一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法技术

本发明专利技术涉及一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法，具体是利用超高效合相色谱法（UPC2）检测烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮等除草剂的方法。首先，利用QuRChERS方法对烟叶中含有的除草剂进行萃取及初步除杂；其次，为进一步减少基质对检测目标物的干扰，采用弗罗里硅土小柱对提取液进行固相萃取净化处理；第三，采用超高效合相色谱仪对除草剂进行检测，并通过外标法进行定量分析。高效合相色谱仪可以在5分钟之内即可完成所有目标物质的分析，在此过程中有机溶剂用量极少，是一种集高效、灵敏、环保等多种优点于一体的分析方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，具体是利用超高效合相色谱法（UPC2）检测烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮等除草剂的方法。首先，利用QuRChERS方法对烟叶中含有的除草剂进行萃取及初步除杂；其次，为进一步减少基质对检测目标物的干扰，采用弗罗里硅土小柱对提取液进行固相萃取净化处理；第三，采用超高效合相色谱仪对除草剂进行检测，并通过外标法进行定量分析。高效合相色谱仪可以在5分钟之内即可完成所有目标物质的分析，在此过程中有机溶剂用量极少，是一种集高效、灵敏、环保等多种优点于一体的分析方法。【专利说明】
本专利技术涉及一种利用合相色谱进行烟草中除草剂残留量的分析方法。
技术介绍
为保证烟草作物的生长，降低劳动力的投入，烟草种植户在烟草的生长过程中普遍采取喷施除草剂，由于这些物质在烟草的加工过程中不能完全除去，因此会在烟草点燃过程中进入到吸食者身体，或者散发到周围空气中进而危害周围人的健康。因此，对这类物质进行检测是保证烟草品质的重要内容之一。 目前，研究及应用的烟草中除草剂分析方法主要包括气相色谱以及高效液相色谱，其中气相色谱是比较常用的方法。由于色相色谱分析时间较长，高效液相色谱法需要用到大量的有机溶剂作为流动相。因此，研究运用更为快速、绿色、高选择性的分析方法有重要意义。
技术实现思路
本方法的目的正是基于上述现有技术状况而提供的一种，主要是先利用QuRChERS前处理技术以及固相萃取技术进行预处理，然后采用超高效合相色谱仪对除草剂进行检测，并通过外标法进行定量分析。本方法仪器分析快速，且有机溶剂用量极少，是一种集高效、灵敏、环保等多种优点于一体的分析方法。 本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的:，是对烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮六种除草剂残留的测定，首先利用乙腈对样品基质中残留的除草剂进行提取，加入一定量的硫酸镁、氯化钠、脱水柠檬酸三纳进行振荡，离心后吸取一定量的上清液进行氮吹浓缩，然后进行固相萃取对其进行净化处理，氮气吹干后利用乙腈溶剂进行复溶，过0.22 μ m有机相滤膜后，利用超高效合相色谱仪对其中的物质进行浓度分析，具体步骤如下:1)样品的提取:称取2.0 g已粉碎的烟草样品于50 mL具塞离心管中，加入10 mL超纯水，浸润样品，静置10 min，使其充分吸水溶胀；取10 mL乙腈到离心管中，于旋涡混合器上以2000 rpm速度振荡I min，把离心管放入-20° C冰箱冷冻10 min，防止下一步盐析作用时产热而造成的目标物分解；然后向离心管中加入盐析试剂包(含4 g无水硫酸镁，I g氯化钠，I g柠檬酸钠和0.5 g朽1檬酸氢钠),立即于旋润混合器上以2000 rpm振荡2 min,以5000 rpm离心3 min,取5mL上清液氮吹浓缩至I mL ；2)样品的固相萃取净化:为获得理想的除杂效果，将浓缩好的样品进行固相萃取净化处理，具体操作步骤分为:首先，利用6mL正己烷对弗罗里硅土小柱进行活化处理；其次，将上一步所获得的I mL浓缩液注入至弗罗里硅土小柱上；第三步，利用5 ml体积比为9:1的正己烷和丙酮的混合液对小柱进行洗涤，收集全部洗涤液；第四步，注入3 mL空气以排净小柱上残留的液体；3)浓缩、复溶及过滤:为使超高效合相色谱仪检测顺利进行，同时实现精确定量，样品溶剂需更换为I mL乙腈，具体的做法为:以氮吹仪对收集的洗脱液浓缩近干，然后加入ImL乙腈复溶，并利用 0.22 μ m有机相滤膜对样品进行过滤，作为样品待测液；4)标准工作溶液配制:配制的系列标准溶液浓度为:敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异噁草酮浓度分别为 0.05 μ g/mL、0.1 μ g/mL、0.25 μ g/mL、0.5 μ g/mL、1.0 μ g/mL、2.5 μ g/mL, 5 μ g/mL,异丙甲草胺浓度为 0.15 μ g/mL、0.3 μ g/mL、0.75 μ g/mL、1.5 μ g/mL、3.0 μ g/mL、7.5 μ g/mL、15 μ g/mL的系列标准溶液。具体配制方法如下:先配置六种除草剂单标储备液:分别准确称取10.0 mg (精确到0.1 mg)各标准品，置于六个10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，配制成质量浓度为1000.0 μ g/mL的单标储备液，贮存在-20 °C冰箱中备用。 混合标准工作溶液:分别取敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮单标储备液0.5、0.5、0.5、0.5、1.5、0.5 ml于100 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，配制成各农药组分质量浓度为5.0,5.0,5.0,5.0、15.0,5.0 μ g/mL的混合工作储备液，储存在4 °C冰箱中备用。 系列标准溶液配制:准确移取0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、l mL、2 mL、5 mL的混合标准工作溶液，置于10 mL容量瓶中，用乙腈定容，即得系列标准工作溶液。配制的系列标准溶液浓度为:敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异噁草酮浓度分别为0.05 μ g/mL、 0.1 μ g/mL、0.25 μ g/mL、0.5 μ g/mL、l.0 μ g/mL、2.5 μ g/mL, 5 μ g/mL,异丙甲草胺浓度为 0.15 μ g/mL、0.3 μ g/mL、0.75 μ g/mL、1.5 μ g/mL、3.0 μ g/mL、7.5 μ g/mL、15 μ g/mL 的系列标准溶液。 5)合相色谱分析采用超高效合相色谱仪对标准工作溶液和样品待测液进行浓度分析，紫外检测器进行检测，外标法定量； 色谱条件:采用色谱柱为Acquity UPC2 CSH Fluoro-Phenyl色谱柱；ABPR压力为1800Psi ;色谱柱温度为60 V ;进样量为5-10 μ L ;流动相分别为CO2 (流动相Α)和甲醇(流动相B)，流速为1.5 mL/min，流动相梯度洗脱程序如下表；紫外检测波长为210 nm ；6种目标物混合标准溶液的合相色谱图见附图2。 表I梯度洗脱程序—二氧化礙甲醇 C mi η ) (..toL/m i n J ■:A 7 %)(B / %) O1.599.90.1 5lTs9010 61757525 ο1.?>y y,.yU? I在上述合相色谱条件下，对本方法进行评价，各除草剂成分的线性方程、线性范围、相关系数、平均回收率、定量限等见表2。 表2含《色濟法柃剩?种除.的键能if价 __________除關_____________________________紐浦辦-平―第?^ (me/L) Λ CR )............................................................................................................................................................................................................本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法，是对烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮六种除草剂残留的测定，其特征在于：首先利用乙腈对样品基质中残留的除草剂进行提取，加入一定量硫酸镁、氯化钠、脱水柠檬酸钠及柠檬酸氢钠进行振荡，离心后吸取一定量的上清液进行氮吹浓缩，然后进行固相萃取对其进行净化处理，氮气吹干后利用乙腈溶剂进行复溶，过0.22 μm有机相滤膜后，利用超高效合相色谱仪对其中的物质进行浓度分析。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：唐纲岭，郭卫芸，边照阳，刘学功，李中皓，杨飞，刘珊珊，范子彦，张洪非，王颖，胡清源，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，许昌学院，
类型：发明
国别省市：河南;41