药用融合体和缀合物制造技术

本发明专利技术涉及药用融合体和缀合物，特别涉及具有改良的血清半衰期的药用融合体。这些融合体和缀合物包含多肽、免疫球蛋白(抗体)单个可变结构域和GLP和/或Exendin分子。本发明专利技术另外涉及包含这样的药用融合体和缀合物的应用、制剂、组合物和装置。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及药用融合体和缀合物，特别涉及具有改良的血清半衰期的药用融合体。这些融合体和缀合物包含多肽、免疫球蛋白(抗体)单个可变结构域和GLP和/或Exendin分子。本专利技术另外涉及包含这样的药用融合体和缀合物的应用、制剂、组合物和装置。【专利说明】药用融合体和缀合物本申请是申请日为2010年3月24日的中国专利申请201080023261.5“药用融合体和缀合物”的分案申请。
本专利技术涉及具有改良的血清半衰期的药用融合体和缀合物。这些融合体和缀合物包含免疫球蛋白(抗体)单个可变结构域和GLP和/或Exendin分子。本专利技术另外涉及包含这样的药用融合体和缀合物的应用、制剂、组合物和装置。
技术介绍
许多药物具有能用于治疗和/或诊断目的的活性，但由于给药时，它们迅速地从机体清除，因此具有有限的价值。例如，许多具有治疗用途活性的多肽通过肾脏迅速地从循环中清除。因此，为了获得想要的治疗效果，必须施用大剂量。需要具有改良的药代动力学性质的改良的治疗剂和诊断剂。 一类这样的在体内或体循环中具有短半衰期的药物是肠降血糖素激素诸如胰高血糖素-样肽I或肽YY以及Exendin,例如Exendin-4。 胰高血糖素-样肽(GLP)-1是肠降血糖素激素，具有有效的葡萄糖-依赖性的促胰岛素和胰高血糖素抑制(glucagonostatic)作用、对胰腺β细胞的营养作用和对胃肠分泌和运动的抑制作用，这些结合起来来降低血浆葡萄糖和减小血糖波动幅度。此外，通过其提高饱腹感的能力，GLP-1会降低摄食量，因此限制体重增加，甚至可以引起体重减轻。总之，这些作用会赋予GLP-1独特的特征，被认为用作抗糖尿病剂是相当理想的，特别是由于其抗高血糖作用的葡萄糖依赖性会使严重低血糖的任何风险最小化。然而，它的药代动力学/药效动力学特征使得天然GLP-1在治疗上是无用的。因此，尽管连续给药时GLP-1最有效，但是单次皮下注射具有短期效果。GLP-1对体内酶降解是高度敏感的，二肽基肽酶IV(DPP-1V)的裂解可能是最相关的，因为这快速发生，并产生非促胰岛素的代谢物。因此，基于对影响其代谢稳定性和药代动力学/药效动力学特征的因素的理解，利用GLP-1的治疗潜能的策略已经成为热切研究的焦点。 已经进行了广泛的工作，尝试以使其降解减缓同时仍然保持生物活性的方式抑制肽酶或修饰GLP-1。W005/027978公开了具有延长作用特征的GLP-1衍生物。W002/46227公开了异种融合蛋白，其包括与GLP-1或类似物融合的多肽(例如，白蛋白)(这些类似物的公开内容通过弓I用并入本文，作为可用于本专利技术中的GLP-1类似物的实例)。W005/003296、W003/06007UW003/059934公开了氨基融合蛋白，其中GLP-1已经与白蛋白融合，以尝试增加激素的半衰期。 然而，尽管这些努力，还是没有产生长效活性的GLP-1。 因此，特别是在糖尿病和肥胖症的领域中，存在对改良的GLP-1肽或其它药剂(诸如Exendin-4或PYY)的极大需要，它们同样具有促胰岛素效果，特别适于糖尿病和肥胖症的治疗。因此，需要修饰GLP-UExendin-4和其它促胰岛素肽，以提供更长的体内作用持续时间，同时维持它们的低毒性和治疗优势。
技术实现思路
本专利技术提供了一种组合物，其是融合体或缀合物，且其包含下述物质或由其组成: (a)促胰岛素药剂或分子，或肠降血糖素药物或分子，其可以是例如Exendin-4、PYY(例如3-26 PYY)或GLP-1 (例如GLP-1 (7-37) A8G突变体)，其作为与(b)的融合体或缀合物存在；(b)特异性地结合血清白蛋白(AlbudAbs TM)的dAb，其选自:(i)D0M 7h_14结构域抗体(dAb) (DOM 7h-14 的氨基酸序列如图 1(h):SEQ ID NO 8 所示)，(ii)DOM 7h_14_10 结构域抗体(dAb) (DOM 7h-14-10的氨基酸序列如图1(O):SEQ ID NO 26所示)，或与DOM7h-14-10 dAb的序列具有最多4个氨基酸差异的dAb ;和(iii)DOM 7h_ll_15 dAb (DOM7h-ll-15 的氨基酸序列如图 l(p):SEQ ID NO 27 所示)，或(iv)DOM 7h_14_10 R108C 结构域抗体(dAb) (DOM 7h-14-10的氨基酸序列如图1 (r)所示)。 氨基酸连接物或化学连接物也可以任选地存在，其连接促胰岛素药剂或肠降血糖素药物(例如 Exendin-4 和 / 或 GLP-1 或 PYY)和 dAb (例如 D0M7h_14 dAb,DOM 7h_14_10dAb,DOM 7h-ll-15 dAb)。所述连接物可以是例如螺旋连接物，例如图1 (k):SEQ ID NO 11所示的序列的螺旋连接物，或它可以是gly-ser连接物，例如具有在图1(1):SEQ ID NO 12中所示的氨基酸序列。 在某些实施方案中，本专利技术的融合体(或缀合物)可以另外包含分子，例如其它肽或多肽。 促胰岛素药剂或肠降血糖素药物(例如Exendin和/或GLP-1)可以作为与dAb的N-端或C-端的融合体(或缀合物)而存在。 在某些实施方案中，本专利技术提供了一种多肽，所述多肽包含选自下述的融合体分子或由其组成: (a)2xGLP-l(7-37)A8G D0M7h_14 dAb 融合体(DATO114，氨基酸序列如图1 (a):SEQID NO I所示) (b)Exendin4(G4S 连接物)3 D0M7h_14 dAb 融合体(DAT0115，氨基酸序列如图1(b):SEQ ID NO 2 所示)， (c)Exendin4-D0M7h-14 dAb 融合体(DAT0116，氨基酸序列如图1 (c):SEQ ID NO3所示)。 (d)Exendin4、螺旋连接物、D0M7h_14 dAb融合体(DAT0117，氨基酸序列如图1(d):SEQ ID NO 4 所示)。 (e) GLP-1 (7-37) A8G(G4S 连接物)3 D0M7h_14 dAb 融合体(DAT0118，氨基酸序列如图 1(e):SEQ ID NO 5 所示)， (f) GLP-1 (7-37) A8G D0M7h_14 dAb 融合体(DAT0119，氨基酸序列如图1 (f):SEQID NO 6 所示)， (g) GLP-1 (7-37) A8G、螺旋连接物、D0M7h_14 dAb 融合体(DAT0120，氨基酸序列如图 1(g):SEQ ID NO 7 所示)， (h)Exendin4、(G4S) 3、连接物 D0M7h-14_10 融合体(DMS7139，氨基酸序列如图l(m):SEQ ID NO 24 所示)， (i)Exendin4、(G4S) 3、连接物 D0M7h_ll_15 融合体(DMS7143，氨基酸序列如图l(n):SEQ ID NO 25 所示)。 本专利技术也提供了缀合物分子，其包含上述那些(即具有SEQ ID NO 1-7和SEQ IDNO 24-25所示的氨基酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种融合体或缀合物组合物，其包含下述物质或由其组成：(a) 促胰岛素药剂或肠降血糖素药物，其作为与(b)的融合体或缀合物存在； (b)结合血清白蛋白的dAb，其选自：(i) DOM 7h‑14结构域抗体(dAb) (DOM 7h‑14的氨基酸序列如图1(h): SEQ ID NO 8所示)，(ii) DOM 7h‑14‑10结构域抗体(dAb) (DOM 7h‑14‑10的氨基酸序列如图1(o):SEQ ID NO 26所示)，或与DOM 7h‑14‑10 dAb的序列具有最多4个氨基酸差异的dAb；和(iii) DOM 7h‑11‑15 dAb (DOM 7h‑11‑15的氨基酸序列如图1(p): SEQ ID NO 27所示)，或(iv) DOM 7h‑14‑10 R108C结构域抗体(dAb) (DOM 7h‑14‑10的氨基酸序列如图1(r)所示)。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：C赫林，LJ霍尔特，LS耶斯珀斯，S迈尔，M普佩卡斯维德，
申请(专利权)人：葛兰素集团有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB