一种功能化纳米基因导入材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及基因导入材料技术领域，具体涉及一种功能化纳米基因导入材料及其制备方法和应用。一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，包括：步骤一，二氧化钼颗粒的制备；步骤二，氨基硅烷修饰二氧化钼；步骤三，包裹聚乙二醇；步骤四，叶酸修饰，得到纳米MoO2-PEG-FA基因导入材料。本发明专利技术制得的纳米MoO2-PEG-FA基因导入材料为一种平均直径为100nm左右的纳米球形材料，该纳米MoO2-PEG-FA基因导入材料与绿色荧光蛋白质粒基因pGFP结合，用于转染，具有转染效率高、细胞相容性好、细胞生存率高的优点；在人乳腺癌细胞中，该纳米MoO2-PEG-FA和pEGFP-C1的联合体的转染效率达到40%左右。

【技术实现步骤摘要】
一种功能化纳米基因导入材料及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因导入材料
，具体涉及一种功能化纳米基因导入材料及其制备方法和应用。
技术介绍
基因导入方法可以分为两类：第一类是病毒型基因导入方法，是以逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒为载体；第二类是非病毒型基因导入方法，如显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀、阳离子脂质体法、以及利用新兴的纳米基因导入材料进行基因转染。病毒型基因导入方法存在许多严重的不足，例如病毒转染时有可能激活原癌基因。因此，非病毒型基因导入方法是目前的研究热点，但是，上述所述的非病毒型基因导入方法均存在不足：显微注射一次只能处理一个细胞，其转染效率非常低；基因枪的穿透力十分有限；磷酸钙共沉淀法的转染效率受温度、浓度、操作环境等众多因素影响，转染结果很不稳定；阳离子脂质体法虽然表现出良好的转染效率，但是阳离子脂质体因毒性高，使得阳离子脂质体法的应用受到了限制；现有技术中的纳米基因导入材料存在生产成本高、制备用原料不易得、难以普及推广应用的缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种功能化纳米基因导入材料的制备方法。本专利技术的目的之二在于针对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，二氧化钼颗粒的制备：将钼、三氧化钼和氯化铵进行水热反应制得二氧化钼颗粒；步骤二，氨基硅烷修饰二氧化钼：将步骤一制得的二氧化钼颗粒与3‑氨丙基三乙氧基硅烷在乙醇中进行回流反应一定时间，并离心水洗后，得到硅烷修饰物；步骤三，包裹聚乙二醇：将预先制得的聚乙二醇‑OTS和步骤二制得的硅烷修饰物加入到乙醇中，然后搅拌一定时间后，加入氢氧化铵，并进行离心水洗，得到固体物；步骤四，叶酸修饰：将叶酸加入到磷酸缓冲液中，并加入1‑(3‑二甲基氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基丁二酰亚胺，然后加入步骤三中得到的固体物，然后搅拌一定时间后...

【技术特征摘要】
1.一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，二氧化钼颗粒的制备：将钼、三氧化钼和氯化铵进行水热反应制得二氧化钼颗粒；步骤二，氨基硅烷修饰二氧化钼：将步骤一制得的二氧化钼颗粒与3-氨丙基三乙氧基硅烷在乙醇中进行回流反应一定时间，并离心水洗后，得到硅烷修饰物；步骤三，包裹聚乙二醇：将预先制得的聚乙二醇-OTS和步骤二制得的硅烷修饰物加入到乙醇中，然后搅拌一定时间后，加入氢氧化铵，并进行离心水洗，得到固体物；步骤四，叶酸修饰：将叶酸加入到磷酸缓冲液中，并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺，然后加入步骤三中得到的固体物，然后搅拌一定时间后，离心并用乙醇洗涤，然后再用水洗涤，得到纳米MoO2-PEG-FA基因导入材料。2.根据权利要求1所述的一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，其特征在于：步骤一中，所述钼、所述三氧化钼和所述氯化铵的摩尔比为0.5~1：1~3：4~6。3.根据权利要求1所述的一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，其特征在于：步骤一中，所述水热反应的温度为150℃~170℃，所述水热反应的时间为22小时~26小时；所述水热反应的压力为600KPa~700KPa。4.根据权利要求1所述的一种功能化纳米基因导入材料的制备方法，其特征在于：步骤二中，所述二氧化钼颗粒和所述3-氨丙基三乙氧基硅烷的摩尔比为0.5~2：4~10；所述乙醇的用量为，使所述二氧化钼颗粒的质量-体积浓度为0.8g/L~1.2g/L。5.根据权利要求1所述的一种功能化纳米基因导入材料的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：王深明，林颖，张德元，常光其，周鸿雁，李梓伦，邵楠，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东;44