法。
技术介绍
人类细胞在其表面存在多种受体。特别是，G-蛋白偶联受体(G-proteincoupledreceptor，下文简称为“GPCR”或者“GPCRs”)是最大的跨膜受体蛋白家族之一。人类基因组内存在约30,000个人类基因，发现其中多达1,000个基因编码GPCRs。最近，基于对脊椎动物基因组所进行的研究，已将GPCR分为5类。第一类包含视紫红质受体家族，其包含670种受体蛋白。视紫红质受体家族可以与各种配体反应，包括胺(α基团)、肽(β基团)、脂类样物质(γ类)、核苷酸和糖蛋白(δ基团)，并且包含多个药物靶受体。第二类为胰泌素受体家族，并具有肽激素的结合结构域。该家族的受体与稳态有关，从而成为药物开发的重要靶标。第三类称为粘着受体家族，其特征在于具有GPCR蛋白水解位点(GPCRProteolyticsite,GPS)。该家族的GPCR成员的N-末端部分有很多种，人们对其配体的了解非常少，因此还没开发靶向该家族GPCR成员的药物。第四类为谷氨酸(Glutamate)受体家族，其中已经鉴定了22个GPCR成员。关于各个蛋白特异性，了解的相对很少。最后一类为Frizzled/Taste2家族，其包括：将Wnt糖蛋白作为配体的10个Frizzled；不需要配体的5个SMO(光滑的)；以及感知各种味道所需的25个Taste2受体。还基于内源配体的鉴定，对包括GPCRs在内的受体进行分类。受体与已知的内源化合物结合，或者被分类为内源配体还未得到鉴定的孤儿受体(orphanreceptor)。多种组织及细胞类型中发现了GPCRs，并且其与多种不同的生理机制有联系。它们被多种配体激活，例如，诸如促甲状腺刺激激素(PTH)、促肾上腺皮质激素、胰高血糖素以及后叶加压素等的激素；诸如5-HT、乙酰胆碱(毒蕈碱性AchR)、组织胺等的胺；诸如LPA和S1P等的脂质；以及诸如氨基酸、Ca2+、核酸、肽和光等的信号递质。GPCRs所发挥作用的广泛分布与多样性，是GPCRs在多种病理学疾病中发挥重要的作用证据。实际上，已知GPCRs与多种疾病有关，包括支气管收缩、高血压、糖尿病、炎症、激素失调、细胞死亡、癌症、神经传递障碍以及行为障碍等。从而，对于目前而言，GPCRs属于研发药物产品的重要领域。目前可用于药物研发的GPCR大约有360多种，其中46种已用于药物开发，而可探讨剩余的约320种基因的药物开发。推测有约150种孤儿GPCRs(orphanGPCRs,oGPCRs)。在新药开发领域中，细胞膜受体充当药物的选择性位点，并且占所有药物靶标的50％(NatureReviewsDrugDiscovery,2004.2008)，尤其是GPCR活性调控药物在最频繁使用的前100名药物中占30％(400亿美元，总药物市场的9％)。因此GPCR为新药开发的最重要的目标(NatureReviewsDrugDiscovery,2004,2008)。GPCRs具有共同的结构特征。所有的这些受体都具有七个疏水跨膜结构域，每个结构域的长度为20～30个氨基酸，并且所述7个疏水跨膜结构域通过多种长度的氨基酸序列连接。受体具有细胞外N末端，而C末端则位于细胞质中。GTP-结合蛋白(G蛋白)起到下述的媒介作用：将通过结合激素和刺激GPCR的其他化学配体所生成的信号向细胞内效应子传递。配体与GPCR结合之后，受体的分子内结构域经历能够使受体与G蛋白相互作用的构象变化，这反过来激活细胞内信号递质，如腺苷酸环化酶(adenylatecyclase)、磷脂酶C(phospholipaseC)或者离子通道(ionchannel)。这种系统对于一个配体结合于GPCR的情况做出反应，使得原来的信号放大至能够产生较多的次级递质。细胞能够通过该机制探测它们的外部环境的变化，并对此做出适当反应。通常，受体被内源配体激活，同时伴随构像变化，并且能够实现受体和G-蛋白之间的结合。最近几年通过研究蛋白之间的相互作用，了解了下述的事实，即，GPCR与各种蛋白相关，如含有GRK或者SH2结构域(srchomology2domain，src同源性2结构域)的蛋白、连接子Grb2(adaptorGrb2)以及参与信号转导的G蛋白。在正常条件下，信号转导最终带来细胞激活或者细胞抑制的结果。在生理环境下，GPCRs以非活性和活性状态的平衡状态存在于细胞膜中。非活性状态的受体不能联合细胞信号转导途径，发挥生物反应。只有当受体的结构变为活性形式时，受体才能通过信号转导途径(通过G-蛋白)，显示生物反应。通过诸如内源配体或者药物等化合物，受体可以稳定为活性形式。从而，关于克隆这类基因家族以及鉴定它们的新的配体等的功能研究，具有与开发新的候选药物相同的意义，其中，新的候选药物是指如siRNA、抗体、多肽、效应子、激动剂以及拮抗剂等物质。对于生命体而言，生长、分化、稳态、对刺激的反应、细胞周期调控、老化以及凋亡等，主要是细胞内选择特定基因并表达的结果，这对于与疾病相关的细胞机制而言是真实的。尤其，如肿瘤发生等病理学现象，是由最终导致基因表达发生变化的基因突变诱导的。根据肿瘤发生的多种研究，得出下述现象，即，诸如染色体杂合性缺失(lossofchromosomalheterozygosity)、癌基因的激活以及包括p53基因在内的肿瘤抑制基因的失活等多种基因变化的积累，其结果就是产生肿瘤(Bishop,J.M.,Cell,64：249-270(1991))。进而，报告指出，10-30％的癌症是因下述原因发生的，即癌基因的扩增导致癌基因激活，从而发生癌症。从而，癌基因的激活对于多种癌症的病理学研究而言都是重要的。由此亟需鉴定癌基因并研发调控癌基因的方法。
技术实现思路
本专利技术人为鉴定癌基因而付出了努力，结果导致下述内容，从而完成本专利技术：克隆推断的孤儿GPCR基因，并且发现所述基因的超表达诱导肿瘤发生。本专利技术的目的在于提供由SEQIDNO:1或者2的氨基酸序列构成的GPCR(GProteinCoupledReceptor，G蛋白偶联受体)多肽。本专利技术的另一目的在于提供编码所述多肽的多核苷酸。本专利技术的再一目的在于提供携带所述多核苷酸或者其片段的重组载体。本专利技术的再一目的在于提供用所述载体转化的宿主细胞。本专利技术的再一目的在于提供代孕母体分娩的转基因动物，在所述代孕母体的子宫中，植入了所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，所述组合物包含抑制编码GPCR多肽的多核苷酸表达或抑制所述GPCR多肽活性的试剂，所述GPCR多肽由SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列构成。

【技术特征摘要】
2009.05.25 KR 10-2009-00455191.组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，所述组合物包含抑制编码GPCR多肽的多核苷酸表达的试剂，所述GPCR多肽由SEQIDNO:1或2的氨基酸序列构成，其中所述癌症选自胃癌、肝癌、结肠直肠癌、肾癌、前列腺癌、宫颈癌和肺癌，并且所述抑制多核苷酸表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑璟淑，元美善，安智苑，俞香淑，廉荣一，李熙龟，
申请(专利权)人：韩国生命工学研究院，
类型：发明
国别省市：韩国;KR