一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法技术

本发明专利技术涉及一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，属于藻类繁育技术领域；包括种藻的采集和运输、种藻的暂养、种藻的预处理、生殖托的分离、诱导成熟、幼苗培育六个步骤，本发明专利技术方法改变传统将生殖托连同藻体一起养殖的方法，将生殖托分离成单个或单丛后再进行促熟培育，针对性更强，有利于生殖托的同步成熟，有利于精卵的大量集中排放，雌、雄生殖托可达到100%成熟、排卵、排精，减少了源于藻体的污染，减少了种藻浪费，提高了受精率和出苗率，幼苗生长速度快，成活率高，且方法简单。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，属于藻类繁育
；包括种藻的采集和运输、种藻的暂养、种藻的预处理、生殖托的分离、诱导成熟、幼苗培育六个步骤，本专利技术方法改变传统将生殖托连同藻体一起养殖的方法，将生殖托分离成单个或单丛后再进行促熟培育，针对性更强，有利于生殖托的同步成熟，有利于精卵的大量集中排放，雌、雄生殖托可达到100%成熟、排卵、排精，减少了源于藻体的污染，减少了种藻浪费，提高了受精率和出苗率，幼苗生长速度快，成活率高，且方法简单。【专利说明】
本专利技术涉及，具体涉及一种 将雷州马尾藻未成熟的生殖托分离，在一定条件下培养，实现雷州马尾藻雌雄生殖托同步 成熟，采集受精卵育苗的方法，属于藻类繁育
。
技术介绍
雷州马尾藻/eizAoweflse Tseng et Lu (1987)是我国的褐藻马尾藻 属的特有品种，藻体大型，生长快，主要分布在我国广东和海南海域，生长在低潮带及潮下 带岩石上。雷州马尾藻目前主要投喂给养殖鲍鱼食用，或用于提取褐藻胶、甘露醇和碘等 的原料，藻体干燥处理后还可生产饲料或饲料添加剂；另外该藻还具有开发功能食品、保健 品、化工产品、医药产品，用于生态修复、水质净化等的应用前景。近几年，人类活动对海洋 环境造成了较大破坏，海洋环境质量下降，海藻场日趋衰退，而作为重要工业原料的褐藻胶 需求量不断增加，依靠自然生长的藻场资源，已经不能满足人们的需求。目前，雷州马尾藻 的天然资源也因受到自然或人为因素地影响而逐年减少，开展人工养殖已迫在眉睫。 种苗生产是制约规模化人工养殖的关键环节，而集中采集大量健康受精卵是育苗 的第一步。目前对有关羊栖菜、鼠尾藻、铜藻、瓦氏马尾藻、硇洲马尾藻、莫氏马尾藻等马尾 藻属种类的育苗研究较多，国内对雷州马尾藻的研究也已经展开，除了对雷州马尾藻形态 结构、分类地位和分布的研究外，还对其育苗中杂藻防治及雌雄比、密度对其幼孢子体生长 的影响进行了研究，而关于诱导雷州马尾藻生殖托成熟育苗的方法未见报道。 生殖托作为雷州马尾藻的有性繁殖器官，其生长发育的好坏，直接关系到精卵排 放的数量与质量，从而影响繁殖的结果。目前马尾藻规模化繁育采集天然成藻进行采苗时， 通常藻体不予处理，容易污染幼苗；此外马尾藻存在多次放散精卵的特点，而生产中往往在 种藻第一次放散后便将种藻捞出，致使单位质量种藻的产苗率低，并造成大量种藻资源的 浪费。所以，开展离体生殖托诱导同步成熟育苗可避免以上弊端，具有重要的实践意义。 申请号为201310148775. 9的"一种瓦氏马尾藻人工苗种的繁育方法"的专利解决 的是繁育瓦氏马尾藻的人工苗种的问题。该方法采回的藻体雌、雄体数量难以确定，难以规 模化育苗，同时暂养时间比较长，用水量大，管理不方便，幼体受光不均匀，并容易被污染。 申请号为201310296487. 8的"一种瓦氏马尾藻组织培养育苗的方法"解决的是瓦氏马尾藻 无性繁殖育苗的问题。无性繁殖产生的子代不存在遗传变异或变异较小，而有性繁殖使个 体的基因发生变异。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种诱导雷州马尾藻生殖托同步成熟的育苗方法，将雷州马尾藻 未成熟的生殖托分离，在一定条件下，于过滤海水中培养，实现雷州马尾藻雌雄生殖托同步 发育、成熟及精卵集中排放，促熟、受精率可达100%。收集刚长出乳突状假根、自然脱落的受 精卵，在一定条件下培育，提高幼苗的生长速度及成活率。 为了解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案是： ，包括如下步骤： (1)雷州马尾藻种藻的采集和运输：在雷州马尾藻尚不成熟的冬季或春季，选择大潮 低潮期间采集已形成生殖托、健壮、杂藻少、侧枝多、成熟度较一致的雌雄种藻，装入整理 箱，采用湿运法运输至目的地。 (2)种藻的暂养：运回的雷州马尾藻种藻，先将雌、雄藻体分别暂养在用孔径 50 μ m滤网过滤的海水中，暂养条件：水温20-22 °C，盐度26-28，光照强度介于0-60 μ mol · nT2s4之间，充气使水呈沸腾、翻滚状，暂养3-7天。 (3)种藻的预处理：用过滤海水清洗藻体表面，除去杂藻和附着物。 (4)生殖托的分离：将预处理后的种藻先用消毒刀片分别切下雌、雄生殖托枝，并 用洁净的毛笔刷除生殖托表面的附着物，再用消毒刀片将生殖托分离成单个或单丛（3-5 个纯生殖托)。 (5)诱导成熟：在温度23°C?30°C、光照强度6(Γ160 μ--ο? .πιΛ-1、海水盐度26?34 范围内，于光照培养箱中将离体的雌雄生殖托1:1混合、静置培养，光周期设定为12L: 12D， 每天定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，每次摇动0. 5分钟，培养6-20天，雌、雄 生殖托100%成熟、排卵、排精。 (6)育苗：收集步骤（5)中自然脱落、刚长出乳突状假根的受精卵，在温度 20-30°C，盐度26-34,光照强度80 μ mol · πιΛ-1，光周期12L : 12D的条件下，静置培养，每天 定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，每次摇动0. 5分钟，培养18天，获得体长达 7. 1-8. 4mm，具有2-3个藻叶的幼苗。 与现有技术相比，本专利技术具有以下优点： (1)本专利技术方法改变传统将生殖托连同藻体一起养殖的方法，将生殖托分离成单个或 单丛，雌、雄生殖托混合诱导成熟，提高了生殖托的成熟度，使精卵大量集中放散，减少了藻 体给采苗带来的污染，减少了对种藻资源的浪费。 (2)本专利技术方法通过诱导离体的雌、雄生殖托成熟、排放精卵，针对性更强，有利于 生殖托的同步成熟，使雌、雄生殖托100%成熟、排卵、排精，排卵量达13个/mm 2,受精率达 100%。提高了受精率与出苗率。 (3)本专利技术方法在人工控制条件下收集刚长出乳突状假根、自然脱落的幼孢子 体进行培育，幼孢子体生长迅速，培养18天，幼苗长度达7-8. 5mm ;成活率高，成活率达 92%-100%。 (4)本专利技术方法不受自然条件、气候变化的影响，可根据需要控制生殖托的成熟， 获得人工苗种。 (5)该方法操作简单，成本低廉，适合规模化生产。 【具体实施方式】 下面通过实施例对本专利技术做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本专利技术，并 不限制本专利技术的范围。 实施例1 ，包括如下步骤： (1)雷州马尾藻种藻的采集和运输：在雷州马尾藻尚不成熟的冬季或春季，选择大潮低 潮期间采集发育健壮、杂藻少、侧枝多、成熟度均匀一致的雌雄种藻，装入整理箱，采用湿运 法运输至目的地。 (2)种藻的暂养：运回的雷州马尾藻种藻，先将雌、雄藻体分别暂养在用孔径50 μ m滤网过滤的海水中，暂养条件：水温20°C，盐度26,光照强度60 μ mol · mlT1之间，充 气使水呈沸腾、翻滚状。 (3)种藻的预处理：用过滤海水清洗藻体表面，除去杂藻和附着物。 (4)生殖托的分离：将预处理后的种藻先用消毒刀片分别切下雌、雄生殖托枝，并 用洁净的毛笔刷除生殖托表面的附着物，再用消毒刀片将生殖托分离成单个或单丛 (5)促熟培育：在温度30°C、光照强度60 μ mol · πΓ2^、海水盐度34范围内，于光照培 养箱中将离体的雌雄生殖托1:1混合、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导雷州马尾藻离体生殖托同步成熟的育苗方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）种藻的采集和运输:在雷州马尾藻尚不成熟的冬季或春季，选择大潮低潮期间采集种藻，装入整理箱，采用湿运法运输至目的地；（2）种藻的暂养：运回的雷州马尾藻种藻，先将雌、雄藻体分别在用孔径50 μm滤网过滤的海水中暂养；（3）种藻的预处理：用经过50 μm滤网过滤的海水清洗藻体表面，除去杂藻和附着物；（4）生殖托的分离：将预处理后的种藻先用消毒刀片分别切下雌、雄生殖托枝，并用洁净的毛笔刷除生殖托表面的附着物，再用消毒刀片将生殖托分离成单个或单丛（3‑5个纯生殖托）；（5）诱导成熟：于光照培养箱中将离体的雌雄生殖托1:1混合，静置培养，光周期设定为12L:12D，每天定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，培养液采用50 μm滤网过滤、煮沸冷却后的海水，每次摇动0.5分钟，培养6‑20天，雌、雄生殖托成熟、排卵、排精；（6）育苗：收集步骤（5）中自然脱落、刚长出乳突状假根的受精卵，静置培养，每天定时更换一次培养液，并定时摇动培养液3次，每次摇动0.5分钟，培养18天，获得幼苗。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵素芬，孙会强，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：广东;44